《第6章微生物学.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《第6章微生物学.ppt(34页珍藏版)》请在三一文库上搜索。
1、1,第六章 微生物的分布、消毒与灭菌,2,了解微生物在自然界及人体内的分布 掌握灭菌、消毒、防腐、无菌、大肠菌群、正常菌群的概念 掌握高压蒸汽灭菌法的原理、操作、用途、注意事项;熟悉其他物理灭菌法(UV、干热法、过滤法等) 掌握化学消毒剂的作用机制,了解常用消毒剂的种类和用途,本 章 要 求,3,第一节 微生物的分布,一、在自然界的分布 (一)水中的微生物 细菌、真菌、病毒等 判断水的污染程度的方法以测定水中细菌总数和大肠菌群数为指标 大肠菌群:一群在37、24h能发酵乳糖产酸产气,需氧或兼性厌氧的G- 我国饮用水卫生标准:1ml水中细菌总数不超过100个,1L水中大肠菌群数少于3个 水有自净
2、作用。判断自净效果用细菌为指标,4,1、P(细菌每小时减少的百分率):1h内2个检测点之间细菌数减少的比例 2、k(细菌死亡速率常数) 其中N:上游检测站1ml水中的菌数 Nt:下游检测站1ml水中的菌数 t:水自上游检测站流至下游检测站的时间,5,(二)土壤中的微生物 条件:营养,pH,T,水 分布:地面下1030cm,细菌多于放线菌、真菌 (三)空气中的微生物 条件:缺乏营养、水,有辐射 分布:近地面空气污染严重,随高度上升数量下降。微生物的量随季节变化(夏季多些);室内微生物的量与空气的流通有关,6,二、微生物在人体的分布 皮肤以及与外界相通的腔道中均有不同种类的微生物 1、正常菌群:正
3、常存在于人体外表和同外界相通的肠道、呼吸道等腔道中,人体免疫功能正常时,对宿主无害,有些还有利的微生物,7,人体常见的正常菌群,8,正常菌群的生理作用 1、生物拮抗作用: 对外原致病菌的侵入有拮抗和防御作用,保护宿主 2、刺激免疫应答: 具有免疫原性,有促分裂和佐剂的作用,是机体抗感染免 疫的重要组成部分 3、合成维生素: 如生物素、叶酸、B12、K 4、促进代谢: 参与糖、蛋白质、脂肪的代谢,促进消化吸收,9,2、菌群失调症: 由于正常菌群中各菌比例失调而产生的临床症状 引起菌群失调的原因: 机体免疫力下降:慢性病人 位置改变:E.coli从肠道到腹腔或泌尿生殖道 长期使用抗菌药物:广谱抗生
4、素,10,第二节 消毒与灭菌,对有害微生物的控制方法:消毒和灭菌 基本概念:,Disinfection,杀死物体表面上的病原微生物,达到控制微生物传染 的方法,并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物,灭菌:,Sterilization,杀灭物体上所有微生物的方法。,无菌:,Asepsis,不存在活菌的意思。,防腐:,Antisepsis,防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。,消毒:,11,热力灭菌法,一、物理消毒灭菌法,利用高温使微生物的蛋白质及核酸变性、破坏,杀灭細菌,焚烧-最彻底的灭菌方法 eg:衣物、动植物尸体,灼烧-直接用火焰灭菌方法 eg:接种环、针,干烤-加热160-180 2小时
5、 eg:玻璃器皿、金属制品、药品,干热灭菌法,消毒与灭菌的方法:物理、化学、生物法,热力、辐射、过滤等,12,干烤法注意事项: 1、洗净后再干烤,防止污物碳化 2、玻璃器皿洗净、干燥后再灭菌,T40时开烤箱,防止炸裂12 3、物品包装不宜太大,所放物品不宜太多(2/3), 以利于空气对流 4、中途不能打开添加物品 5、t计算从T达到时开始,13,湿热灭菌法,高压蒸汽灭菌法,最有效的灭菌方法 121 20-30 min,煮沸消毒法,水煮100 5 min(繁殖体)2 h(芽胞),流通蒸汽消毒法,巴氏消毒法,间歇蒸汽灭菌法,水蒸汽100 1530 min(繁殖体),反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌,较
