高中生物基础实验详细步骤.ppt
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1、高三 生物实验专题复习,基础部分,1、学生实验(必修部分),、学生实验(选修部分),实验一、生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,1、实验原理:,葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖;淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。,实验一、检测生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质(p18),生物组织中脂肪的鉴定,实验二、观察DNA 、RNA在细胞中的分布(p26),实验原理,吡罗红,甲基绿,红色,绿色,主要在细胞核,线粒体、叶绿体含少量,主要在细胞质,取口腔上皮细胞制片 水解 冲洗涂片 染色 观察,方法步骤,(8%HCl,能改变细胞膜的通透性,同时使DNA与蛋白质分离),人口腔上皮细胞DNA、RNA分布,洋葱鳞片叶
2、内表皮细胞DNA、RNA分布,(蒸馏水),(0.9%的NaCl),2、“观察DNA和RNA在细胞中的分布”的实验中,没有用的试剂 A.0.9NaCl B.8的HCl C. 吡罗红、甲基绿染色剂 D.斐林试剂,1、将用甲基绿和吡罗红染色的人口腔上皮细胞装片放在显微镜下观察,可以看到 A.细胞核内呈现红色,细胞质内呈现绿色 B.细胞核内呈现绿色,细胞质内呈现红色 C.细胞核和细胞质都呈现绿色 D.细胞核和细胞质都呈现红色,实验三、用显微镜观察多种多样的细胞(p7),实验四、观察线粒体和叶绿体(p7),一、实验原理,1.高等绿色植物的叶绿体存在于细胞质基质中,叶绿体一般是 色的,扁平的 形或 形,可
3、以用高倍显微镜观察它的形态和分布。 2.健那绿染液是专一性的细胞染料。可以使活细胞的线粒体呈现 色。,绿,蓝绿,球,椭球,二、操作指导:(显微镜的使用),2、取镜安放,3、对光,4、放置玻片标本,5、观察,6、高倍显微镜的使用,1、显微镜的构造,镜筒,压片夹,载物台,遮光器与光圈,反光镜,镜座,镜柱,镜臂,细准焦螺旋,粗准焦螺旋,物镜,目镜,三、方法步骤与注意事项,观察叶绿体装片:,取材:,取一片 。 (薄且有叶绿体),制片:,载玻片中央滴一滴清水,将叶片放入,加上盖玻片, 制成临时装片,观察:,先 倍镜找到叶片细胞后高倍镜观察叶绿体(形 态和分布)光强度的变化与叶绿体的位置关系,绘图:,用铅
4、笔画一个叶绿体形态和分布情况清楚的叶肉细胞,藓类小叶或波菜叶稍带叶肉的下表皮,低,显微镜下的黑藻细胞,注意事项:,1)选用藓类的小叶或者菠菜叶的下表皮(稍带叶肉)作观察叶绿体的实验材料是实验成功的关键,因为藓类属阴生植物,菠菜叶的下表皮是菠菜叶的背阳面,这样的细胞中的叶绿体大且数目少,便于观察。) 2)实验过程中的临时装片要始终保持有水状态,目的是为了防止叶绿体失水。如果叶绿体失水,叶绿体就缩成一团,无法观察叶绿体的形态和分布。 3)正确使用低倍镜:取镜对光安放装片下降镜筒调焦。下降镜筒时,必须双眼注视物镜和装片的距离,以免压坏装片和碰坏物镜。 4)正确使用高倍镜:将低倍镜下看到的物像移到视野
