妇产科资料贡献.ppt
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1、1,导师:郭钰珍教授 研究生:颉丽,MMP-7及uPA在卵巢浆液性囊腺癌中的表达及意义,2,研究背景,卵巢癌是女性三大生殖道恶性肿瘤之一,发病率为2.4%-5.6%,仅次于宫颈癌和宫体癌 卵巢深居盆腔,早期临床症状不明显 发展迅速,极易出现盆腹腔播散和淋巴结转移,手术或化疗后的高复发率也是造成死亡率高居不下的原因之一 寻找卵巢癌特异性标志物,早期诊断及防止卵巢癌的扩散、转移及复发成为当今防治卵巢癌的关键,3,研究背景,基底膜和胞外基质的降解是当今肿瘤学研究的重点和难点。(图1) 多种蛋白酶在分解细胞外基质和基底膜中起着极其重要的作用,尤其是基质金属蛋白酶类和丝氨酸蛋白酶类 MMP-7和uPA分
2、别属于基质金属蛋白酶类和丝氨酸蛋白酶类,4,LamininR,MMP7,P,MMP7,MMP7,5,MMP-7概述,MMP-7是基质金属蛋白酶家族中唯一的由上皮性肿瘤细胞特异表达的酶 MMP-7是一种锌离子依赖性的蛋白水解酶 MMPs是一多基因家族,目前已经分离并鉴定出这一家族约有13个成员,作用底物不尽相同,6,StetlerStevenson将MMPs分类及底物特性总结如下表,7,MMP-7的独特性,MMP-7不含有类血红素结合区,血管内皮细胞不分泌MMP-7 MMP-7主要由纤维母细胞、巨噬细胞、肿瘤细胞所分泌 MMP-7活化,8,MMP-7,Pro-MMP-7,TC,巨噬细胞,TC,T
3、C,纤维母细胞,巨噬细胞,纤维母细胞,ECM、BM 降解,PLG PLM,MMPs,9,uPA概述,uPA是PA的一种,与肿瘤浸润转移相关 uPA由两条二硫键相连,N端包括表皮生长因子(EGF)功能区,它介导uPA与肿瘤细胞上uPAR结合,降解ECM、BM,10,uPA的独特性,uPA自身直接降解BM、ECM uPA通过激活纤溶酶降解纤维蛋白、纤维连接蛋白、蛋白多糖、板层素等 uPA通过激活的纤溶酶激活基质金属蛋白酶参与ECM、BM降解,11,TC,uPA,内皮细胞,纤维母细胞,巨噬细胞,Pro-upa,纤溶酶,纤溶酶原,uPA-R,TC,TC,ECM、 BM降解,TC,12,本实验研究的内容
4、和意义,采用免疫组化法检测正常卵巢组织、卵巢浆液性肿瘤中MMP-7和uPA 的表达 探讨MMP-7、uPA与卵巢浆液性囊腺癌浸润转移的关系及其相关性 为卵巢浆液性囊腺癌术后的腹腔化疗及残存癌灶的复发提供可靠的理论依据,13,材料和方法,取2000年至2006年兰大二院妇科手术切除并病理证实为卵巢浆液性肿瘤库存标本68例,年龄20-70岁.其中46例卵巢浆液性囊腺癌(恶性组), 12例卵巢浆液性囊腺瘤(良性组),10例正常卵巢(正常组) 临床分期:期-期14例;期-期32例 病理分级:高分化10例,中分化16例、低分化20例 经查阅患者病例将卵巢浆液性囊腺癌组分为:有盆腔浸润,腹膜淋巴转移组42
5、例,无盆腔浸润,无腹膜淋巴转移组4例,14,主要仪器,低温冰箱、烘箱、微波炉、光学显微镜、显微照相系统、水浴振荡器、电热炉带盖的保湿器、耐高温塑料染色架、切片架、染色缸、吸水纸等,15,实验方法,本实验依照免疫组化的步骤进行,16,结果判定,采用三个参数(即染色强度、阳性细胞数、和两者积分的乘积)的半定量的计数方法,着色强度记分标准:基本未着色,染色与背景相似者为0分;着色浅,略高于背景者为1分;中度着色,明显高于背景者为2分;强染,着色深棕色者为3分。阳性细胞数0%为0分,1%-10%为1分,11%-50%为2分,51%-80%为3分,80%为4分。染色强度记分与阳性细胞数记分之积为最后得分
6、:0分为(-),1-2分为(+),3-4分为(+),4分为(+)。,17,统计学方法,应用SPSS10.0统计软件包进行统计分析 组间采用卡方检验,双向有序列联分析 例数不足40例采用费歇尔精确检测 两指标间采用Spearsman等级相关分析 取P0.05为差异有统计学意义,18,MMP-7和uPA在正常卵巢组织和卵巢浆液性肿瘤组织中的表达,MMP-7在卵巢浆液性囊腺癌细胞的胞膜、胞浆和间质细胞的胞浆中均有阳性表达;主要表达于深部浸润的癌巢,尤其在浸润的前沿;在卵巢浆液性囊腺瘤细胞的胞浆和间质中也有阳性表达 uPA蛋白在卵巢浆液性囊腺癌细胞的胞膜和胞浆中有阳性表达,分布不均,主要在肿瘤与周围正
7、常组织交界处、肿瘤细胞与间质交界处,19,MMP-7和uPA在正常卵巢组织和卵巢浆液性肿瘤组织中的表达,分组 例数 MMP-7 uPA + % P + % P 正常组 10 1 10.0 1 10.0 0.594 0.323 良性组 12 2 16.7 4 33.3 0.001 0.001 恶性组 46 40 87.0 40 87.0,20,MMP-7和uPA在卵巢浆液性囊腺癌不同临床分期中的表达,MMP-7 uPA 分期 例数 + + + + + + -期 14 2 2 10 1 6 6 -期 32 8 7 11 7 2 18,21,MMP-7和uPA在卵巢浆液性囊腺癌不同病理分级中的表达,
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