常用消毒方法.doc
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1、 糖度计溶液的浓度用密度法来表示,即用密度计测定。糖水的浓度则用糖度计(Sacchrometer)、波林糖度计(Balling)或白利糖度计(Brix)测定,其中最常用的是白利糖度计。测定糖液用的3种密度计的标度完全一致,均直接表明了糖液浓度的质量百分率。 相对密度是任何溶液的质量和同容积水的质量的比值,它随温度变化而变化,因此测定时必须校正温度。3种糖度计在使用时也必须校正温度。各种糖液密度计上每一表度相当于1%蔗糖溶液的质量百分率。即使糖的种类不同,只要浓度相同,它们各自的相对密度就会非常接近。例如每100mL含糖量为10g的糖液,相对密度(20/4)几乎都等于1.0386,因此,糖液密度
2、计可用于测定任何糖溶液的浓度。为了准确起见,每支糖度计的标度范围以10糖度(即浓度变化为10%)为宜。波美计标度由于能转化为密度读数,所以也可用以检测糖水浓度,但从该表上不能直接读得糖液浓度百分率,需要进行转换。 纯糖溶液内可溶性固形物全为糖类,故能测定糖液浓度,使用时要注意温度的校正。 Brix波美度是以100克蔗糖水溶液中所含的蔗糖含量为标度。如果样品所含的可溶性固体分的主要成分为砂糖,BRIX值可叫做糖度。如果测量包含糖以外的可溶性固体的样品,BRIX值可叫做样品中可溶固体的综合浓度。 常用消毒方法1、 酒精量取790毫升95%酒精加蒸馏水定容1000毫升为75%酒精。皮肤、温度表、器械
3、表面。不使用伤口和黏膜。杀菌效率90%2、 甲醛溶液房间、器械、衣服等消毒,不适用食品场所消毒。50-250毫升3740%福尔马林,加蒸馏水至1000毫升,即210%浓度甲醛溶液。10%甲醛溶液用于熏蒸,熏蒸直接加热或者加入高锰酸钾。密闭624小时。甲醛气体熏蒸:用量18毫升/立方米,加36倍水,煮沸。加入高锰酸钾量相当于福尔马林4050%。漂白粉用量相当于福尔马林的6080%,使用时加入相当于福尔马林50%的水。密闭1224小时。加热法 2 550毫升 /立方米,可杀死芽孢。福尔马林高锰酸钾 40毫升-30克高锰酸钾 /立方米漂白粉法 20毫-20克 /立方米 熏蒸24小时后方可进入。刺激性
4、、毒性3、漂白粉0.55%地面或物体表面。腐蚀金属及织物,刺激皮肤。用于芽孢1020%,1000毫升/平方米,12小时。4、新洁尔灭 0.25%皮肤或器皿表面。5、来苏水刺激小,15%,家具物品表面6、蒸汽消毒手提灭菌锅0.11MP1535分钟 121度7、干热灭菌玻璃仪器及不使用湿热灭菌的物品。160度12小时8、硫磺熏蒸3克/立方米,放于小木材之上燃烧。房间保持潮湿。强烈刺激性、毒性常用培养基一、麸皮汁20%麸皮煮沸1小时过滤。酵母加5%蔗糖。用于霉菌、酵母。二、麦芽汁培养基大麦芽粉碎加4倍60水,于55-60保温糖化45小时(最好做淀粉试验不显蓝色为止),不断搅拌。保温完毕,用纱布过滤,
