第三讲免疫细胞功能测定.ppt
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1、病原生物学与免疫学教研室 Tel:03733831083 第三讲: 免疫细胞功能测定 主要内容 中性粒细胞吞噬功能实验 E花环形成实验 淋巴细胞转化实验 单个核巨嗜细胞吞噬功能实验 【实验目的】 熟悉中性粒细胞的吞噬作用原理和方法 通过本实验理解机体的非特异性免疫机制 【实验原理】 吞噬作用(phagocytosis):是指细胞从周围环境摄取 固体颗粒(如:微生物或较大的细胞残片)的活动 血液中的中性粒细胞是一种小吞噬细胞,通过趋化、 调理、吞入和杀菌等步骤,能吞噬和消化衰老、死亡 细胞及病原微生物等异物,是机体非特异性免疫的重 要组成部分 【实验原理】 吞噬细胞(phagocyte):主要
2、包括中性粒细胞( neutrophil)和单核吞噬细胞(mononuclear phagocyte) 两类 大吞噬细胞 吞噬细胞的分类 小吞噬细胞 大吞噬细胞 来源: 单核巨噬细胞 存在部位: 血液(单核细胞)、全身结缔组织及小 血管的基底膜组织(巨噬细胞) 功能基础: 富含溶酶体及线粒体 功能: 吞噬病原微生物(寄生虫等),死亡细胞 反应时间及寿命:反应时间长(48h),寿命长 小吞噬细胞 来 源: 血液的中性粒细胞 存在部位: 血液、炎症部位(全身) 功能基础:溶酶体,过氧化物酶及杀菌物质 功 能:主要吞噬化脓菌 反应时间及寿命:反应时间短,数分钟到几小时 ,寿命短,平均数小时 吞噬过程示
3、意图 中性粒细胞的吞噬作用 吞噬过程 【实验器材】 1、无菌肉汤,白葡菌液,PBS缓冲液,瑞氏-姬姆 萨染液 2、注射器,解剖器材,玻片,显微镜等 【实验方法】 1.诱导:实验前1小时给小白鼠腹腔注射(头低位、曲 形进针)无菌淀粉肉汤2ml,诱导浆液渗出 2.注射:给小白鼠腹腔内注射白葡菌液1ml,轻揉腹 部,让小鼠活动 3.取样:注射后30分钟处死小白鼠,抽取腹腔液涂 片 4.干燥:室温或者放温箱中完全干燥标本 5.瑞氏-姬姆萨染液染色: 滴加3滴A液于标本上,以完全盖住标本为宜, 染色40秒。 滴加8滴B液,用洗耳球吹出微风使液面产生涟 漪,使两液充分混匀,染色5分钟。 水洗(勿先倒掉染液
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- 三讲 免疫 细胞 功能 测定
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