高中生物全程复习方略配套课件中图版微生物培养技术.ppt
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1、第一章 微生物培养技术,微生物培养基,【高考警示钟】 自养微生物与异养微生物所需的营养物质不同 (1)自养微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮的无机物,而异养微生物需要的碳源、氮源来自含碳、含氮的有机物,因此可根据培养基中营养物质判断微生物的代谢类型。 (2)含氮无机物不但能给自养微生物提供氮源,也能作为能源物质,提供能量,如NH3既作为硝化细菌的氮源也作为能源。,消毒与灭菌,微生物的分离方法 1.平板划线法、稀释涂布平板法、稀释混合平板法 (1)原理:在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其生长成单个的菌落,则这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。 (2)目的:分离由一个细菌繁殖而来的菌落。 (
2、3)菌落判断的依据:形状、大小、边缘、隆起度、颜色等。 (4)平板划线法与稀释涂布平板法比较:,接种环灭菌 试管口灭菌 沾取混合菌液 接种(连续划线和交叉划线),制涂布器 涂布器涂布培养液 无菌滤纸覆盖,工具灭菌、酒精灯火焰旁操作 工具灭菌冷却后才可使用,(5)实例:从酒曲中分离酵母菌。 2.选择培养基分离法 (1)原理:使分离对象大量繁殖,抑制其他微生物的生长。 (2)适用范围:分离的微生物在混合样品中数量较少时。 (3)实例:分离分解纤维素的细菌。,微生物的数量测定,制成悬液 显微镜下计数 计算出单位体积内的 微生物总数,配制均匀的系列稀释液 使其均匀分布于培养基内 统计培养基中出现的菌落
3、数,所需设备简单 能观察到微生物的形态特征,能观察到菌落的特征 在含菌数较少的情况下也可完成,难以计数微小的细菌,每克样品中菌数= 某稀释倍数的菌落平均数细菌培养时所用的稀释液体积 稀释倍数,培养基及其配制 【典例训练1】(2011新课标全国卷)有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染,某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题: (1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以_为惟一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于_培养基。 (2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即_和_。,(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分
4、解圈大说明该菌株的降解能力_。 (4)通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_和_。无菌技术要求实验操作应在酒精灯_附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。,【解题指南】 1.考查实质:本题以筛选菌株为情境考查培养基的配制、接种方法、无菌技术等知识点。 2.解题关键:熟悉微生物操作的基本原理、基本技术和操作流程,明确无菌技术的要素。,【解析】实验目的是为了筛选出可以分解原油的高效菌株,因此在筛选的时候选择培养基的碳源为原油。纯化分离微生物的方法有两种:平板划线法和稀释涂布平板法;灭菌的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。,答案:(1)原油 选择 (2)平板划线法
5、稀释涂布平板法 (3)强 (4)干热灭菌 高压蒸汽灭菌 火焰,【互动探究】(1)若在该培养基中加入青霉素,能更好地起到筛选作用吗? 提示:不能。 分析:青霉素培养基往往是真菌选择培养基,在加青霉素的培养基中,细菌生长被抑制,因而不能筛选出能高效降解原油的菌株(细菌)。,(2)细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理方法,这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌? 提示:培养基、手、接种环。 分析:高压蒸汽灭菌的设备,通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。火焰灼烧,可以迅速彻底地灭菌,适用于微生物的接种工具,如接种环。,微生物的纯培养 【典例训练2】从自然界微生
6、物中筛选某菌种的一般步骤是:采集菌样富集培养纯种分离性能测定。 (1)不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样,然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从_环境中采集。 (2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件,使其群落中的数量大大增加,从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择_的培养基,并在_条件下培养。,(3)接种前要对培养基进行_处理。在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在_条件下进行。 (4)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图,请分析接种的具体方法。,获得图A效果的接种方法是
7、_,图B效果的接种方法是_。一同学在纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成一片, 最可能的原因是_,应当怎样操作才可避免此种现象? _。 (5)如果探究温度对纤维素酶活性的影响,自变量是_,应 该保持_等不变(至少答两项)。,【解题指南】 1.知识储备 (1)菌种筛选的原理和方法; (2)微生物纯化培养的具体方法和情境分析。 2.解题关键:了解选择培养基配制的一般规律和具体应用,并结合实验现象分析纯化培养的接种方法。,【解析】(1)筛选菌种应从适于目的菌种生长、繁殖的环境中寻找,故培养噬盐菌应从高盐环境中采集。 (2)富集培养时培养基及培养条件应能促进目的菌的生长、繁殖。 (3)微生物的分
8、离及培养中必须保证无菌,包括培养基的灭菌和操作过程的灭菌等。 (4)纯化培养中接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法,前一种方法形成的菌落分布较均匀,后一种方法形成的菌落分布不均匀,先划线的部分菌落密集甚至相连,后划线的部分菌落分布稀疏。 (5)探究温度对酶活性的影响时,温度为自变量,酶活性为因变量,其他变量如底物和酶的用量、pH、反应时间等均为无关变量。,答案:(1)海滩等高盐 (2)以淀粉为惟一碳源 高温 (3)高压蒸汽灭菌 无菌 (4)稀释涂布平板法 平板划线法 菌液浓度过高 增大稀释倍数(或培养过程被杂菌污染 严格无菌操作;或用接种环划下一区域前接种环没有灭菌 每划一个新区域前都要对接种
9、环进行灭菌处理)(原因与操作要对应) (5)温度 纤维素的量与浓度、反应时间、pH,【变式训练】上海同济大学任杰教授研制的“玉米塑料”可以代替传统的化工塑料制成一次性餐具。玉米塑料的成分是一种高分子材料聚乳酸,其生产流程大致如图,请根据生产流程图回答问题: (1)玉米浆发酵工程需要在_环境条件下进行。 (2)研究人员为了提高生产效率,需要获得纯正的乳酸菌。从土壤中提纯分离乳酸菌所用的培养基从功能上看属于_培养基。接种乳酸菌最常用的是平板划线法和_法等,若用平板划线法,接种过程结束后仍然要灼烧接种环的目的是_。,(3)培养基配方中除了提供水、碳源、氮源和无机盐外,还要满足微生物对_、_以及氧气的
10、要求。 (4)为了判断培养基的制作是否合格,需要将接种乳酸菌的甲培养基和一个_的乙培养基都放在恒温箱中培养,分别观察并记录结果。若乙培养基中长出了菌落,说明_。,【解析】(1)发酵过程中利用乳酸菌产生乳酸,故需在无氧环境中进行。(2)获得特定菌的培养基是选择培养基,接种方法除平板划线法之外常用稀释涂布平板法或稀释混合平板法,结束后灼烧接种环的目的是灭菌。(3)考查微生物培养的条件。(4)考查培养基是不是已被污染需培养后看有无菌落生成。 答案:(1)无氧 (2)选择 稀释涂布平板(或稀释混合平板法) 杀死接种环上的残留菌种 (3)pH 特殊营养 (4)未接种 培养基已被污染,1.饲养动物常用的植
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