第八章2-4节.ppt
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1、病 例,李某,男,16岁,因发烧、浮肿、血尿入院。自幼时常咽喉痛、发烧,曾因心脏杂音卧床一个月。入院前3周又因咽痛发烧而注射青霉素数日,症状消失,入院前两日高热,血尿。查体:T 39,血压稍高,眼睑及下肢浮肿。实验室检查:尿RBC+,尿蛋白+, ASO抗体800单位。 思考题: 1本病怀疑为什么疾病? 2从微生物学角度应进行哪些检查? 3. 此致病菌致病物质有哪些?引起本病的机制?,第二节 链球菌属 (Streptococcus),自然界、人及动物粪便和健康人鼻咽部,G+,是化脓性细菌中常见的一大类,多数不致病,90%感染由A群链球菌引起。,一、生物学性状 1、形态与染色 0.6-1m,G+,
2、球形,链状排列 液体培养基中链较长 幼龄期菌有荚膜(透明质酸) 有菌毛样结构,含型特异M蛋白,2、培养特性与生化反应,营养要求高:血平板或含血清、葡萄糖培 养基 需氧、兼性厌氧,液体培养为絮状沉淀 生长 血平板呈灰白色表面光滑小菌落,不同 菌株溶血不一,与溶血,生化反应,分解葡萄糖只产酸 触酶试验()(与葡萄球 菌鉴别) 不分解菊糖,不被胆汁溶解 (鉴别甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌),3、根据抗原构造分类,群特异性抗原(C抗 原):细胞壁多糖抗原,可将链球菌分为20群(A-H 、K-T 、U 、V等),引起人类感染的链球菌90为A群。,型特异性抗原(表面抗原):细胞壁蛋白抗原,有M、T、R、S
3、四种,根据M抗原不同,可将A群分为100型。,荚膜,细胞壁,蛋白质,多糖,肽聚糖,细胞膜,细胞质,核蛋白,4、根据溶血现象分类:,5、抵抗力,不强,加热6030min被杀死 对消毒剂、抗生素敏感 首选药物青霉素。,1、侵袭性酶:利于细菌在局部化脓性炎中扩散,(1)透明质酸酶:扩散因子,分解细胞间透明质 酸,使病菌易扩散 (2)链激酶:使血液中纤维蛋白酶原变成纤维蛋 白酶,溶解血块或阻止血浆凝固 (3)链道酶:降解脓液中高度粘稠的DNA,使脓 液稀薄,促进病菌扩散,二、致病性 (一)致病物质,2、M蛋白:抗吞噬 介导细菌与上皮细胞的黏附,抑制吞噬细胞的吞噬作用。与肾小球基底膜、心肌细胞有共同抗原
4、成分,与、超敏反应性疾病有关 3、粘附素:定植 脂磷壁酸(LTA):细菌定植于皮肤和呼吸道粘膜 F蛋白:与上皮细胞表面纤维粘连蛋白结合,黏附 于上皮细胞,利于定植和繁殖 4、荚膜:抗吞噬作用,免疫逃避,5、链球菌溶素(streptolysin): 溶解红细胞、破坏白细胞和血小板 (1)SLO:对O2敏感,抗原性强,刺激机体产生抗体ASO(抗O)。 测定SLO抗体含量,是风湿热和肾小球肾 炎的诊断指标。 (2)SLS:对O2稳定,无免疫原性,小分子的糖肽,引起 溶血,6、致热外毒素SPE (streptococcal pyrogenic exotoxin): 红疹毒素或猩红热毒素 A群链球菌溶原
5、性菌株产生,耐热的蛋白质 是引起人类猩红热(scarlet fever)的主要毒性物质,为急性呼吸道传染病 该毒素还有内毒素样的致热作用,对细胞或组织有损害作用。,(二)所致疾病:复杂而多样, A群链球菌,淋巴结炎,猩红热 链球菌毒性休克综合征,超敏反应性疾病,侵袭性感染,毒素性疾病,蜂窝织炎 脓疱疮,咽炎 扁桃体炎 丹毒,风湿热,急性肾小球肾炎,脓疱疮,颈淋巴结炎,扁桃体炎,面部丹毒急性期,(由皮肤伤口侵入),蜂窝织炎,咽炎,猩红热:急性呼吸道传染病,临床特征为发热、 咽峡炎、全身弥漫性皮疹和疹退后的 明显脱屑,口周苍白、草莓舌、杨梅舌,风湿热: 咽炎后发生,以关节炎、心肌炎为主。 发病机制
6、: (1)M蛋白与其抗体结合形成免疫复合物, 沉积于心瓣膜和 关节滑膜引起型超敏反应 (2)链球菌多糖抗原与心瓣膜有共同抗原,引起型超敏反应,急性肾小球肾炎:多见于儿童和少年,扁桃 体炎和咽炎后均可发生, 蛋白尿、浮肿和高血压。 发病机制: (1)M蛋白与其抗体结合形成免疫复合物, 沉积于 肾小球基底膜引起型超敏反应 (2)链球菌的某些抗原与肾小球基底膜有共同抗 原,机体针对链球菌所产生的抗体与肾小球 基底膜发生反应,引发基底膜损伤,属型 变态反应。,甲型链球菌,人类口腔和上呼吸道的正常菌群,在拔牙或摘除扁桃体时,寄居在口腔、龈缝中的草绿色链球菌可侵入血流引起菌血症。若心脏瓣膜已有缺陷或损伤,
