和光试剂SOP文件汇编0703ZM.doc
《和光试剂SOP文件汇编0703ZM.doc》由会员分享,可在线阅读,更多相关《和光试剂SOP文件汇编0703ZM.doc(554页珍藏版)》请在三一文库上搜索。
1、WAKOWako Pure Chemical Industries,Ltd试剂 SOP 文件汇编医院: 科室: 责任人: 编制日期: 请在使用前仔细阅读本文后再使用本产品产品名称酸性磷酸脢(Acid Phosphatase)测定方法2-氯-4-硝基苯 PO43-基质法商品编号商品编号商品名称请仅作为体外诊断试剂使用修订表修订者修订日期修订者修订日期SOP-ACP06019 of 141原理1-1.目的1-1-1目的 本试剂是用于测定血清中的总酸性磷酸酶活性和前列腺酸性磷酸酶活性的体外诊断用试剂。1-1-2. 本实验室使用本试剂的分析仪器 本实验室使用本试剂的分析仪器1-2. 临床意义1-2-1
2、. 临床意义 大量的酸性磷酸酶(ACP)主要存在于前列腺组织及其分泌液中,其余则散布在红血球、肝、肾、骨髓等。测定血清中的酸性磷酸酶活性(总体、前列腺),是一项有利于诊断前列腺癌、前列腺炎以及判断其治疗效果的临床检查项目。?1)1-2-2. 概述本试剂是在 Lorentz,K.发表的基质(2-chloro-4-nitrophenyl phosphate)里加入环状糊精衍生物 的活化作用下,用酵素反应速率测定法测定酸性磷酸酶活性的试剂。1-2-3. 测定原理在含有 2-chloro-4-nitrophenyl phosphate 的缓冲液(pH6.0)中,让样品反应因样品中的酸性磷3-3-酸酶使
3、 2-氯-4-硝基苯 PO4酸酶活性值。处于游离状态;通过测定此 2-氯-4-硝基苯 PO4的生成速率,可求出总酸性磷用酒石酸溶液代替缓冲液进行同样的操作,来求得样品中的非前列腺酸性磷酸酶活性值,算出与总酸性磷酸酶的活性差,并由此求出其前列腺酸性磷酸酶活性值。2.关于患者标本2-1. 标本的采集2-1-1. 标本的种类 请使用新鲜的血清作为标本。请不要使用全血、血浆和尿做标本。因血球中含有酸性磷酸酶,所以,请不要使用已溶血的血清。2-1-2. 抗凝剂的影响 本试剂是血清标本测定用试剂,不能测定血浆标本。2-1-3. 本实验室对患者采血前准备的相关规定 本实验室对患者采血前准备的相关规定(采血前
4、与患者进行联络,说明有关事项)2-1-4. 本实验室对患者标本采集的相关规定本实验室对患者标本采集的相关规定(采血顺序,指定采血使用的器具等)2-2. 患者标本的处理2-2-1. 患者标本的处理方法?21)采血后约 4060 分钟完全凝固的血液。2)以 25003000rpm(约 1000G)的速度,离心 10 分钟。3)离心分离后,迅速把血清成份放入到其他干净的试管内。注意:不要让血球进入试管。从 1)到 3)的工序请在 2 小时内完成。2-2-2. 本实验室对标本运送的有关规定 本实验室对标本运送的有关规定(从采血场所到检查室的运送程序)2-2-3. 本实验室对标本预处理的有关规定本实验室
5、对标本预处理的有关规定(从采血之后到测定之前的预处理工作)2-3. 标本的保存条件和稳定性2-3-1. 关于到测定时的时间间隔 请在采集、处理标本后马上进行测定。血清放在室温下会失去碳酸气,pH 值会上升,酸性磷酸酶也会产生惰性化。在保存血清时,一定要密封,并在 05下冷藏保存,或是冰冻保存。但为了测定,需要置其于室温时,请在 1 小时内进行测定。2-3-2. 标本的保存条件和稳定性求当不能马上进行标本测定时,一定要遵守下表的保存条件与稳定性期限进行保存。?3)保存方法温度要求稳定性室温23 容易惰性化,所以,请不要在室温下保存冷藏4 在数天内可处于稳定状态冷冻-20 在 3 个月内可处于稳定
