《重组DNA》PPT课件.ppt
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1、11 重组DNA技术,11.1 重组DNA技术是基因工程的核心技术 11.2 获得需要的目的基因(外源基因) 11.3 构建重组质粒和基因克隆 11.4 转化受体细胞和转化子的筛选 11.5 转化子的分析Southern杂交,重组DNA技术的重大突破带动了现代生物技术的兴起,并很快产生了许多生命科学的高技术产业。 重组DNA技术,又称为基因或分子克隆技术,是基因工程的核心技术。该技术包括了一系列的分子生物学操作步骤。 所谓基因工程(genetic engineering)就是有意识地把一个生物体中有用的目的基因转入另一个生物体中,使后者获得新的遗传性状或表达所需要的产物。,11.1重组DNA技
2、术是基因工程的核心技术,生物技术,获得需要的目的基因常用的方法: (1)直接从生物体中提取总DNA,构建基因文库(gene library),从中调用目的基因; (2)以mRNA为模板,反转录合成互补的DNA片段; (3)利用聚合酶链式反应(PCR)特异性地扩增所需要的目的基因片段,等等。,11.2 获得需要的目的基因(外源基因),细胞内总DNA的提取分离与基因文库的构建,细胞内总DNA的提取分离程序,反转录人工合成互补DNA,构建基因文库获取目的基因存在的问题 费时费事 内含子序列,以mRNA为模板,以短的寡核苷酸(oligo(dT))分子作引物,加入dATP, dTTP, dGTP和dCT
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