氨基酸铜配合物的合成、表征及对质粒DNA的切割.ppt
《氨基酸铜配合物的合成、表征及对质粒DNA的切割.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《氨基酸铜配合物的合成、表征及对质粒DNA的切割.ppt(28页珍藏版)》请在三一文库上搜索。
1、综合化学实验配位化学和生物无机化学部分,切割DNA的金属配合物,指导教师:毛宗万 黄华珍 ,中山大学化学与化学工程学院 2009年10月,http:/ 功能型甘氨酸铜配合物的合成和表征 模板合成 IR光谱表征 自由基的UV光谱检测 实验4 功能型甘氨酸铜配合物对质粒DNA的切割 琼脂糖凝胶电泳 凝胶成像 总学时:15 学时 地点:丰盛堂218室,实验内容, 超螺旋DNA 缺刻型DNA 线型DNA,自由基机理 自由基进攻糖环或碱基,导致氧化破坏,酯水解机理 亲核试剂进攻磷原子,发生亲核取代反应,酯水解机理优于自由基机理,DNA结构及其断裂方式,配合物与未受损的DNA表面结合并诱导其断裂 进一步
2、在新的断裂处结合 断裂反应 互补链的断裂,DNA的自由基断裂,实验背景模拟博莱霉素,在天然物质中,由5 个氨基酸、2 个六碳糖和1 个氨基侧链构成的博来霉素(bleomycin)可导致DNA链的断裂,从而作为一族广谱抗菌抗肿瘤药物。,导致DNA链的断裂原因是由于博来霉素分子的一部分是铁或铜的配合物,这类配合物能够产生导致DNA链断裂的自由基。,CuP-3A的配位结构示意图,博莱霉素的活性中心,Pamatong, F. V.; Detmer. C. A., III; Bocarsly, J. R.; J. Am. Chem. Soc., 1996, 118, 5339. Detmer. C. A
3、., III; Pamatong, F. V.; Bocarsly, J. R.; Inorg. Chem., 1996, 21, 6292.,博莱霉素的模型化合物,Cu2+ + e- = Cu+ Cu+ + H2O2 = Cu2+ + OH- + OH,氨基酸铜化合物的合成路线,模板反应的化学机理,化合物1的红外光谱,(COO-),(COO-),(NO2),(NO2),化合物2的红外光谱,(COO-),(COO-),(NH2),氢氧自由基的形成和UV光谱检测,由于罗丹明B可与HO迅速反应,并在553nm有强吸收,因此我们可以利用此反应采用分光光度法检验HO的生成。,琼脂糖凝胶电泳,琼脂糖凝胶
4、电泳是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和鉴定核酸的方法 琼脂糖是从海藻中提取的一种线状高聚物 根据琼溶解温度,把琼脂糖分为一般琼脂糖和低熔点琼脂糖 低熔点琼脂糖熔点为6265,溶解后在37下维持液体状态约数小时,主要用于DNA片段的回收,质粒与外源性DNA的快速连接等,凝胶浓度选择琼脂糖凝胶的浓度与DNA分离范围,电泳缓冲液,常用三种缓冲液 Tris-硼酸(TBE)、Tris-乙酸(TAE)、Tris-磷酸(TPE) TBE与TPE:缓冲容量高,DNA分离效果好,但TPE在DNA片段回收时含磷酸盐浓度高,容易使DNA沉淀 TAE:缓冲容量低,但价格较便宜,因而推荐选用TAE。缓冲液中的 E
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 氨基酸 配合 合成 表征 质粒 DNA 切割
链接地址:https://www.31doc.com/p-2969661.html