6、状态2-3-3. 本实验室对标本保存的相关规定本实验室对标本保存的相关规定(保存条件、保存场所、保存容器等)2-4. 干扰物质的影响2-4-1. 干扰物质对于测定结果的影响按 NCCLS EP-7A 方法?4 予以说明。其干扰物质在下表浓度下不会影响测定值。 因红血球中含有酸性磷酸酶,所以,如果用已溶血的血清,则不能测得正确的测定值。 总酸性磷酸酶活性(T-ACP)干扰物质常用单位SI 单位胆红素(游离型)50 mg/dL855 mol/L胆红素(结合型)40 mg/dL684 mol/L乳糜(Intrafat)2.0 %20 mL/L抗坏血酸(维生素 C)50 mg/dL2839 mol/L
7、非前列腺酸性磷酸酶活性(B-ACP)干扰物质常用单位SI 单位胆红素(游离型)30 mg/dL513 mol/L胆红素(结合型)40 mg/dL684 mol/L乳糜(Intrafat)2.0 %20 mL/L抗坏血酸(维生素 C)30 mg/dL1703 mol/L2-4-2.本实验室对存在干扰物质的标本的判断标准及相关规定关于存在干扰物质的标本的判断标准及相关规定(目视以及其他方式的确认方法)2-5. 标本拒收2-5-1. 标本拒收 请参照标本的采集、干扰物质的影响和存在干扰物质的标本的判断基准以及其后标本处理的相关规定执行。2-5-2. 本实验室对不能测定标本的判断及其判断后处理的相关规
8、定 本实验室对不能测定标本的判断及其判断后处理的相关规定(由于干扰物质的影响而被排除、标本不完备等判断标准以及之后的处理等)2-6. 加入标本容器的标本量将标本从采血管移到其他容器而进行测定时,必须在各个标本容器里,加入测定所需的标本量。详情 请参照机器的使用说明书。另外,把采血管原样放在分析装置上测定时,请同时阅读机器的使用说明书。3.试剂3-1. 注意事项3-1-1. 使用中的注意事项注意使用中的注意事项请根据试剂说明书中所记载的使用方法使用。对于其所记载的使用方法及使用目的之外的使用,不能保证测定值 的可靠性。请根据使用说明书使用测定机器,并在合适的条件下使用。详情请咨询仪器厂家。请不要
9、使用超过了使用期限的试剂。试剂在指定的条件下保存。请不要使用冻结的试剂,否则,得不到正确的结果。试剂在开封后请尽早使用;在保存时,也要关紧盖子并在指定的条件下保存。本品中的容器、附属品不可用于其他用途。执行本操作时的测定值,按国际单位(IU/L,37)为标准。预防危险的注意事项试剂误入口或眼中或是沾上皮肤时,请立即用大量的清水冲洗,必要时请至医院就诊。废弃物处理的注意事项在废弃时,请根据废弃物处理及清除的相关法规及排水标准进行适当的处理。与样品接触过的试剂及试剂容器等,要作为有感染性的危险物品进行处理。3-2. 包装3-2-1. 商品编号、商品名、包装、配套仪器 ACP-HA 有下表中的种类。
10、商品编号商品名称包装试剂瓶适用机型439-58401ACP-HA 7150Set通用3-3. 主要成份3-3-1. 成份、含量、单位1. 缓冲液成份含量单位琥珀酸缓冲液 pH5.850mmol/L含-cyclodextrin 衍生物2. 基质剂(溶解时)成份含量单位2-chloro-4-nitrophenyl phosphate-ammonium20mmol/L3. 基质剂溶解液成份含量单位tris 缓冲液 pH9.040mmol/L4. 酒石酸溶液成份含量单位琥珀酸缓冲液 pH5.850mmol/L酒石酸25mmol/L含-cyclodextrin 衍生物3-4. 样品及试剂使用量3-4-1