5、收集滤液,煮沸,再用滤纸或脱脂棉过滤,得澄清麦芽汁。如果要求不高也可只过滤一次。每1千克麦芽粉可制1518波美度麦芽汁3500-4000毫升。制作培养基时将麦芽汁稀释到1012波美度,固体斜面加2%琼脂,PH自然,115灭菌20分钟。适用酵母、霉菌。三、霉菌三角瓶用小米培养基小米洗净加20%麸皮,按1:1.2加水,常压蒸熟30分,分装试管或三角瓶,灭菌备用。 四、米曲汁1千克大米洗净,加水5千克,蒸1小时使大米稀烂成粥状,冷却至60度,冷却到60加入米曲(或用根霉曲、白曲或者大曲代替,一般大曲加入30%左右,白曲、根霉20%左右),再加水4千克(水可适量少加以提高滤液糖度),55度保温4小时,
6、煮沸,过滤,滤液加水调整为1012糖度。用硫酸调PH,霉菌调6.0左右,酵母调5.0左右,也可自然PH。固体培养基加2%琼脂,分装试管,灭菌备用。适用酵母、霉菌。霉菌种曲质量观察1取培养成熟种曲于光线较强处观察菌丝生长情况和孢子色泽。2取少量种曲闻是否有曲香。3取种曲掰开看内部是否有夹生或白心现象。4观察整批种曲,观察是否有与种曲菌丝孢子色泽不吻合的其他杂菌存在,记录形态大小特征色泽。检查记录每批种曲感官质量。种曲记录培养时间、温度、配料记录、翻曲记录。化验检测水分、孢子数、孢子发芽率。种曲孢子数不足或者孢子繁殖力差,易造成污染。曲料含水高,培养温度高,湿度大,氧气供给不适都易造成污染。种曲培
7、养中温度超过37易生水毛(毛霉),低于28易染青霉,青霉在较低温度下容易繁殖,菌从绿色,大量繁殖后产生霉臭气味。制曲主要污染的细菌为小球菌,该菌好气。繁殖速度较霉菌酵母快。枯草芽孢杆菌,耐热,污染后会造成曲子发粘,严重时有异臭,产生氨味。种曲外观:外观无杂菌,孢子整齐旺盛,无夹心,无青霉及其他异色,孢子数达到30亿/克以上,发芽率在90%以上,杂菌8千万/克以下。种曲外观:外观无杂菌,孢子整齐旺盛,无夹心,无青霉及其他异色,孢子数达到30亿/克以上,发芽率在90%以上,杂菌8千万/克以下。水分少则孢子少而瘦弱。白曲培养于麦芽汁培养基,菌从为肉桂色,菌丝无色,孢子球形,发育适温32-35,有生酸
8、能力。生产菌种性能衰退、退化检查霉菌菌丝不健壮,产孢子数减少,生产性能减弱,菌落颜色变深,斜面试管生长缓慢,菌落形态改变。制曲培养时曲料发硬红曲霉色度降低。白曲颜色变深。酵母菌出芽缓慢,或不出芽而形成孢子。酵母菌落正常光环湿润,退化后出现褶皱型,菌落变小。显微镜出芽不规则,细胞形态不规则。菌种退化最易观察菌落和细胞形态改变。 培养基的配制与灭菌一、 器皿的清洗1新玻璃器皿含有游离碱,一般先将其在2%盐酸溶液中浸泡数小时,再用水清洗干净,也可将器皿先用热水浸泡,再用去污粉或肥皂粉刷洗,再经热水洗刷,自来水清洗。2用过的玻璃器皿,若盛有废弃物,先经高压灭菌后清洗,对只带有细菌标本或培养物的器皿,用
9、过后应立即将其浸泡于2%来苏水中经24小时再取出清洗。对于普通培养基必须煮沸30分钟后在清洗。用蜡封口的试管先高压蒸汽灭菌,然后取出趁热拔去粘有蜡的棉塞,立即倒去培养物,再将试管放入温水稍加洗刷后放入5%肥皂水内煮沸5分钟去除油污后清洗。加过消泡剂或者做过通气培养的大三角瓶,一般将倒空的瓶子用碱粉或10%火碱水刷洗后再用水洗。管壁上粘有培养物,用试管刷难以去除,可以铁丝绑上纱布,润湿后沾去污粉擦洗。吸过菌液的吸管,用完后应放在5%石炭酸溶液内消毒,未吸过菌液的吸管用后放于清水中防止干燥。吸过带油液体的吸管应先在10%氢氧化钠溶液中浸泡半小时,去掉油污再清洗。培养基的制备大致过程配料溶解校正PH
