低压层析系统.ppt
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1、6/20/2019,1,中低压层析系统,主讲人:彭元鸿,6/20/2019,2,中低压层析系统,流量 输出流量:1-6800 ml/h 波长 220、254、280、340nm 定时范围 1s-24h 收集容量 12ml100 温度范围 0-30 配置 蠕动泵、三支层析柱、(仪器车)层析柜、紫外检测仪、自动部分收集器、电脑采集器。(电脑自配),6/20/2019,3,中低压层析系统,恒流泵 层析柱 紫外监测仪 分布收集器 核酸蛋白检测系统,6/20/2019,4,层析法,层析法 是目前广泛应用的一种分离技术,是生物化学 、分子生物学其 它学科领域有效的分离分析工具之一。 层析法是利用不同物质理
2、化性质的差异而建立起来的技术。所有的层析系统都由两个相组成:一是固定相,它或者是固体物质或者是固定于固体物质上的成分;另一是流动相,即可以流动的物质,如水和各种溶媒。当待分离的混合物随溶媒(流动相)通过固定相时,由于各组份的理化性质存在差异,与两相发生相互作用(吸附、溶解、结合等)的能力不同,在两相中的分配(含量对比)不同,而且随溶媒向前移动,各组份不断地在两相中进行再分配。 与固定相相互作用力越弱的组份,随流动相移动时受到的阻滞作用小,向前移动的速度快。反之,与固定相相互作用越强的组份,向前移动速度越慢。分部收集流出液,可得到样品中所含 的各单一组份,从而达到将各组份分离的目的。,6/20/
3、2019,5,层析法,6/20/2019,6,层析法,吸附层析 是以吸附剂为固定相,根据待分离物与吸附剂之间吸附力不同而达到分离目的的一种层析技术。 分配层析 是根据在一个有两相同时存在的溶剂系统中,不同物质的分配系数不同而达到分离目的的一种层析技术。 凝胶过滤层析 是以具有网状结构的凝胶颗粒作为固定相,根据物质的分子大小进行分离的一种层析技术。 离子交换层析 是以离子交换剂为固定相,根据物质的带电性质不同而进行分离的一种层析技术。 亲和层析 是根据生物大分子和配体之间的特异性亲和力(如酶和抑制剂、抗体和抗原、激素和受体等),将某种配体连接在载体上作为固定相, 而对能与配体特异性结合的生物大分
4、子进行分离的一种层析技术。 亲和层析是分离生物大分子最为有效的层析技术,具有很高分辨率。,6/20/2019,7,层析柱分类,层析柱产品品种: 1、普通层析柱(柱内压增加1-2巴) 2、中压特制玻璃层析柱(带转换接头)(柱内压增加5-7巴) 3、高压水冷夹套层析柱(带转换接头)(柱内压增加5巴左右) 4、大型有机玻璃柱(带分布系统)(柱内压小于0.5巴) 5、有机玻璃层析柱(带转换接头) (柱内压小于0.5巴) 6、有机玻璃层析柱(带转换接头) (柱内压增加2-3巴),层析柱 是柱色谱中的主体之一,一般用玻璃管或有机玻璃管。,6/20/2019,8,层析柱,6/20/2019,9,层析柱规格(
5、上海沪西),6/20/2019,10,BT-100恒流泵,6/20/2019,11,HD-5电脑紫外监测仪-1,6/20/2019,12,HD-5电脑紫外监测仪,HD-5电脑紫外检测仪-2,6/20/2019,13,HD-5电脑紫外监测仪,HD-5电脑紫外检测仪-3,HD-5电脑紫外检测仪是应用于液相色谱中具有紫外吸收物质(蛋白、核酸、多肽、酶)的检出仪器。该仪器与层析柱、恒流泵、部分收集器及电脑或记录仪配套,可组成一个完整的液相色谱分离分析装置。在柱层析分离分析过程中,洗脱液流过该仪器样品池,电脑或记录仪即可自动绘制出样品分离的图谱(吸受峰或透过峰),同时可检测出所需样品在部分收集器试管中的
6、分布情况,并随时监测柱层析过程,特别是在摸索实验过程中,及时改变洗脱条件,以便迅速取得最佳实验方案。,6/20/2019,14,HD-5电脑紫外监测仪,HD-5电脑紫外检测仪-4,主要技术指标: 1. 检测波长:220 nm 254 nm 280 nm 340 nm 2. 流动式样品池:容积100 ul 3. 最大流量:10 ml / min(特殊需要可另配) 4. 配接记录仪信号:0 - 10mV 5 .可直接连接电脑检测绘制样品分离图谱 6 使用环境温度:0 - 30C 7. 工作时间:连续 8. 电源:220 AC 20 W 9. 保险丝:BGXP-1 1 A,6/20/2019,15,
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