2019通冠胶囊对骨髓单个核细胞向损伤血管内膜迁移分化的影响.ppt
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1、通冠胶囊对骨髓单个核细胞 向损伤血管内膜迁移分化的影响,http:/ 如何诱导骨髓干细胞的分化、迁移、归巢仍是当前研究的热点。 已有研究证明多种细胞因子、药物等可以促进和动员骨髓源内皮祖细胞分化,进而修复损伤血管内膜。,http:/ 通冠胶囊组成:丹参、黄芪、水蛭等。广东省中医院制剂,0.5g/粒 。,http:/ 颈动脉损伤后24小时内经尾静脉注射经PKH26标记的骨髓单个核细胞5106个/只。治疗组通冠胶囊(600mg/kg/d)灌胃,对照组等量的生理盐水灌胃,4周。,http:/ 在551nm激发光的作用下可发出波长为567nm的红色荧光。在适当的标记后,不影响细胞的活力。 随着细胞的分
2、裂,标记物等份地分配到两个子细胞。用PKH26标记红细胞在体内半衰期可达100d。 根据这些性质PKH26被广泛用于细胞的标记、示踪。,http:/ 普通饮食一周后,20只受体大鼠行颈动脉损伤,取供体大鼠骨髓制成单个核细胞悬液并PKH26标记,0.2ml/只由受体大鼠尾静脉注入,通冠胶囊组,生理盐水组,4周后处死大鼠,提取标本,冰冻切片,免疫荧光组织学检测,ELISA检测VEGF、SDF-1,收集数据,录入数据库,分析数据,技术路线,检测血管内膜/膜厚度,随机,http:/ cm,用动脉夹夹闭颈总动脉近心端和颈内动脉。然后颈外动脉远心端挂线结扎,用眼科剪在结扎处附近剪一个“V”形口,从右颈外动
3、脉向颈总动脉插入1.5F的球囊导管约1.5 cm,然后向导管内注入20ml空气,拉脱3次即可,结扎颈外动脉远心端,松开动脉夹后逐层缝合肌肉及皮肤。,颈动脉三叉,导丝进入,球囊扩张拉伤,损伤图解,V Lindner. Mouse model of arterial injury.Circulation,http:/ 5ml注射器抽取5ml的PBS液,由股骨的骨骺端冲出骨髓血,连冲3次,离心,弃上清,3ml的1640重悬。 将含有骨髓血的1640液,1:1平铺于大鼠淋巴细胞分离液上(天津津脉),水平离心,2000r/min,15min。 吸取白膜层(第3层)于离心管内,加入4mlPBS液,1500
4、r/min,5min,洗3遍。,http:/ l Diluent C重悬细胞,轻轻吹打细胞。 染色之前即刻,在含有1mlDiluent离心管中配制410 mol/L(4l)的PKH26染料。 迅速均匀地将1ml的细胞液和含有1mlDiluent的染料液相混合,轻轻吹打、混匀。 25孵育25 min,不时吹打混匀。 加入等量的血清(2ml)终止反应, 放置1min。加入等量的完全培养液稀释。 1500r/min,5min. 弃上清。无血清培养液3ml重悬细胞。,http:/ 100,PKH26染后的单核细胞,单核细胞层(白膜层),http:/ blue 2ml经尾静脉注射,生理盐水灌流5分钟后,
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