真菌的实验诊断20条08.08.26——胡主任PPT.ppt
《真菌的实验诊断20条08.08.26——胡主任PPT.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《真菌的实验诊断20条08.08.26——胡主任PPT.ppt(75页珍藏版)》请在三一文库上搜索。
1、1,真菌感染的实验诊断,天津医科大学总医院 胡志东 E-mail ,2,真菌感染的危险因素:,中心静脉插管 尿道插管 广谱抗生素 气管插管 腹部外科 肠胃外营养 营养不良 住院时间,感染之前定殖,3,医学重要的酵母菌分类 Segal B, Bow EJ, Menichetti F: Infect Dis Clin N Am 2002;16:935-64,条件致病的酵母菌,念珠菌属,非念珠菌属,白念珠菌,非白念珠菌,热带念珠菌 近平滑念珠菌 光滑念珠菌 克柔念珠菌 季也蒙念珠菌 葡萄牙念珠菌,隐球菌属 新型隐球菌,毛孢子菌属 白吉利毛孢子菌 头状毛孢子菌,酵母属 酿酒酵母,红酵母属,4,霉菌,曲
2、霉菌属,非曲霉菌属,烟曲霉,非烟曲霉,黄曲霉 黑曲霉 土曲霉,镰刀霉 茄病镰刀霉 尖孢镰刀霉,赛多孢属 尖端赛多孢 多育赛多孢,接合菌 根霉属 毛霉属 根毛霉属 梨头霉属 小克银汉霉属,暗色孢霉 链格孢霉属 万氏霉属 双极菌属 弯孢属,医学重要的霉菌分类 Segal B, Bow EJ, Menichetti F: Infect Dis Clin N Am 2002;16:935-64,5,诊断方法,影像学 组织病理学/细胞学 培养 血清学 分子生物学方法: Platelia Aspergillus ELISA Fungitell assay PCR(unavailable),传统的方法,7,
3、真菌病实验室诊断主要内容,准确、快速检出真菌病原体 真菌镜检 真菌培养 组织病理 生理生化 血清学方法 分子生物学,8,真菌感染的诊断,直接涂片 真菌培养 组织病理真菌培养是“金标准”,9,有意义的真菌培养标本,非经口痰标本 非插管尿标本 血液或其他无菌体液(胆汁、胸腹水、脑脊液),10,直接镜检的浮载液和染色剂,KOH-1020%-皮肤标本 Gram stain-真菌均为阳性 Calcofluor white-荧光染色 India-ink-墨汁染色 LPCB-乳酸酚棉蓝 Immunofluorescence-免疫荧光,11,直接镜检,对痰、窦道排泄物及气管冲洗液等标本直接镜检可以看到透明分支
4、的菌丝、脓血或痰太粘稠用10KOH处理后再进行镜检 如果曲霉菌寄生与空气相通的器官中,镜检甚至可以看到曲霉头菌丝有隔,呈二叉型,45 分枝。,12,菌丝和孢子,13,直接镜检酵母细胞,14,隐球菌病直接镜检(墨汁染色),15,有意义的涂片结果,机体内部标本如血液、腹水、CSF、脓肿穿刺液等 新鲜尿液见到大量菌丝及孢子 口腔、阴道、支气管灌洗液见到酵母样菌应作培养确定,16,多细胞真菌形 态,17,真菌培养,18,真菌培养检查,目的提高病原体检出的阳性率,确定致病菌的种类。 意义 发现肯定的致病原如新生隐球菌时,诊断即可确立。 分离出条件致病菌如白念珠菌或烟曲霉,应结合临床情况进行判断。 无菌部
5、位如血液或脑脊液中分离出条件致病菌常提示肯定的感染,但对来自于脓、痰或尿的标本则应谨慎解释结果。但任何一株培养物都不应轻易视为污染菌。 需结合直接镜检的结果,强调直接镜检与培养检查相结合的重要性。 强调临床医师与实验室检验人员之间的相互联系。,19,092,20,区分酵母样或霉样菌落,21,Aspergillus fumigatus - Colonial Morphology, Sabouraud葡萄糖琼脂培养基烟曲霉菌,22,Aspergillus fumigatus - Microscopic Morphology, 100x Lactophenol cotton blue (单列) 分生
6、孢子头、分生孢子梗、顶囊、瓶梗、分生孢子,23,Aspergillus flavus - 在Sabouraud葡萄糖琼脂黄曲霉菌 生长快黄色表面粉末状,24,Aspergillus flavus - Microscopic Morphology, 100x Lactophenol cotton blue 黄曲霉菌( 二列为主)分生孢子头、分生孢子梗、顶囊、瓶梗、梗基、分生孢子,25,Penicillium species - Colonial Morphology, Sabouraud agar 青霉属 气生菌丝密毯状,26,Penicillium species - Microscopic
7、Morphology, 400x Lactophenol cotton blue青霉属(帚狀枝,分生孢子),27,Aspergillus niger - Colonial Morphology, Sabouraud agar 黑曲霉菌,(背面),28,Aspergillus niger - Microscopic Morphology, 100x Lactophenol cotton blue( 二列为主)分生孢子头、分生孢子梗、顶囊、瓶梗、梗基、分生孢子,29,真菌体外药敏试验,30,真菌体外药敏试验,1 K-B 法 2 MIC 法 3 E-test 法,31,液基稀释法 CLSI M27A
8、2:致病性酵母菌 CLSI M38A:产孢丝状真菌 琼脂稀释法 纸片扩散法CLSI M44-A Etest法,抗真菌药物体外敏感试验,32,33,E-test法:可用于酵母样真菌和丝状真菌,34,096,35,白色念珠菌,近平滑念珠菌,热带念珠菌,光滑念珠菌,36,白色念珠菌,近平滑念珠菌,热带念珠菌,光滑念珠菌,37,白色念珠菌,近平滑念珠菌,热带念珠菌,光滑念珠菌,38,白色念珠菌,近平滑念珠菌,热带念珠菌,光滑念珠菌,39,白色念珠菌,近平滑念珠菌,热带念珠菌,光滑念珠菌,40,白色念珠菌,近平滑念珠菌,热带念珠菌,光滑念珠菌,41,体外抗真菌药敏试验与体内疗效,90-60原则MIC值与
9、临床疗效 药敏试验敏感菌株:90%对治疗有效 药敏试验耐药菌株:60%对治疗有效 Mahmoud A.G, JCM 1996, 34:489-495;Rex J,CID 2002, 35: 982-989,42,真菌特异性抗原的免疫学检测,1 (1-3)-D-葡聚糖 2 半乳甘露聚糖 3 甘露聚糖 4 D- 阿拉伯糖醇 5 烯醇化酶 6 新生隐球菌荚膜抗原,43,(1-3)-D-Glucan(葡聚糖) “G”试验,44,(1-3)-D-Glucan生物活性,(1-3)-D-Glucan作为真菌细胞壁成分之一,一旦进入机体后,将引起真菌病,严重时将会引起严重的深部真菌感染疾病,因此,深部真菌感染
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 真菌 实验 诊断 20 08.08 26 主任 PPT
链接地址:https://www.31doc.com/p-2874141.html