5、中央转动转换器,换用高倍物镜调整光圈和反光镜,使视野亮度适宜调节细准焦螺旋,直至物像清晰。,实验五、通过模拟实验探究膜的透性(p61),实验六、观察植物细胞的质壁分离和复原(p61),观察植物的质壁分离与复原1,实验六、观察植物细胞的质壁分离与复原,细胞液浓度外界溶液浓度时,细胞吸水,质壁分离复原。 原生质层伸缩性大于细胞壁伸缩性,因而收缩幅度大,造成质壁分离。,1实验原理,紫色洋葱磷片叶(液泡大且有颜色易观察),2、实验材料及试剂,0.3g/ml的蔗糖溶液,(一)比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率,1、实验原理:,新鲜肝脏中含有过氧化氢酶,和Fe3+一样,能催化过氧化氢分解成水和氧,但二者效
6、率不一样。,2、实验方法与步骤,(1)取两支洁净的试管,编号,各注入2ml过氧化氢溶液,(2)向1号试管内滴入2滴肝脏研磨液;向2号对照试管内 滴入2滴氯化铁溶液。,(3)堵住试管口,轻轻地振荡两支试管,使试管内的物质 混合均匀。观察并记录哪支试管产生的气泡多。,(4)将点燃但无火焰的卫生香分别放入1、2号试管内液面 的上方,观察并记录哪支卫生香燃烧猛烈。,实验七、探究影响酶活性的因素 (p78 83),4、注意事项,肝脏要新鲜,并要研磨(不新鲜的肝脏中,过氧化氢酶的活性会由于细菌的破坏而降低。研磨液效果好,因为它增加过氧化氢酶与过氧化氢的接触面积),滴加氯化铁溶液和肝脏研磨液不能合用一支滴管
7、。,过氧化氢有腐蚀性;实验注意安全。,实验时将点燃的卫生香插入试管处,不要插入太深,防止受潮熄灭。,3、实验结果与结论,两支试管均有气泡产生,但1号试管产生得快而且多,两支卫生香均燃烧,但1号试管口的更猛烈。以上的一组对比实验可以证明酶的高效性。,(二)探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解作用,1、实验原理:,淀粉和蔗糖都没有还原性,淀粉酶将淀粉水解成的麦芽糖则具有还原性;蔗糖水解产生的葡萄糖和果糖都具有还原性,但淀粉酶不能将蔗糖水解。,2、实验材料:,质量分数为3的可溶性淀粉溶液和蔗糖溶液;质量分数为2的新鲜淀粉酶溶液。,3、实验方法与步骤,(1)取两支洁净的试管,编号,然后向1号管注入2ml可溶性
8、淀粉溶液和2ml新鲜淀粉酶溶液。向2号管注入2ml蔗糖溶液和2ml新鲜淀粉酶溶液。,(2)轻轻振荡两支试管,使试管内的液体混合均匀,然后将试管的下半部浸到600C左右的热水中,保温5min。,(3)取出试管,各加入2ml斐林试剂。,(4)将两支试管的下半部放进盛有热水的大烧杯中,用酒精灯加热,煮沸并保持1min,(5)观察并记录两支试管内的变化。,5、注意事项,做好本实验的关键是蔗糖的纯度和新鲜程度;,实验中要将试管的下半部浸入到600C的温水中;,制备的可溶性淀粉溶液,一定要完全冷却。,4、实验结果与分析,1号有砖红色沉淀,2号没有颜色变化。即淀粉被淀粉酶水解,而蔗糖没有被水解。酶作用有专一
9、性。,1.下列关于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖水解作用实验原理的叙述中,不正确的是: A.淀粉和蔗糖都是非还原糖,在加热条件下与斐 林试剂作用不产生砖红色沉淀 B.淀粉能在淀粉酶的催化下水解成还原糖 C.蔗糖能在淀粉酶的催化下水解成还原糖葡萄糖 和果糖 D.淀粉酶能否催化淀粉和蔗糖的水解,是通过有无还原糖特定的颜色反应而证明的,C,(三)探索影响酶活性的因素,1、实验原理,淀粉具有遇碘变蓝的特性,淀粉酶在适宜的条件下可使淀粉水解,遇碘不再变蓝;但麦芽糖和葡萄糖能够与斐林试剂发生氧化还原反应生成砖红色沉淀。,2、方法步骤,(1)取3支试管编上号,并且分别注入2ml可溶性淀粉溶液。,(2)将3支试管分别
