大黄中游离蒽醌的提取和含量测定.ppt
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1、大黄中游离蒽醌的提取和含量测定,一 实验背景,蒽醌类化合物在植物体内主要以苷的形式存在,其中有大黄酸-葡萄糖苷;大黄素甲醚-葡萄糖苷;芦荟大黄素-葡萄糖苷;大黄素-葡萄糖苷;大黄酸双葡萄糖苷等。 此外尚含鞣质类成分如葡萄糖没食子鞣质,儿茶鞣质、没食子酸等。 大黄中还含有属于双蒽酮的番泻苷A及番泻苷B。 蒽苷内服后有致泻、清热解毒作用,尤其是大黄酸葡萄糖苷有较强的致泻作用。游离的羟基蒽醌如大黄酸、大黄素有明显的抗菌活性。,二 实验目的,了解大黄的主要成份及掌握大黄中游离蒽醌的理化性质。 会用紫外分光光度计测1,8-二羟基蒽醌及游离蒽醌的吸光度。 掌握标准曲线的测绘步骤及原理。 学会用线性回归方程
2、计算供试液的浓度。,三 实验原理, 提取原理 本实验是利用游离蒽醌不溶于水而溶于氯仿,乙醚等亲脂性有机溶剂的性质用氯仿从水解液中将游离的蒽醌提取出来, 测定原理,标准曲线法又称工作曲线法或校正曲线法。通过配制一系列不同的浓度的标准溶液,在相同条件分别测定吸光度,绘制标准曲线或求出回归方程。在相同的条件测定试液的吸光度,从标准曲线或回归方程中,求出被测组份的浓度。根据绘制的标准曲线,算出a和b 代入数据得到 A=bC+a 若标准曲线通过原点则也可用标准对照法:在相同条件下配置标准溶液与供试品溶液,在500nm-520nm处分别测其吸光度根据Beer定律A=ELC,因标准溶液与供试品溶液是同物质,
3、同仪器,及同一波长于厚度相同的吸收池中测定,顾L和E都相同,所以有 C样=A样C标A标,四 仪器和试剂,仪器 圆底烧瓶、冷凝管、水浴锅、分液漏斗、烧杯、铁架台、分析天平、玻璃棒、移液管、容量瓶、量筒、752式紫外可见分光光度计、吸收池。 试剂 大黄粉末、 1.8-二羟基蒽醌标准品、 氯仿溶液、甲醇溶液、醋酸镁。,五 实验内容与步骤, 前期准备 a 吸收池的的校对:将蒸馏水注入几个厚度相同的吸收池中,以其中任一个吸收池的溶液做空白调节透光率为100,在同一波长处分别测定其他各吸收池溶液的透光率,然后选择相差小于0.5的吸收池使用。 b 首先把 752式紫外分光光度计打开电源预热半小时以上,开始实
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