11、. 样品及试剂使用量样品量R1 试剂量R2 试剂量14.0L200L50L【总酸性磷酸酶(T-ACP)】05710 分主波长 405nm37样品 14.0L缓冲液 200L基质液 50L副波长 480nm【前列腺酸性磷酸酶 (B-AcP)】05710 分主波长 405nm37样品 14.0L酒石酸溶液 200L基质液 50L副波长 480nm【前列腺酸性磷酸酶 (PAP)】前列腺酸性磷酸酶活性值=(总酸性磷酸酶活性值)-(非前列腺酸性磷酸酶活性值)上述的测定顺序,是日立 7170 型分析仪的顺序。其具体的测定参数,请参照各仪器所用的已设定的各类试剂的参数。关于反应、测定时的温度,请设定在 37
12、。详情请参照仪器的使用说明书。3-5. 除试剂外的所需物品3-5-1. 测定时除试剂外的所需物品3-检量系数设定用 2-氯-4-硝基苯 PO4(和光纯药制造、商品编号:412-22401)质控血清 I wako(B)(和光纯药制造、商品编号:417-92301)质控血清 II wako(B)(和光纯药制造、商品编号:413-92401)生理盐水3-6. 试剂的准备3-6-1. 试剂的准备【总酸性磷酸酶】缓冲液(R1):请按原样使用。若在 210下保存,请在一个月内使用。基质液(R2):用基质剂溶解液(10mL)1 瓶,溶解基质剂(10mL 用)1 瓶,作为基质液使用。在调制后,若在 25以下保
13、存,请在当天使用;若在 210保存,请在 7 天内使用。【非前列腺酸性磷酸酶】酒石酸溶液(R1):请按原样使用。若在 210下保存,请在一个月内使用。基质液(R2):用基质剂溶解液(10mL)1 瓶,溶解基质剂(10mL 用)1 瓶,作为基质液使用。在调制后,若在 25以下保存,请在当天使用;若在 210保存,请在 7 天内使用。3-6-2. 本实验室试剂准备的相关规定本实验室试剂准备的相关规定3-7. 试剂的保存条件及稳定性要求3-7-1. 保存方法及稳定性要求 试剂不可冻结。未开封的缓冲液、酒石酸溶液,应保存于 25以下,并在包装上规定的期限内使用(生产后 15 个月内)。在开封后,若保存
14、于 25以下,请在包装记载的期限内使用。未调制的基质剂、基质剂溶解液,应保存于 25以下,并在包装上给出的期限内使用(生产后 15 个月内)。在调制后,保存于 25以下,请在当天使用;若保存于 210环 境,请 7 天内使用。3-7-2. 本实验室关于试剂的保存场所及保存条件的规定本实验室关于试剂的保存场所及保存条件的规定(保存条件、保管场所等)3-8. 试剂性能可被接受的指标3-8-1. 试剂性能可被接受的指标 若把生理盐水(BLANK)作为样品而进行操作时,其吸光度是 0.0019 以上。把特定活性的质控血清(酸性磷酸酶 100IU/L,37)作为样品进行操作时,其吸光度变化是0.0060
15、.200。若测量成功的话,质控样品的测定值在容许范围内。4.校准4-1. 校准品3-4-1-1. 指定的校准品 检量系数设定使用 2-氯-4-硝基苯 PO4(和光纯药制造、商品编号:435-97701)注意使用实验参数表的显示值,算出检量系数。3-检量系数设定使用 2-氯-4-硝基苯 PO43-,在开封后只能使用一次。3-3检量系数设定使用 2-氯-4-硝基苯 PO4,只能使用于反应物是 2-氯-4-硝基苯 PO4 的测定试剂。3-请注意:每批检量系数设定使用 2-氯-4-硝基苯 PO4,2-氯-4-硝基苯 PO4浓度是不一样的。请不要使用超过了使用期限的试剂。试剂在规定的条件下保存。3-检量
