色谱分析法概述.ppt
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1、色谱分析法概述,主讲教师 崔庆新,2007-2008学年2学期,色谱法,是一种重要的分离、分析技术,混合试样分离单组分 检测定性、定量分析,色谱法的由来,色谱法的创始人 俄国植物学家 茨维特(M.Tswett),色谱法的由来,在茨维特的实中: 装有CaCO3的玻璃管 色谱柱 CaCO3 固定相 纯石油醚 流动相,色谱法的由来,在该实验中,碳酸钙上混合色素被分成不同色带的现象,像一束光线通过棱镜时被分成不同色带的光谱现象一样,因此茨维特把这种现象称为色谱,相应的分离方法称为色谱法(色层法,层析法),色谱法实质是分离,色谱分离的基本条件: 1.互不相溶的两相(流动相、固定相); 2.被分离组分在两
2、相之间作相对运动,色谱法实质分离,分离依据: 各组分在两相之间作用力不同 (吸附能力 分配系数 离子交换能力大小排阻能力 其他亲合作用) 各组分差速异行分离,色谱法分类,按两相状态分,色谱法分类,按分离过程机制分 吸附色谱法利用吸附剂表面对不同组分物理吸附性能的差异 分配色谱法组分在两相中分配系数不同 离子交换色谱法利用离子交换原理 排阻色谱法利用多孔性物质对不同大小分子的排阻作用 等等,色谱法分类,按固定相的固定形式分,色谱法分类,附:根据所使用的技术不同分 高效液相色谱(HPLC) 化学键合相色谱 衍生气相(液相)色谱 裂解色谱 顶空气相色谱 色谱制备 色谱分析,色谱分离的基本条件 柱内紧
3、密均匀地装填涂在惰性载体上的液体固定相 流动相连续不断地在颗粒液相间流 两相充分接触,但互不相溶 色谱分离过程 1.A、B二组分进入色谱柱 2. A、B部分分离 3. A、B柱内完全分离 4.A进入检测器,B仍在柱内 5.B通过检测器 不同组分通过色谱柱时移动速度不等(差速逆行),使分离具有可能性;各组分分子沿柱子扩散分布,使峰形变宽。 色谱分离 ,是基于样品中各组分在两相间平衡分配的差异。,填充柱分配色谱分离过程,色谱图 被分析试样从进样开始,经 色谱柱分离,到各组分全部流过检测器 在此期间所记录下来的响应信号随时间而变化的曲线(分布的图像),称为色谱流出曲线或色谱图。,色谱图及常用术语,色
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