10、放入600C左右的热水、沸水和冰块中,维持各自的温度5min。,(3)在3支试管中各注入1ml新鲜的淀粉酶溶液,摇匀后,维持各自的温度5min。,(4)在3支试管中各滴入1滴碘液,然后摇匀。,(5)观察并记录这3支试管中溶液颜色的变化情况。,A、温度对酶活性的影响,B、pH对酶活性的影响,(1)取三支洁净的试管,编号,分别注入1ml新鲜淀粉酶溶液、,()振荡这3支试管,使试管内的液体混合均匀。然后,将3支试管的下半部浸到600C左右的热水中,保温5min。,()在3支试管中各加入2ml斐林试剂,()将3支试管的下半部放进的大烧杯中,用酒精灯加热,煮沸并保持1min,()观察并记录这3支试管中溶
11、液颜色的变化情况。,()在3支试管中分别加入盐酸清水氢氧化 钠各1ml,(3)在3支试管中各加入2ml可溶性淀粉溶液,3、注意事项,在实验A中注入2ml可溶性淀粉的3支试管要先放入不同环境5min,在实验B中,操作时必须先将酶置于不同环境条件下,再加可溶性淀粉液。,在温度对酶活性影响的实验中,为什么要在加入淀粉酶溶液之前控制好各自的温度?,防止在控制温度之前淀粉酶已将淀粉水解,从而失去对照作用,影响实验效果。,问题讨论,实验八:叶绿体中色素的提取和分离 1实验原理: (1)色素提取:叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇(丙酮)中,用无水乙醇提取色素。 (2)色素分离:叶绿体中色素在层析液(
12、汽油)中的溶解度不同,溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快,溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢,这样,叶绿体中的色素就在扩散过程中分离开来。,2实验方法步骤: (1)提取绿色叶片中的色素:称取5g新鲜绿色叶片,剪碎放入研钵中,向其中加入少许碳酸钙和二氧化硅,再加mL无水乙醇,进行迅速充分研磨,将研磨液倒入漏斗中过滤出色素液。 (2)制备滤纸条 (3)色素分离纸层析法 (4)观察实验结果 (5)整理、洗手,3、注意事项:,在叶绿体色素的分离实验中,要使色素带清晰又整齐,应采取的措施是,定性滤纸要干燥 剪去滤纸条一端两角 滤液细线画细而直 重复画线 盖上培养皿盖,实验九、探究酵母菌的呼吸方式(p91
13、),一、实验原理 1、酵母菌是单细胞真菌属于兼性厌氧菌。进行有氧呼吸产生 水和CO2 ,无氧呼吸产生酒精和CO2 。 2、 CO2的检测方法 (1)CO2使澄清石灰水变浑浊 (2) CO2使溴麝香草酚酞水溶液由蓝变绿再变黄 3、酒精的检测 橙色的重酪酸钾溶液在酸性下与酒精发生反应,变成灰绿色。,二、实验假设 酵母菌在有氧情况下进行有氧呼吸,产生CO2,在无氧情况下 进行无氧呼吸,产生CO2和酒精。,三、实验用具(略),四、实验结果预测,1、酵母菌在有氧和无氧情况下均产生了CO2,能使澄清石灰 水变浑浊。 2、酵母菌在有氧情况下,没有酒精生成,不能使重铬酸钾溶 液发生显色反应;在无氧情况下,生成