6、低的温度(6163 30min or72 1530s)杀灭致病菌,适用对象:耐高温的物品,原理:饱和蒸气压与T成正比,注意事项:加水适量;物品摆放疏松;排尽冷空气;计时时间;压力降至0后,方可开盖,用于清洗玻璃器皿,食品、食具、不耐高温的物品,不耐热的含糖、血清、牛奶等的培养基,14,湿热灭菌与干热灭菌的比较,同一温度下,湿热灭菌比干热灭菌效果好,原 因,1、有水的环境中细菌菌体蛋白较易变性,2、湿热的蒸汽穿透力比干热强,3、湿热的蒸汽有潜热,15,辐射杀菌法,紫外线(UV),杀菌机理:,波长200300m的紫外线具有杀菌作用,干扰DNA的复制与转录(形成TT二聚体),紫外线穿透力较弱,不耐热
7、物品的表面消毒,特 点:,应用范围:,空气消毒 手术室、传染病房、细菌实验室,原理:利用电磁波杀死微生物,包括:微波、UV、X射线、射线,16,影响因素:光源的强度;与被照物的距离;照射t,湿度等 一般无菌室内用30W,30min,可杀死空气中的微生物 注意:UV的光复活作用,17,过滤除菌 原 理:用致密的过滤材料滤去液体或气体中的微生物, 但不能杀死微生物 常用介质:孔径0.220.45um的硝酸纤维素滤膜、醋酸纤维 素滤膜、玻璃纤维、棉花等 适用对象:不耐热,不能用化学方法除菌的液体、气体 eg:抗生素、血清、酶、生产中的无菌空气 缺 点:无法滤去病毒、支原体等比细菌小的微生物,18,滤
8、菌过程,19,低温:主要抑制微生物的生长繁殖 常用于菌种保藏eg:4、-70 、-20 其他物理方法 1、超声波 频率高于2万赫兹的超声波,可使细胞壁破裂, 是细胞破碎的常用方法 2、干燥 使细胞脱水和胞内盐浓度升高而死亡 用于食品、药品保存,抑制微生物的生长,20,二、化学方法,化学药品,消毒剂:表面,防腐剂:抑制,灭菌剂:无活菌,针对的对象不同、使用的浓度不同,21,(一)常用的消毒剂 1、醇类 1)乙醇 用于皮肤、器具的消毒(对芽孢效果不好) 机制:含水,极性与细胞膜接近,溶解脂质,可迅速透过细胞膜,使蛋白质变性(70 (w/w)效果好) 2)苯氧乙醇 无色油状液体,微溶于水 对铜绿假单
9、胞菌有较强的杀灭作用,22,2、醛类 原理:破坏蛋白质的氢键或氨基 1)甲醛:对芽孢、菌体、病毒、真菌均有杀灭作用 浓 度:10的甲醛加热熏蒸 适用对象:对密闭容器或房间内的物品、空气进行消毒,不适于食品、药品存放地空气的消毒 2)戊二醛 对芽孢、菌体、病毒、真菌均有杀灭作用 浓 度:2(pH8.0左右)有强杀菌作用 适用对象:精密仪器、医疗器械、实验室消毒,23,3、卤素类 原理:有氧化性,使蛋白质变性、酶失活,膜破坏 1)Cl2 适用对象:自来水消毒 2)漂白粉(Ca(ClO)2+NaClO) 5%10%用于手、家具消毒。芽孢无效 3)I2及含I2消毒剂(2) 用于皮肤粘膜、创面的消毒,C
10、l2+H2O HClO,24,4、酚类 原理:蛋白质变性,损伤细胞膜 1)苯酚(石炭酸) 浓 度:35 适用对象:地面、家具、器皿的消毒,因其毒性,现用于评价其他消毒剂的杀菌强度 2)煤酚皂溶液(来苏儿):甲醛和肥皂水的混合液15用于家具、地板、墙面消毒,25,5、烷化剂气体消毒剂 环氧乙烷(第二代消毒剂) 原 理:与蛋白质、核酸中的-NH2、-OH、-COOH、-SH反应,使蛋白质和核酸结构改变杀菌 适用对象:纸张、木材、皮草、生物制品、医药制剂等,26,6、氧化剂类 原理:氧化蛋白质的活性基团,使蛋白质变性 1)H2O2:3的用于伤口及口腔粘膜消毒,11.5用于漱口,可治疗和预防口腔炎、咽
11、炎 2)过氧乙酸 0.20.5%用于皮肤、玻璃、纤维等消毒 3)臭氧O3强氧化剂 用于水、空气、设备消毒 4)KMnO4强氧化剂 0.1%的KMnO4用于皮肤,水果、蔬菜的消毒,27,7、季铵盐类 原理:是阳离子表面活性剂(正电),改变细胞膜的渗透而引起菌体破裂,同时使蛋白质变性。0.050.1%的新洁尔灭用于皮肤、粘膜、手术器械的消毒,28,8、其他消毒剂 甲基紫碱性染料,带正电,干扰细胞代谢 重金属汞与蛋白质的-SH结合,使之变性AgNO3使蛋白质变性,用于皮肤、新生儿滴眼睛,29,(二)化学消毒剂的作用原理 1、蛋白质变性 2、破坏细胞的表面结构 3、干扰和破坏酶的活性,影响细胞的新陈代谢,30,影响消毒剂作用的因素,消毒剂,细菌,环境,种类,浓度,作用时间,菌龄,种类,有机物,温度,酸碱度,31,常用消毒剂种类,32,各种消毒剂的应用,33,选择适当的消毒剂,低毒,价廉,低破坏,易贮藏,方便,有效,34,三、保持无菌状态 掌握无菌操作技术,
链接地址:https://www.31doc.com/p-2987518.html