常绿杜鹃花的DNA提取技术研究毕业论文.doc
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1、云南农业大学毕业论文YUNNAN AGRICULTURE UNIVERSITY毕 业 论 文论文题目:常绿杜鹃花的DNA提取技术研究学生姓名:朱兴朗学生学号:20080340专业班级:08园林学院名称:园林园艺学院指导老师:张敬丽学院院长:李文祥2012年5月5日V云南农业大学毕业论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的论文是本人在老师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。学生签名:日期: 年 月 日毕业
2、论文版权使用授权书本毕业论文作者完全了解学校有关保留、使用论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权湖南大学可以将本论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本论文。本论文属于1、保密 ,在 年解密后适用本授权书。2、不保密。(请在以上相应方框内打“”)学 生签名:日期: 年 月 日指导教师签名:日期: 年 月 日常绿杜鹃花的DNA提取技术研究摘 要本研究以分布于云南、贵州等西南山地(海拔2020一4435m)的数十种杜鹃属植物(RhododendronsP.)为材料进行杜鹃属植物进行总D
3、NA提取,采用改良CTAB法和改良SDS法对照白杜鹃DNA进行提取,结果表明:改良SDS方法提取的杜鹃花总DNA不仅带亮,而且比改良CTAB法提取的DNA杂质少;采用幼叶比功能叶提取的DNA质量好。关键词:DNA提起技术;杜鹃花;CTAB法;SDS法;技术对比The Operating Theory of Essential Truth in JournalismAbstractThe research on distributed in Yunnan, Guizhou and southwest mountain ( elevation 20204435m ) of dozens of sp
4、ecies of Rhododendron ( RhododendronsP. ) were used as the materials of Rhododendron for total DNA extraction, using improved CTAB method and the improved method of SDS control white azalea DNA extraction, the results showed that: the improved method for extracting total SDS azaleas DNA not only wit
5、h a bright, and the ratio of the improved CTAB method of DNA extraction using fewer impurities; young leaves than functional leaf extract DNA good quality.Key words: DNA lift technology;Rhododendron;CTAB;SDS;Technical comparison目 录毕业论文原创性声明和毕业论文版权使用授权书摘 要Abstract附表索引一、 绪 论1二 、课题研究背景及目的1三 、从研究现状1四、实验
6、方法及内容21实验材料和实验方法21 . 1 实验材料21. 1. 1 植物材料21. 1. 2 实验仪器及药剂21 . 2 实验方法2121 杜鹃基因组DNA的提取2122杜鹃基因组DNA的检测22结果分析53结论及讨论5结 语6参考文献6附录7致谢8插图索引图1 4图2 5常绿杜鹃花的DNA提取技术研究一、绪 论杜鹃属(Rhododendron)属于杜鹃花科(Ericaceae)杜鹃花亚科(Rhododendrofdea e),杜鹃或杜鹃花是杜鹃属植物的统称。19世纪中叶,英国学者在喜马拉雅考察,发现大量杜鹃,引起世界各国对中国西南高山地区杜鹃资源的注意,随后英、法、美、德、俄等国的植物学
7、家深入中国西南山地调查采集,发表了大量新种,同时大量引入中国杜鹃,并与本土杜鹃杂交,培育出无数的杜鹃新品种,使杜鹃成为西方最重要的木本花卉之一,不仅大量栽培,而且研究也相对普遍和深入。相比之下,国内对杜鹃研究较少,起步晚,在客观上形成了杜鹃“墙内开花墙外香”的局面。云南、四川、西藏三省区的高海拔山地几乎拥有中国杜鹃花种类的90%以上,有“世界杜鹃大花园”之称,观赏价值极高的常绿杜鹃在四川集中分布。基础研究滞后,严重影响野生杜鹃资源的开发利用。本研究应用计算机、电子显微镜和DNA分子标记技术,对46种杜鹃的遗传多样性、亲缘关系和系统演化进行分析,旨在探索新技术在杜鹃研究上的应用,并为野生杜鹃的准
8、确分类提供理论依据,有利于杜鹃资源的合理开发和利用。二、课题研究背景及目的杜鹃花( Rhododendron L. ) 是世界名花, 中国十大名花之一, 被誉为“木本花卉之王”。我国是世界杜鹃花属植物分布的中心和发源地, 杜鹃花达530多种, 约占世界900 余种的59%。被列入“国际人与生物圈保护区网”的长白山, 具有优越的自然条件, 非常适于各种植物生长。其中野生杜鹃花就有9种, 是整个东北地区杜鹃花属植物分布最集中的地方。在众多杜鹃花的研究文献中, 多是介绍杜鹃花的形态、生态、观赏、培养、药用等方面的报道, 从分子标记的角度研究杜鹃花的工作还较少。利用RAPD 技术进行长白山野生杜鹃的研
9、究, 国内外尚未见报道。本研究以长白山杜鹃花为试材, 对RAPD反应条件进行了优化。 三、研究现状到目前为止,全世界已知杜鹃花属种类约为967种。中国有561种杜鹃,占世界总种数的58,绝大多数常绿乔灌木型杜鹃在中国,中国是世界杜鹃的原产地和分布中心 。一些学者对杜鹃属(Rhododendron)植物运用分子标记的方法进行了一些研究,主要是采用RAPD技术 、ITS序列 ,顾奇萍等探讨了云锦杜鹃ISSR扩增条件的优化 。本试验以云南、贵州等西南山地(海拔2020一4435m)的数十种杜鹃属植物为试验材料进行DNA提取,旨在为研究杜鹃的遗传变异奠定基础。四、研究方法及内容1 实验材料与实验方法1
10、 . 1 实验材料1. 1. 1 植物材料 材料采集于云南、贵州等西南山地(海拔2020一4435m)的数十种杜鹃属植物嫩叶, 用硅胶只作为干标本带回实验室备用。1. 1. 2 试验仪器与药剂 主要药剂:十六烷基三甲基溴化胺 (CTAB)、巯基乙醇、(三轻甲基)氨基甲烷(Tris)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、乙二胺四乙酸(EDTA)、氯化钠(分析纯)、无水乙醇(分析纯)、氯仿(分析纯)、异戊醇(分析纯)、异丙醇(分析纯)、硼酸(分析纯)、硅胶、琼脂糖、Taq酶、10buffer(含Mg)、ISSR引物、DNA nlarker、溴酚蓝、hDNA、液氮。主要仪器:高压灭菌锅、恒压恒流电泳仪、水平电
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