16、系数设定使用 2-氯-4-硝基苯 PO4全部含有防腐剂(0.1%的叠氮化钠)。叠氮化钠是结合铜和铅等重金属而形成的叠氮化物。重金属的叠氮化物在干燥状态下若有冲击的话,会爆炸。所以,将其排入水后,请用充分的水冲洗,不要使其残留在排水管里。4-2. 校准品的准备4-2-1. 校准品的准备 在校准品回到室温后再使用。4-2-2. 本实验室关于校准品准备的规定本实验室关于校准品准备的规定(溶解时使用的器具、溶剂等)4-3. 校准品的保存方法及稳定性要求4-3-1. 校准品的保存方法及稳定性要求 校准品请在开封后的当天使用。4-3-2. 本实验室的校准品的保存场所及保存条件 本实验室的校准品的保存场所及
17、保存条件(保存条件、保存场所、配制后的使用方法等)4-4.测量方法4-4-1. 测量方法3-使用实际使用的仪器,将该项目计算系数设置为 K-Factor。若使用从 2-氯-4-硝基苯 PO4的毫摩尔消光度系数算出的 K-Factor 时,请另外索取资料。设定机器,使其利用 K-Factor 可自动算出 T-ACP活性值、B-ACP 活性(IU/L,37) 值。4-4-2. 设定测量的相关参数 在测量时,其相关参数的设定,请参照仪器使用说明书和使用本试剂时所设定的参数。关于设定 K-Factor 时的 2-氯-4-硝基苯 PO43 浓度,请参照检量系数设定用的 2-氯-4-硝基苯 PO4附属文件
18、。请使用项目间换算画面,算出前列腺酸性磷酸酶(PAP)的活性值。(PAP)=(T-ACP)-(B-ACP)3-的5.质控样品的测定5-1. 质控样品的测定5-1-1. 质控样品的测定、测定频率质控血清 I wako( B)和质控血清 II wako( B)每天测定,并确认是正确地进行测定。请在制作新 的校准线时、在使用新瓶试剂时、根据仪器使用说明书进行维护或是解决故障时,进行重新测定。关于测 定控制血清的间隔,请参考实验室的处理标本数再进行设定。5-1-2. 设定质控样品使用的质控样品质控样品名称样品的种类保存条件测定间隔5-2. 质控样品的测定顺序5-2-1. 质控样品的测定顺序1)根据仪器
19、的 SOP 补充试剂。2)根据仪器的 SOP,把质控样品放到机器上。3)根据仪器的 SOP 而测定质控样品,确认其处于容许范围之内。4)在确认质控样品的测定值没有问题后,进行患者样品测定。5-2-2. 计算结果 测定值由仪器自动输出。仪器的操作者在按操作手册稀释样品时,其测定值不会乘以稀释倍率;在报告结果时,必须乘以稀释倍率后,再报告测定值。SOP-ACP060114 of 146.样品的测定6-1. 样品的测定顺序6-1-1. 样品的测定顺序1)根据规定的顺序,准备好处理后的样品。详情请参照“2. 关于患者样品”部分。2)根据仪器的 SOP 补充试剂。3)根据仪器的 SOP,把患者样品放到仪
20、器上。4)根据仪器的 SOP,测量患者样品。6-1-2. 计算结果测定值由仪器自动输出。仪器的操作者在按照说明手册稀释样品时,其测定值不会乘以稀释倍率;在 报告时,必须乘以稀释倍率后,再行报告测定值。6-2. 样品测定时的注意事项1)为了预防感染,在处理样品时要十分小心。2)确认工作线已正确地制作,以及质控样品的测定值没有问题后,再进行患者样品测定。3)根据“2-3.样品的保存条件与稳定性要求”来处理样品。7.报告结果7-1. 参考范围7-1-1. 设定参考范围 请设定自己实验室的参考范围。7-1-2. 参考标准范围举例 从本公司收集到的样品所求得的参考标准,其范围如下。5)总酸性磷酸酶:4.
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 试剂 SOP 文件 汇编 0703 ZM
链接地址:https://www.31doc.com/p-2745683.html