2.2《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》课件冯惠坚.ppt
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1、1 1、尿素的利用、尿素的利用 尿素尿素是一种重要的是一种重要的农业氮肥。农业氮肥。尿素尿素不能直接不能直接 被农作物被农作物吸收。吸收。土壤中的细菌将尿素土壤中的细菌将尿素分解成氨分解成氨之之 后才能被植物利用。后才能被植物利用。 2 2、细菌利用尿素的原因、细菌利用尿素的原因 土壤中的细菌分解尿素是因为它们土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶能合成脲酶 CO(NHCO(NH 2 2) ) 脲酶脲酶 + CO+ CO 2 2 NHNH 3 3 + H+ H 2 2O O 尿素分子的立体结构 扯 掏 浴 特 荫 肋 搏 怠 轮 城 浮 颇 物 怠 抠 桅 佳 饿 巴 枪 蝇 狙 艘 防 鬃
2、 日 愿 舀 世 台 鱼 饭 2 . 2 土 壤 中 分 解 尿 素 的 细 菌 的 分 离 与 计 数 课 件 冯 惠 坚 2 . 2 土 壤 中 分 解 尿 素 的 细 菌 的 分 离 与 计 数 课 件 冯 惠 坚 (一)筛选菌株(一)筛选菌株 水生耐热细菌Taq ( Thermus aquaticus ) 耐高温的Taq DNA聚合酶 美国微生物学科布鲁克(T.Brock) 1966年发现耐热细菌 选择培养基选择培养基 在微生物学中,将允许特定种类的微生 物生长,同时抑制或阻止其他种类微生 物生长的培养基。 启示:启示:寻找目的菌种时要根据寻找目的菌种时要根据 它对生存环境的要求,到相
3、应它对生存环境的要求,到相应 的环境中去寻找。的环境中去寻找。 2 2、实验室中微生物、实验室中微生物 的筛选原理:的筛选原理: 人为提供人为提供有利于目的菌株有利于目的菌株 生长生长的条件的条件( (包括营养、温包括营养、温 度、度、pHpH等等) ),同时,同时抑制或阻抑制或阻 止其他微生物止其他微生物生长。生长。 路 京 敬 给 倪 躁 铲 赎 社 暗 萌 彦 货 痴 十 卑 源 佳 裙 渡 袱 芳 永 珐 各 陈 熊 危 哭 型 缔 好 2 . 2 土 壤 中 分 解 尿 素 的 细 菌 的 分 离 与 计 数 课 件 冯 惠 坚 2 . 2 土 壤 中 分 解 尿 素 的 细 菌 的
4、 分 离 与 计 数 课 件 冯 惠 坚 在本课题提供的选择培养基的配方中,尿 素是培养基中的唯一氮源,因此,原则上只有 能够利用尿素的微生物才能够生长。 从物理性从物理性 质看此培养质看此培养 基属于哪类基属于哪类 ? 在此培养在此培养 基中哪些作基中哪些作 为碳源、氮为碳源、氮 源?源? 蔑 脑 烘 嚣 颤 宫 挫 酚 峦 帐 晕 揉 邵 促 枚 绎 瞧 谢 虑 蛀 挝 冶 仲 柱 滁 静 乡 座 割 攒 杀 溜 2 . 2 土 壤 中 分 解 尿 素 的 细 菌 的 分 离 与 计 数 课 件 冯 惠 坚 2 . 2 土 壤 中 分 解 尿 素 的 细 菌 的 分 离 与 计 数 课 件
5、 冯 惠 坚 (二)统计菌落数目(二)统计菌落数目 统计菌落数目的理论依据:统计菌落数目的理论依据: 当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落, 来源于样品稀释液中的一个活菌。因此,恰当的稀释度是 成功地统计菌落数目的关键。为了保证结果准确,通常将 几个稀释度下的菌液都涂布在平板上,培养后再选择菌落 数在30300的平板进行计数。 常用方法:稀释涂布平板法 原理:原理:在稀释度足在稀释度足 够高时,微生物在够高时,微生物在 固体培养基上所形固体培养基上所形 成的成的一个菌落一个菌落是由是由 一个单细胞一个单细胞繁殖而繁殖而 成的,即成的,即一个菌落一个菌落 代表原先的一个单代表原先的一
6、个单 细胞细胞 涉 荫 犬 赌 戎 八 乖 样 烃 藉 编 竞 录 袋 拎 颊 雾 石 吕 篓 五 畏 杉 橡 畜 苇 荚 贱 控 坷 氨 征 2 . 2 土 壤 中 分 解 尿 素 的 细 菌 的 分 离 与 计 数 课 件 冯 惠 坚 2 . 2 土 壤 中 分 解 尿 素 的 细 菌 的 分 离 与 计 数 课 件 冯 惠 坚 说明设置重复组的重要性。说明设置重复组的重要性。第一位同学只涂布了一个平板,没有设置重复组 ,因此结果不具有说服力。第二位同学考虑到设置重复组的问题,涂布了3 个平板,但是,其中1个平板的计数结果与另2个相差太远,说明在操作过程 中可能出现了错误,因此,不能简单地
7、将3个平板的计数值用来求平均值。 这个实例启示学生,在设计实验时,一定要涂布至少3个平板,作为重复组 ,才能增强实验的说服力与准确性。在分析实验结果时,一定要考虑所设置 的重复组的结果是否一致,结果不一致,意味着操作有误,需要重新实验。 核 巳 余 履 墓 挚 袁 砂 煤 吨 员 沟 免 误 债 藏 巷 直 让 织 榔 圈 渠 惫 斩 宴 泵 癌 竿 粘 迂 僚 2 . 2 土 壤 中 分 解 尿 素 的 细 菌 的 分 离 与 计 数 课 件 冯 惠 坚 2 . 2 土 壤 中 分 解 尿 素 的 细 菌 的 分 离 与 计 数 课 件 冯 惠 坚 改 浓 锻 骗 件 堆 撇 上 恃 珍 冀
8、 粕 畜 脂 凌 喉 值 掖 蔓 惩 抒 粒 赶 牛 焉 拍 输 初 歇 夯 蒙 酥 2 . 2 土 壤 中 分 解 尿 素 的 细 菌 的 分 离 与 计 数 课 件 冯 惠 坚 2 . 2 土 壤 中 分 解 尿 素 的 细 菌 的 分 离 与 计 数 课 件 冯 惠 坚 (二)设置对照(二)设置对照 一是由于土样不同,二是由于培养基污染或操作失误一是由于土样不同,二是由于培养基污染或操作失误 。究竟是哪个原因,可以通过实验来证明。实验方案有两种 。一种方案一种方案是可以由其他同学用与A同学一样的土样进行实 验,如果结果与A同学一致,则证明A无误;如果结果不同, 则证明A同学存在操作失误或
9、培养基的配制有问题。 另另一种方案一种方案是将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进 行培养,作为空白对照,以证明培养基是否受到污染。通过 这个事例可以看出,实验结果要有说服力,对照的设置是必 不可少的。 设置对照的主要目的是排除实验组中设置对照的主要目的是排除实验组中 非测试因素对实验结果的影响,提高非测试因素对实验结果的影响,提高 实验结果的可信度。实验结果的可信度。 屠 帕 既 贬 捞 操 右 缚 晋 箕 阁 陡 蝶 磕 添 侄 榜 或 植 倘 鲤 殖 饰 盎 银 赵 碘 津 芳 该 稗 字 2 . 2 土 壤 中 分 解 尿 素 的 细 菌 的 分 离 与 计 数 课 件 冯 惠 坚
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