14、了酒精,使重铬酸钾溶 液发生灰绿色显色反应。 3、酵母菌的有氧呼吸比无氧呼吸释放的CO2要多,五、实验步骤,1、配制酵母菌培养液(等量原则)置于A、B锥形瓶 2、组装有氧呼吸和无氧呼吸装置图,放置在25-35 、环境 下培养8-9小时。 3、检测CO2的产生 4、检测酒精的产生 (1)取2支试管编号 (2)各取A、B锥形瓶酵母菌培养液的滤液2毫升,注入试管 (3)分别滴加0.5毫升重酪酸钾-浓硫酸溶液,轻轻震荡、混匀. 试管密封,试管不密封,六、观测、记录,变混浊快,无变化,变混浊慢,出现灰绿色,七、实验结果,酵母菌在有氧和无氧条件下均能进行细胞呼吸。 在有氧条件下,通过细胞呼吸产生大量的CO
15、2, 在无氧条件下通过细胞呼吸产生酒精和少量的CO2。,、实验原理 、方法步骤 (1)根尖培养 (2)装片制作:解离漂洗染色制片 (3)观察:低倍镜观察 高倍镜观察 (4)绘图:,实验十:观察植物细胞的有丝分裂,根尖、茎尖的分生区、茎形成层、愈伤组织可观察到有丝分裂。,、 注意事项,培养根尖:应每天换水 (防止水中缺氧烂根),取材:取生长旺盛、带有分生区的根尖,长度 为根尖的2-3mm。,解离:解离液(15%盐酸95%酒精溶液11); 时间:室温3-5分钟,至根尖酥软; (时间短则细胞没有完全分离,长则可能使根尖烂掉) 目的:使组织细胞分离开,杀死并固定细胞,漂洗:用清水漂洗10min,目的是
16、洗去组织中的解 离液,便于染色(防止酸碱中和)。,压片:目的是使细胞分散开。方法(用镊子弄碎根尖,盖上盖玻片,再放上一块载玻片,压片)(压片过重过猛可能将组织压碎、压烂;过轻则细胞未充分分散开而重叠。),低倍镜观察:找到分生区细胞(特点:细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞正在分裂),高倍镜观察:找各时期细胞。可见处于间期的细胞最多,中期最少。不能看到某个细胞连续分裂的过程,因细胞在解离时已被杀死。,染色:染液(0.01g/mL的龙胆紫或0.02g/mL的醋酸洋红);时间为35分钟;目的是使染色体或染色质被碱性染料染成深色,便于观察。,问题讨论 (1)解离的目的是什么?如果解离时间过短会造成什么后
17、果? (2)如果漂洗不干净会有什么结果? (4)在分生区能不能看到细胞正在分裂?有何特点? (5)观察有丝分裂,视野中处于什么时期的细胞最多?为什么?,能 细胞排列整齐、呈正方形,如果解离时间过短,就不能使细胞之间的连接分开,造成压片失败,细胞不能均匀地在装片上铺成一层。,如果漂洗不干净,沾在洋葱根尖上的盐酸与酒精就 会和龙胆紫反应,造成根尖细胞染色体不能染上颜色,实验十一、模拟探究细胞表面积与体积的关系(110),目的要求:通过探究细胞大小,即细胞的表面积与体积之比,与物质运输效率之间的关系,探讨细胞不能无限长大的原因。 材料用具:(略) 方法步骤:,1、切琼脂块 2、浸泡琼脂块 3、观察测
18、量 4、计算填表,测量结果(表),54,27,2:1,24,8,3:1,6,1,6:1,0.5,0.5,0.5,19:27,7:8,1:1,结论:,琼脂块的表面积与体积之比随着琼脂块的增大而 ;NaOH扩散的体积与整个琼脂块的体积之比随着琼脂块的增大而 。,减小,减小,细胞不能无限长大的原因:,1、 通过实验可以得到:细胞体积越大,其相对表面积越小,细胞的物质运输的效率就越低。细胞表面积与体积的关系限制了细胞的长大。 2、 细胞核中的DNA是不会随着细胞体积的扩大而增加的,如果细胞太大,细胞核的“负担”就会过重。,必修实验一、观察细胞的减数分裂(21),了解动物精母细胞减数分裂各时期的主要特点
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