7、本菌可在损伤部位繁殖,引起亚急性细菌性心内膜炎。,D群链球菌,条件致病菌,正常寄居于皮肤、上呼吸道、消化道、泌尿生殖道。可引起尿路感染、腹部感染、败血症、心内膜炎。,B群链球菌,条件致病菌,正常寄居于直肠、阴道、鼻咽部。可引起皮肤感染、心内膜炎、产后感染、新生儿败血症和新生儿脑膜炎。,其它链球菌引起的疾病,三、免疫性,A群链球菌感染后,可产生特异免疫 型别间无交叉免疫,故常反复感染 猩红热患者可建立牢固的同型抗毒素免疫,四、微生物学检查法,脓、痰、咽拭,脑脊液,血液,增菌培养,分离培养,直接涂片染色,观察菌落及溶血现象,触酶试验(),奥普托辛 (Optochin)试验,肺炎 链球菌,B群 链球
8、菌,马尿酸钠水解试验,胆汁 七叶苷,A群 链球菌,D群 链球菌,肠球菌,6.5 NaCl,血清学分类, ASO test,风湿热,血清学检查,抗“O”试验(ASO test):链球菌侵入体内产生SLO,刺激机体产生相应抗体ASO,当两者中和后,在加入SLO 乳胶试剂,因病人血清中ASO量很多,未被中和掉的抗体与乳胶试剂反应,产生清晰凝集,为阳性;无凝集,为阴性。 原理:中和试验 方法:间接凝集 结果: 效价大于400单位 意义: 链球菌新近感染的指标、 风湿热及其活动性的辅助诊断,预 防, 对病人和带菌者及时治疗,减少传染源 空气、器械、敷料等注意消毒。 流行期间每月注射长效青霉素 对急性咽峡
9、炎和扁桃体炎患者,尤其是儿童,须治疗彻底,防止变态反应疾病的发生,四、防治原则,治 疗,青霉素、红霉素、磺胺药、林可霉素,青霉素首选。 特殊治疗:外科清创,抗休克,抗毒素。,总结,1、金黄色葡萄球菌与链球菌如何鉴别? 2、链球菌的致病物质有哪些? 3、金黄色葡萄球菌与链球菌所引起的化脓性 感染有什么区别?原因是什么? 4、什么是ASO test?有何意义? 5、A群链球菌可引起哪些疾病? 6、链球菌如何分类?,?,有关鉴别试验附加内容,(一)溶血性检查 溶血性是鉴定球菌最常用的项目,也是鉴定过程中重要的一步。1919年Brown对溶血性进行了描述。溶血性的识别可在血平板表面菌落周围和穿刺处通过
10、肉眼观察,也可用显微镜观察。除在分离血平板上观察菌落周围的溶血性外,还可用以下方法确认。 材料:羊血平板。 方法:将标本接种于羊血平板上,用接种针在已接种过的血平板上扎23处,使细菌被接种到琼脂层深处,35孵育过夜。 观察结果:在接种针穿刺过处,羊红细胞完全溶解,形成无色透明区,为溶血。羊红细胞部分溶解或不溶解呈草绿色的环,为溶血。不溶解无溶血环为溶血。 (二) Optochin敏感试验 材料:Optochin (ethylhydrocupreine HCI。)纸片(直径6mm),每片含5g。血平板。 方法:挑取被检菌落,涂在血平板上,贴 Optochin纸片于接种处,35,烛缸孵育18h。
11、观察结果:抑菌环直径14mm为敏感,推断肺炎链球菌。 抑菌环直径14mm时参照胆汁溶菌,或为其他草绿色链球菌。 (三) 杆菌肽敏感试验 材料:含0.04U片的杆菌肽纸片,血平板。 方法:挑取被检菌落,密涂于血平板上,接种量应大,以免出假阳性。贴上杆菌肽纸片,35过夜。 观察结果:形成抑菌环为敏感,则被检菌推断为A群链球菌。,有关鉴别试验附加内容,(四) CAMP试验 材料:血平板,金黄色葡萄球菌 ATCC25923。 方法:在血平板上,用金黄色葡萄球菌划种一条直线,再将被检菌距金黄色葡萄球菌 3mm处垂直接种一短线。用同样方法接种阴性和阳性对照菌。35孵育过夜。 观察结果:在被检菌接种线与金葡
12、菌接种线之间有一个矢形(半月形)加强溶血区,此即CAMP试验阳性。阴性无加强溶血区。 (五) 胆汁-七叶苷试验(平皿法或斜面法) 培养基:牛肉膏 3g 七叶苷 1g 蛋白胨 5g 枸橼酸铁 0.5g 胆盐 40g 蒸馏水 1000ml 琼脂 1 牛肉膏、蛋白胨和琼脂溶于400ml蒸馏水中,胆盐溶于400ml蒸馏水中,枸橼酸铁溶于l00ml蒸馏水中,三者混合,加热充分溶解后,高压灭菌121 15min。七叶苷溶于l00ml蒸馏水,过滤除菌,以无菌手续加到培养基中,倾倒平皿或斜面。 方法:接种被检菌13个菌落,涂划开,置35下,孵育2448h。 观察结果:培养基变黑色或棕褐色为阳性,不变色为阴性。
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