动物细胞工程.ppt
《动物细胞工程.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《动物细胞工程.ppt(30页珍藏版)》请在三一文库上搜索。
1、专题2 细胞工程,2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体,植物体细胞杂交的意义:,打破生殖隔离,克服远缘杂交不亲和的障碍,培育作物新品种。,一、动物细胞融合,细胞融合是正常的生命活动。,(一)动物细胞融合的概念,动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。,(二)动物细胞融合的过程,与植物原生质体融合原理相同,方法类似。,杂交细胞:融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。,细胞A,细胞B,杂种细胞,灭活的病毒,物理法 化学法,用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程,灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面,细胞膜被病毒颗粒穿通,细胞膜连接,细胞融合,形成杂种细胞 (细胞膜
2、具有一定的流动性),两个核的融合是在杂种细胞第一次有丝分裂时进行的,为什么灭活的病毒能作为诱导剂?,因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。,不灭活的病毒能作为诱导剂吗?,不能,因为不灭活的病毒会感染细胞。,动物细胞融合技术的发展简史,(三)动物细胞融合的应用,1.突破有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。,2.成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。,3.为制造单克隆抗体开辟了新途径。,鼠鸡、鼠兔、鼠猴、人鼠、人兔、 人鸡、人蛙、酵母菌鸡 、人胡萝卜等,主要用于制备单克隆抗体,获得杂种植株,用途,物理、化学方法(同左),灭活
3、的病毒,物理(离心、振动、电激) 化学(聚乙二醇),诱导方法,使细胞分散后诱导细胞融合,去除细胞壁后诱导原生质体融合,细胞融合的方法,细胞膜的流动性,细胞膜的流动性、植物细胞全能性,原理,动物细胞融合,植物体细胞杂交,比较项目,植物体细胞杂交、动物细胞融合的比较,二、单克隆抗体,什么是抗体? 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 B淋巴细胞(浆细胞)能产生抗体。,(一)获得抗体的传统方法,1、把某种抗原反复注射到动物体内,然后从动物血清中分离出所需的抗体。,2、缺点: 产量低,纯度低,特异性差。,人们发现,在动物发生免疫反应的过程中,体内的B淋巴细胞
4、可以产生多达百万种以上的特异性抗体,但是每一个B细胞只分泌一种特异性抗体。要想获得大量的单一抗体,必须克隆单一的B淋巴细胞,形成细胞群。,1、请从以上文字资料中找出单克隆抗体的概念,用单个B淋巴细胞进行克隆,得到的细胞群能够分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体,这种抗体就叫做单克隆抗体。,2、怎样才能获得单克隆抗体?,提示1:仅用细胞培养技术可行吗?,提示2:我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的?,提示3:有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢?,如何大量生产单克隆抗体?,利用B淋巴细胞产生抗体的功能。 利用肿瘤细胞无限增殖的特性。 利用细胞融合的技术将两种细胞融合获
5、得具有B淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞。 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞。,(二)单克隆抗体的制备,整个制备过程为何要经过两次筛选?,第一次筛选:用特定的选择培养基筛选出多种杂交瘤细胞,第二次筛选(克隆化培养和抗体检测):筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。,如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养?,融合后的细胞经选择性培养基培养后,能存活的细胞就是杂交瘤细胞。但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞,通常用“有限稀释法”来选择。将杂交瘤细胞稀释,用多孔细胞培养板培养,使每孔细胞不超过一个,通过培养让其增殖。然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体(常用酶联免疫吸附试验法),那些上清
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 动物 细胞 工程
链接地址:https://www.31doc.com/p-2987449.html