阿伐他汀对去势大鼠骨折愈合的影响.doc
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1、DOC格式论文,方便您的复制修改删减阿伐他汀对去势大鼠骨折愈合的影响(作者:_单位: _邮编: _) 【摘要】 目的 研究阿伐他汀局部注射对去势大鼠骨折愈合的影响。方法 2月龄雌性SD大鼠采用去势方法模拟人绝经后骨质疏松症,进一步建立胫骨骨折髓内钉内固定模型,实验组于骨折端皮下注射阿伐他汀(10mgkg-1d-15d),对照组注射无阿伐他汀的溶剂。骨折后1、2、4周取标本,通过X线片、生物力学、组织病理学以及组织形态计量学等评价两组骨折愈合质量。 结果 与对照组相比,实验组骨痂横截面积在骨折后1周、2周分别增加24.3% (p0.05) 和33.2% (p0.05);骨痂最大载荷在骨折后2周、
2、4周分别增加43.1% (p0.05) 和69.8% (p0.05);组织学显示实验组新生编织骨较对照组多且排列致密。结论 局部应用阿伐他汀可促进去势大鼠骨折愈合。 【关键词】 阿伐他汀 大鼠 骨质疏松 骨折愈合【Abstract】 Objective To explore the influence of Atorvastatin on fracture union of emasculated rats. Methods Postmenopausal osteoporosis was simulated on emasculated female rats of 2 months old
3、, further model of internal fixation with bone nail in treating tibia fracture was developed .In treating group , Atorvastatin was subcutaneous injected (10mgkg-1day-15day) locally at fracture site , in control group ,solution without Atorvastatin was used as control .Spacemen were collected 1、2、4 w
4、eeks after fracture , the quality of fracture union was evaluated by X-ray 、vitodynamics、histopathology and morphometry. Results The section area of osteotylus in the treating group increased 24.3% (p0.05) and 33.2% (p0.05) in one and two weeks after fracture; maximal load of osteotylus increased 43
5、.1% (p0.05) and 69.8% (p0.05) two and four weeks after fracture ; histological finding showed neogenesis woven bones were more and compactly arranged in treating group than those in control one . Conclusions Local Atorvastatin injection helps the fracture union in fracture union of emasculated rats.
6、【Key words】 Atorvastatin Rat Osteoporosis fracture union 目前治疗骨质疏松的大多数药物,如雌激素、双膦酸盐类化合物、降钙素、选择性雌激素受体调节剂等,主要是通过抑制骨吸收来防止骨量的丢失,而刺激新骨形成的药物为数很少。近年来的研究表明,目前广泛应用于降脂药的HMG-CoA 还原酶抑制剂 (即他汀类药物),能刺激体外培养的成骨细胞增值,促进新生小鼠颅骨及皮质骨的新骨形成。但目前绝大多数的研究针对非骨折骨,而且他汀类药物均为超高剂量的口服用药。口服他汀类药物绝大多数分布在肝脏中,在骨折端的浓度极低,并且超大剂量的口服用药会增加肝肾功能的损害3
7、。本实验的目的为研究局部应用阿伐他汀能否促进骨折愈合。1 材料与方法1.1 动物 2月龄雌性SD大鼠,初始体重178201g,动物房要求23C恒温,昼夜12h,自由进食自来水。 随机分成去势组(n=120)和假手术组(n=10)。5%盐酸氯氨酮(2mlkg-1)腹腔内注射麻醉后,取双侧背外侧切口,去势组结扎卵巢营养血管并切除双侧卵巢,假手术组仅暴露双侧卵巢而不作结扎和切除,术后均喂养于原环境,给等量的食物。术后12周,各取10只大鼠,全麻后用双能X线吸收仪及其配套的小动物模式进行右胫骨骨矿物含量(BMD)测定。1.2 骨折内固定模型 所有去势大鼠平均分成空白溶剂(Vehicle)组和阿伐他汀(
8、AVS)组,进一步建立骨折内固定模型。全麻后,在右胫骨近1/3处用骨刀平整切断胫骨(尽量不折断同侧腓骨),为稳定骨折端,用直径0.5mm的消毒牙科钢丝经胫骨结节插入行髓内固定,缝合切口,术后抗炎3d(青霉素80万U,肌注,2次/d)。1.3 给药方法 AVS组骨折端皮下注射阿伐他汀 5 mgkg-1,Vehicle组骨折端皮下注射空白溶剂 3050l,手术当天注射1次,以后连续5d,2次/d。注射方法参照文献,注射针头直径0.4mm,注射器最大刻度250l,最小刻度10l。注射应避开骨痂。1.4 骨折愈合评价 骨折后1、2、4周处死大鼠取标本进行骨折愈合质量评价。放射学:处死前1d,大鼠在全麻
9、下用钼靶乳腺X线机(22kV, 250mAS)摄右胫骨前后位片,a为无桥接骨痂,b为单侧桥接骨痂,c为完全桥接骨痂。生物力学测定:每组取10只大鼠测定,取其双侧胫骨,成对包裹于生理盐水纱布中,保存于-20C冰箱内,测定前1d标本于室温下解冻,用游标卡尺(敏感度0.02 mm)测量骨痂前后径和横径;取出髓内钉,在Zwick-Z010测试机上行三点弯试验,测试跨距为30mm,加载速度为2 mmmin-1,测试过程中保持标本在同一方位并一直保持湿润,记录载荷-位移曲线。组织学分析:每组取5只大鼠,连同骨痂周围骨膜取下右侧胫骨,抽出髓内钉,切取包含骨痂的骨段,用4%多聚甲醛(pH 7.4)室温下固定2
10、4h,EDTA液(0.5mol/L, pH 7.4)脱钙35周,每57d更换新鲜脱钙液至能被细针轻松插入,PBS液冲洗,酒精梯度脱水,石蜡包埋,纵向5m切片,固定于经0.01% 多聚赖氨酸表面处理的载玻片上,60C烘干过夜,HE染色,光镜(Olympus BH-2)下观察。1.5 统计学处理 数据以(xs)表示。用SPSS 11.5软件,行组间单因素方差分析或检验。2 结果 大鼠去势后12周,胫骨BMD假手术组(0.2410.010)g/cm2,去势组(0.2190.005)g/cm2,差异有非常显著性(p0.01)。骨折后大鼠Vehicle组4只、AVS组3只死亡,无骨折端感染发生,两组大鼠
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