10、加凝固剂融化过滤分装加棉塞包扎灭菌无菌检查1溶解配料 制备培养基先在烧杯中加入所需水量的一半,按配方称取各种材料依次加入水中,逐个溶解,最后加足水量。在加料过程中,各种成分溶解的次序先加缓冲化合物主要元素微量元素维生素等2调PH配料溶解完毕,冷却到室温,再加入酸或者碱。要缓慢少量,多加搅拌,防止局部过酸过碱而破坏营养成分,常用10%氢氧化钠和6摩尔/升盐酸调PH3配置固体培养基时,需加入琼脂或者明胶等凝固剂。若以琼脂为凝固剂,将琼脂加入煮沸的培养基中,不断搅拌至溶化,最后补足蒸发的水分。4过滤,在两层纱布中加脱脂棉,趁热过滤。5分装,装入试管的固体培养基不易超过试管高度的1/5。装入三角瓶中的
11、液体培养基不超过总体积的一半。切勿使培养基沾污试管口和瓶口。6包扎 做通气培养可用68层纱布代替棉塞。7灭菌 固体试管培养基斜面长度不超过试管一半。8无菌检查 将培养基放入培养箱做培养做无菌检查。固体试管应烘干试管内壁的水分。培养基灭菌方法液体及琼脂固体培养基。一般121灭菌20分钟,若容器大,粘度大,培养基多应延长时间。明胶培养基 112灭菌25分钟,最高温度不应超过112,否则明胶凝固能力消失。马铃薯培养基 因含有抵抗能力很强的马铃薯杆菌,121灭菌30分钟。培养基灭菌时会发生各种变化,只有极少数培养基对热完全稳定。大多数糖类灭菌都发生改变,可能形成对微生物有毒害的物质,含糖高的培养基灭菌
12、后颜色变深。培养基蛋白质含量越高,杀菌速度越慢。麦芽汁、米曲汁灭菌后大分子物质凝集会发生沉淀。甲醛对细菌和酵母杀菌效果好,硫磺对霉菌效果好。甲醛熏蒸,按甲醛用量的一半称取高锰酸钾于瓷碗或玻璃容器内,再量取甲醛,倒入容器,立即关门,几秒种后甲醛即可挥发。熏蒸至少在使用前24小时进行,熏蒸后密闭保持12小时。熏蒸完毕量取为甲醛一半的氨水迅速放在室内,可以很快减弱甲醛的气味。硫磺熏蒸在地面上洒水,曲室密闭,室内保持一定湿度,将硫磺用火燃烧,生成二氧化硫(有刺激性和毒性),与空气中的水结合生成亚硫酸杀菌,用量一半23克/立方米。定期对无菌室、实验室、发酵车间等处的环境进行检查做到心中有数,以便采取措施
13、对空气环境消毒。检查空气含菌程度的方法,用普通肉汤或麦芽汁琼脂培养基制备平板,取平板放置于四角和中间区域,每处放2个平板。打开一个平板暴露5分钟,另一个平板做空白对照,然后于30-32培养48小时,观察有无菌落生长,计数。淀粉酶、糖化酶、纤维素酶都是诱导酶,这类酶的形成只有在底物存在时才能生成。,但淀粉含量过高则霉菌易产酸影响质量。细菌曲生产工艺一、 细菌斜面菌种保藏细菌菌种保藏采用牛肉膏蛋白胨培养基。培养基配方:牛肉膏0.5% 蛋白胨1% 氯化钠0.5% PH7.2-7.4, 121灭菌20分钟。固体斜面接种后于35培养3天。放置于冰箱4-6保藏。芽孢杆菌每3月移植一次。二、 生产工艺流程生
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