醋酸纤维薄膜电泳原理步骤详细.ppt
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1、http:/ Cellulose acetate membrane electrophoresis,CAME,上海交通大学医学院,讲课内容,上海交通大学医学院,一、醋酸纤维素(Cellulose acetate ),是纤维素醋酸酯(acetate ester of cellulose ),由纤维素的羟基进行乙酰化后制得,将它溶于有机溶剂涂抹成均匀的薄膜,待有机溶剂挥发后,即为白色不透明的醋酸纤维薄膜 厚度:0.15mm,上海交通大学医学院,Magnification of Cellulose Acetate filter,上海交通大学医学院,讲课内容,上海交通大学医学院,二、醋酸纤维薄膜的特点
2、 Characteristics of Cellulose Acetate Membrane,1.吸附作用小 2.电渗(electroosmosis)作用小 3. 需加样量少 4. 亲水性较小,上海交通大学医学院,血清蛋白质各组分的相对分子重量及等电点 Molecular weight and isoelectric point of serum proteins,上海交通大学医学院,Amido black 10B,上海交通大学医学院,氨基黑10B染色洗脱法结果,上海交通大学医学院,Ponceau S,上海交通大学医学院,丽春红S染色扫描法结果,上海交通大学医学院,Schematic repr
3、esentation of a protein electrophoresis,上海交通大学医学院,几种疾病的蛋白电泳变化 Abnormal serum protein electrophoresis,上海交通大学医学院,上海交通大学医学院,-桥,上海交通大学医学院,上海交通大学医学院,双白蛋白血症,上海交通大学医学院,讲课内容,上海交通大学医学院,三、影响电泳结果的因素 Factors affecting results,1. 电泳图谱不齐,点样时血清点加不均匀 薄膜局部干燥 电泳时供给薄膜的液量不均匀或过少 缓冲液变质 电泳时薄膜位置不正,与电流方向不平行,上海交通大学医学院,2. 电泳图
4、谱分离不清,标本加量过多 电流过低 薄膜结构过分致密,透水性差 薄膜表面干燥,上海交通大学医学院,3. 电泳速度慢,电流过低 供给薄膜的液量不足 电泳时温度过低 缓冲液离子强度过高 薄膜中杂质多,上海交通大学医学院,4. 白蛋白(Albumin)区带中间部分不着色,染色不足,可能为染料使用过久或加血清(Serum)过多,5.球蛋白(-globin)向反方向移动,主要因为电渗( electro-osmosis)现象,可升高缓冲液液面或加大电流量加以改进,并注意两侧电泳槽内缓冲液液面是否在同一水平。,上海交通大学医学院,讲课内容,http:/ Separate serum protein in c
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