实训八固定化技术.ppt
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1、实训八 固定化技术,微生物与发酵工艺,1.了解固定化细胞的原理。 2.掌握用海藻酸钠制备固定化酵母细胞的方法。,一、实验目的,二、实验原理,细胞固定化的方法有多种,如吸附法、载体偶联法和包埋法等。工业上常用包埋法固定微生物细胞。根据包埋剂的特性,如在海藻酸钠呈溶液状时,将细胞加入混匀,然后在氯化钙中凝固形成海藻酸钙凝胶,凝胶颗粒中的微小空格将细胞固定。海藻酸钙凝固的颗粒能反复使用,细胞在空格中可以新陈代谢(固定活细胞),也可利用细胞中的酶进行酶促反应(固定死细胞)。,海藻酸钠、0.2 mol/L氯化钙溶液(4.44g氯化钙,蒸馏水200mL)、市售活性干酵母粉、青霉素、天平、纱布、细绳、20m
2、L注射器、250mL烧杯、250mL三角瓶、搅拌、电炉、培养箱 2.沙保培养基 蛋白胨10g,葡萄糖40g,蒸馏水1000mL ,pH自然,115灭菌20 min。,三、实验材料,1.称取1.5g海藻酸钠于250mL烧杯中,加蒸馏水至100mL处,加热搅拌溶解。冷却后加入1g市售酵母粉,搅拌均匀。 2.配制0.2mol/L氯化钙溶液200mL。将海藻酸钠酵母混合液装入20mL注射器中,逐滴加入到0.2mol/L氯化钙溶液中,搅拌成珠(固定酵母)。,四、实验步骤,3.用蒸馏水洗涤固定酵母2次后,加入到灭过菌的200mL沙保培养基中(其中加入1mg青霉素)。 4.将固定酵母于28静置培养2天后观察,可见沙保培养基中有大量的CO2气泡产生,嗅气味有酒香;用刀片切开固定酵母,镜检可见大量密集的酵母菌。,四、实验步骤,1.海藻酸钠溶液滴进氯化钙溶液中为什么会凝固? 2.固定化细胞与游离细胞比较,有什么优点?,五、结果与讨论,
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