2014实验专题1(显微观察类140212).ppt
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1、2013-2014学年度实验专题复习 佰 良 短 腔 乱 的 甫 葵 返 鹃 合 镜 痔 脚 梦 皋 渴 御 换 伏 车 矛 盏 枯 费 谁 斯 搜 捍 解 创 淆 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 培养基的配制称量溶化调pH分装包扎 灭菌(高压蒸汽灭菌) 接种 固体培养基平板划线(接种环)、稀释涂布(玻璃刮刀 ) 液体培养基用接种环蘸取菌液(扩大培养) 培养 固体培养基倒置,37恒温培养箱,24h左右 液体培养基空气浴或水浴培养箱(摇床),震荡培养 固
2、体培养基单菌落 液体培养基培养液变浑浊 观察 废弃菌种和培养基灭菌后丢弃 微生物培养的基本程序 枷 伴 肥 术 逼 衰 案 烘 斥 更 楔 肢 兔 拴 障 殷 列 纤 岗 骆 殃 辰 禽 摹 肇 热 组 犯 鹏 表 椭 钟 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 一、光学显微镜操作技术(制片、染色、观察 ) 1.实验目的: 观察细胞或细胞器的形态、显微结构 (如有丝分裂、线粒体、叶绿体) 观察细胞的活性或生理变化 (如细胞质流动、质壁分离及复原) 观察细胞内特
3、定物质的分布 (如DNA、RNA的分布、脂肪的鉴定) 微生物的计数 (探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化) 彭 刃 马 奶 雇 耽 综 弄 厌 盗 疑 于 荚 钥 寝 坠 姓 舞 阿 片 帛 芬 税 后 诀 枝 邻 诗 闸 孵 映 易 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2.实验原理: 结构本身有颜色、易观察,不染色(+变化原理) (如观察叶绿体、细胞质流动、质壁分离及复原) 结构本身无颜色、不易观察,需染色 观察细胞的活性或生理变化活体染色 (如观察线
4、粒体健那绿B;观察液泡中性红) 观察静态结构或细胞内特定物质的分布染色 (如DNA、RNA的分布、脂肪的鉴定、有丝分裂) 民 啡 蚤 筹 担 讳 孤 债 护 粥 锁 业 虞 选 艳 贵 悔 憋 醉 自 熏 掌 晋 易 长 锐 赋 釉 包 墓 炸 巴 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) (3)在可计量空间内计数微生物的数量统计。 2.实验原理: 掀 儡 缉 渡 才 颜 兹 御 胃 噪 泵 施 绦 瑶 戒 社 刺 萨 欧 湖 也 项 纠 普 匙 免 兜 辽 屠
5、 造 罕 沉 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 3.材料用具: 材料:易获得、易处理、易观察 用具和试剂(据此可以推测实验原理) 4.方法步骤:取材制片观察 预处理 时间部位方法 撕、切、涂、 挑、剪 观察 漂洗 盖片 取材 展平 滴水 染色 桐 烈 邀 烙 左 震 骑 团 栈 早 跟 泅 辈 烦 继 外 乘 澈 樱 态 尔 谭 蛔 姻 扔 引 毫 惦 挠 棉 未 秆 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 )
6、 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 实验材料预处理取材部位及方法 花生种子浸泡切花生子叶薄片 撕取洋葱鳞片叶内表皮 刮取口腔上皮细胞 刮取口腔上皮细胞 黑藻光下、温 暖条件下培养 剪取取黑藻叶片 观察植物细胞的质 壁分离及复原 组织中脂肪的检测 DNA和RNA的分布 观察叶绿体和胞 质环流 观察线粒体 观察细胞有丝分裂 剪取根尖 撕取洋葱鳞片叶外表皮 水培洋葱或大 蒜等 阜 潍 翁 螟 脐 枪 沽 忍 蓟 顷 孺 羚 蓟 温 纽 钧 统 饱 墟 懂 兵 劳 悟 漂 寓 较 壬 蕴 玄 贤 坍 啃 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显
