第六章微生物的生长和控制第一节测定生长繁殖的方法.ppt
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1、第七章 微生物的生长及其控制,生长和繁殖是保证 微生物获得巨大数量的必要前提。,生物个体物质有规律地、不可逆增加,导致个体体积扩大的生物学过程。,生长(growth):,生物个体生长到一定阶段,通过特定方式产生新的生命个体,即引起生命个体数量增加的生物学过程。,繁殖(reproduction):,生长是一个逐步发生的量变过程, 繁殖是一个产生新的生命个体的质变过程。,在高等生物里这两个过程可以明显分开, 但在低等特别是在单细胞的生物里,由于细胞小, 这两个过程是紧密联系又很难划分的过程。,生长和繁殖,群体生长 = 个体生长 + 个体繁殖,个体生长 个体繁殖 群体生长,在一定时间和条件下细胞数量
2、的增加(微生物群体生长),微生物生长:,在微生物学中提到的“生长”,一般均指群体生长,这一点与 研究大生物时有所不同。,第一节 测定生长繁殖的方法,单位时间里微生物数量或生物量(Biomass)的变化,微生物生长:,微生物生长的测定:,个体计数 群体重量测定 群体生理指标测定,评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响;,评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制(或杀死)作用的效果;,客观地反映微生物生长的规律;,一、测生长量,测定生长量的方法很多,适用于一切微生物。,(一)测生长量直接法,(二)测生长量间接法,(一)测生长量直接法,测体积法:粗放型,在刻度离心管中测沉降量,称干重法:精确型,离心法
3、和过滤法获得菌体细胞, 微生物的干重一般为其湿重的1020。,测定多细胞及丝状真菌生长情况的有效方法,11,1.测体积:在刻度离心管中离心,测定沉淀多少来确定微生物的生长情况。,2.测干重: 将细胞培养液离心或过滤后,洗涤除去培养基成分后转移到适当的容器中,置100105干燥箱烘干或低温低压干燥(6080)至恒重后,称重。 若是固体培养物,可先加热溶解琼脂, 然后过滤出菌体,洗涤、干燥后再称重。该法适合于单细胞和多细胞微生物的生长测定。,(二)测生长量间接法 1.比浊法,用分光光度法对无色的微生物悬浮液进行测定,一般选用450650nm波段。,实验测量时应控制在菌浓度与光密度成正比的线性范围内
4、,否则不准确。,在一定波长下,测定菌悬液的光密度,以光密度(optical density, 即O.D.)表示菌量。,若要连续跟踪某一培养物的生长动态,可用带有侧臂的三角烧瓶作原位测定,即不必取样。,2.生理指标法,样品中微生物数量多或生长旺盛,这些指标愈明显,因此可以借助特定的仪器如瓦勃氏呼吸仪、微量量热计等设备来测定相应的指标。,微生物的生理指标,如氮、碳、DNA、ATP等物质的含量,呼吸强度、耗氧量、酶活性、生物热等与其群体的规模成正相关。,常用于对微生物的快速鉴定与检测,一种特定的微生物,每一个细胞中的ATP浓度几乎是一个常数,所以测定这种微生物的ATP含量,即可知其细胞数。,已知细胞
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