遗传学实验.ppt
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1、遗传学实验,生物与食品工程学院,实验目录,实验一 有丝分裂 实验二 减数分裂 实验三 植物多倍体的诱发及鉴定 实验四果蝇的性状观察与饲养 实验五 果蝇唾腺染色体的观察 实验六 单因子杂交实验,实验七 果蝇的伴性遗传 实验八 双因子与自由组合 实验九 果蝇的连锁与交换 实验十 三点测交 实验十一 手部皮肤纹理分析 实验十二 人体染色体核型分析,有丝分裂,实验目的 1、学习用植物根尖制作染色体标本的方法,从选材、培养、前处理、取材、固定、解离到压片这一整套操作程序的实际训练。 2、通过观察染色体的动态变化了解有丝分裂全过程及其在遗传学理论中的意义 。,实验原理 植物细胞的有丝分裂是植物体细胞增殖的
2、主要方式,每个有丝分裂周期包括间期、前期、中期、后期及末期。 植物 G1期 S期 G2期 M期 分裂周期(小时) 普通小麦 0.8 10.0 2.0 1.2 14 大麦 1.9 4.5 3.0 1.0 10.4 蚕豆 5.0 7.5 5.0 21 9.5,实验步骤,(一)取材:根尖培养至长约2厘米时,于上午10时左右剪取。 (二)预处理 :1、冷冻处理 :0-3 处理 24小时 2、药剂处理:0.1%秋水仙碱溶液处理2-4小时 (三)固定:卡诺氏固定液固定24小时 ,70%酒精4保存 。,(四)解离: 1N的盐酸溶液60下解离3分钟 (五)染色:苯酚品红染色液,染色5分钟 (六)压片:注意由轻
3、而重。先中部后四周,让材料铺展成单层细胞 (七)镜检 :,作业,绘出或照片展示有丝分裂图象,并注明时期。,减数分裂,实验目的 1、学习采集植物减数分裂观察所用材料的方法。 2、通过染色体制片,进一步掌握压片法的操作技巧。 3、对减数分裂中丰富的染色体动态变化,配对与交换、减数过程的出现,领会其在遗传学基本理论中的意义。,实验原理,减数分裂是生物在性母细胞成熟时配子形成过程中发生的一种特殊的有丝分裂。它包括连续两次的细胞分裂阶段: 第一次分裂为染色体数目的减半分裂。 第二次分裂为减数后染色体数目的等数分裂,是着丝粒分裂。,实验步骤,1、材料处理:上午9-11时摘取蚕豆花序,固定、保存。 2、材料
4、整理:取固定好的花序,按其花蕾大小,排列在小培养皿中。选中等大小的花蕾剥开,取出花药放于载玻片上。 3、剥开花药 ,改良苯酚品红染色液染色10分钟。,4、压片 5、镜检: 先在低倍镜下寻找花粉母细胞,一般花粉母细胞较大、圆形或扁圆形,细胞核大、着色较浅。而一些形状较小,整齐一致着色较深的细胞是药壁体细胞。高倍镜观察减数分裂各时期染色体的行为和特征。 注意识别花粉发育时期,如过早这再选择大些的花蕾,过迟则反。,作业 绘制或照片展示减数分裂各期细胞图,提高分析、解释减数分裂过程的能力。,植物多倍体的诱发及鉴定,实验目的 1.了解人工诱发多倍体植物的原理、方法及其在植物育种上的意义。 2.观察多倍体
5、植物,鉴别植物染色体数目的变化及引起植物其他器官的变异。,实验原理 植物多倍体是指体细胞中含有3个或3个以上染色体组的个体。多倍体可自然发生也可人工诱发。人工诱发最有效的方法是利用从百合科植物秋水仙中提取的秋水仙碱进行处理。用它的水溶液浸渍、涂抹或点滴植物的分生组织,可以抑制细胞分裂时纺锤体的形成,使细胞不能分裂为二,但不影响染色体的复制,因而染色体复制加倍。,实验步骤 1、植物根尖培养 2、多倍体诱导:利用0.1%秋水仙素溶液继续培养根尖,清水培养作对照,直到根尖膨大为止。 3、制片镜检,作业 绘制或照片展示植物根尖多倍体细胞图。,果蝇的观察和饲养,实验目的 黑腹果蝇(Drosophila
6、)是双翅目昆虫 特点:生活史短,易饲养,繁殖快,染色体少,突变型多,个体小 是一种很好的遗传学实验材料,是一种模式生物,果蝇的生活史,果蝇的生活史 1.卵 2.一龄幼虫 3. 二龄幼虫 4.三龄幼虫 5.蛹 6.成虫,果蝇成虫的雌雄鉴别:,实验中使用的果蝇突变品系,影响部分 突变名称 基因符号 染色体上座位 翅 残翅 vg R67.0 眼色 白眼 w X1.5 体色 黑檀体 e R70.7 刚毛 焦刚毛 sn3 X21.0 翅形 小翅 m X36.1,目前果蝇饲料较好的配方如下: A:糖6.2克,加琼脂0.62克,在加水38毫升,煮沸溶解。 B:玉米粉8.25克,加水38毫升,加热搅拌均匀后,
7、再加0.7克酵母粉。 A和B混合加热成糊状后,加0.5毫升丙酸,即可分装到培养瓶中。丙酸的作用是抑制霉菌污染。,实验步骤,1、培养基的配制 2、学习果蝇的麻醉方法 3、果蝇杂交方法 4、原种培养,作业 1、雌雄果蝇区别归纳 2、培养基配制过程及果蝇培养中的注意事项,果蝇幼虫唾腺染色体的观察,实验目的 1.练习取出果蝇等幼虫唾腺的技术和制作唾腺染色体标本的方法。 2.观察多线染色体的特征:a.巨大;b.体细胞配对,所以染色体只有半数(n);c.各染色体的异染色质多的着丝粒部分互相靠拢形成染色中心;d.横纹有深浅、疏密的不同。,实验原理,果蝇的唾腺染色体位于幼虫前端的食道两侧和神经球附近。剖取果蝇
8、唾腺细胞进行观察可见到一个由4对染色体着丝粒结合形成的染色中心,以及向四周伸展的5条染色体臂(X、2L、2R、3L、3R),其中4对染色体为线状,与染色中心密切相联,总称为唾腺染色体。,黑腹果蝇唾腺染色体,实验步骤,1.幼虫饲养:三龄幼虫 2.唾腺剖取:在双筒显微镜下左手持镊子压住虫体中后部,右手持解剖针按住头部,轻轻向前拉动,使头部扯离虫体,从而拉出一对透明微白的长形小囊即唾腺。 3.解离:1N盐酸,解离2-3分钟 4.染色:1%醋酸洋红染色10-20分钟。 5.压片 6.镜检,作业 1.绘制或照片展示你所看到的图象 2.解释2n=8的黑腹果蝇的唾腺细胞里为什么出现由一点发散出5条臂的染色体
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