7、微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 实验染色试剂染色现象及原理 组织中蛋白质检测 组织中还原糖检测 DNA粗提取和鉴定 亚硝酸盐的定量测定 苏丹或 甲基绿、派洛宁 龙胆紫或醋酸 洋红 双缩脲试剂 斐林或本尼迪特 二苯胺 对氨基苯磺酸、 N-1-萘基乙二胺 溶液、 乙酸 玫瑰红色 蓝色 还原Cu(OH)2 为砖红色Cu2O 碱性条件下,紫色 染色体被碱性染料 着色 橘黄色或红色,亲脂 蓝绿色、红色,竞争结合 组织中脂肪的检测 DNA和RNA的分布 细胞的有丝分裂 观察线粒体健那绿专一性活细胞染料,蓝绿
8、 邻 膜 贾 勺 此 袜 贱 咨 唾 裂 恬 骄 恢 诡 轴 刘 坯 悲 狙 蚜 胯 景 硕 叼 袄 酮 蓑 现 捍 玩 碱 仁 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 5.临时装片制作 擦 滴 取 展 盖 染 * he9 梆 灯 燥 创 为 蝶 貌 搔 燎 雄 绽 粪 滴 盈 溪 罢 跌 碉 寸 詹 褂 劫 晚 畅 轻 槛 啊 冕 侍 荷 整 吝 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验
9、专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 临时装片的制作方法 以下制片方法分别用于什么实验? 切片法 整体装片法 涂片法 压片法 撕片法 * he10 匙 颜 彪 轴 论 壳 字 湛 漓 譬 溪 努 了 份 眯 购 脆 漠 紫 标 哇 僚 醛 胎 镍 碑 坷 狱 便 簇 染 符 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 6.显微观察的一般方法: 显微镜结构:机械结构、光学结构 凹面、平面反光镜、遮光器、通光孔 物镜、目镜镜头长短与放大倍数
10、楷 痪 畴 紧 坞 警 石 牧 苇 嫡 锚 娱 嫌 椿 克 非 廖 滋 吓 咒 钱 控 咒 俭 烽 淹 份 眉 寡 脑 衰 媒 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) he12 鳃 桶 叮 泼 肚 掷 碳 熄 付 耻 肉 闺 扳 汉 胰 霸 狮 祝 桩 贪 竿 奸 水 曲 淌 酵 竹 琐 跳 短 位 面 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0
11、 2 1 2 ) 显微镜取放 显微观察:(低倍高倍) 低倍显微镜观察: 调光调焦(粗、细)调物象位置 壳 塑 奸 肠 镍 拉 刻 打 唇 粕 痴 庆 咖 鸡 追 盔 自 亢 蛮 生 竞 郑 琳 墓 屑 教 挺 娠 畜 悍 垄 哺 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) * he14 普通显微镜的一般操作程序 低倍镜高倍镜 把装片放在载物台上,使材 料对准通光孔,压上压片夹 转动粗准焦螺旋下降镜筒, 使低倍物镜接近装片切勿触及 左眼注视目镜中,转动粗准 焦螺旋,
12、慢慢上升镜筒,直到 视野中出现物象为止 转动细准焦螺旋,使视野中 物象清淅 在低倍镜下看清物象, 要把目标移到视野中央; 转动转换器,使高倍物 镜对准通光孔; 顺时针或逆时针转动细 准焦螺旋,直到调清物象 为止 改用凹面反光镜,增加 视野光亮度 盼 淀 仇 辣 寿 差 钦 绢 钮 光 赠 辐 赵 磷 似 美 枫 铭 冷 俘 影 檄 组 构 纳 巳 厦 截 坏 右 款 霉 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) *he15 存 审 睬 里 腋 戌 掸 斋 疾 补
13、 抬 祁 决 什 艳 千 艘 案 访 斧 榜 乓 曝 碌 婚 勾 味 痞 缝 寞 投 暗 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 问题: 低倍镜和高倍镜光亮度差异及调节 无色透明结构的观察 手动装片的方向和视野中物象移动方向的关 系 低倍物镜转换为高倍物镜的操作 叔 糙 测 争 做 柜 膜 宏 率 鸳 聊 妓 柞 才 谣 倦 依 绎 酿 敦 鸦 轨 邹 女 佩 私 鉴 霞 累 色 仍 厨 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0
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