实验六++植物抗氧化酶活性的测定.ppt
《实验六++植物抗氧化酶活性的测定.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《实验六++植物抗氧化酶活性的测定.ppt(14页珍藏版)》请在三一文库上搜索。
1、实验六 植物抗氧化酶活性的测定,背 景,“控制与被控制”理论,抗氧化酶与植物抗逆性关系,Journal of Experimental Botany, 2009,60(2):377390,李忠光,2009.10,POD,一、实验原理,Peroxidase, POD,(ROS,H2O2),PPO,Polyphennol oxidase, PPO,抗氧化酶动力学曲线,植物抗氧化酶提取和测定参考文献,二、实验方法,1、提取:分别取0.5 g实验材料加入少许石英砂和3 ml提取液(50mmol/L PBS, pH5.8,内含0.mmol/ LEDTA, 1%PVP) 充分研磨 转入离心管中用2 ml提
2、取液洗研钵 5000 rpm离心10 min 上清液定容至5 ml 用于测定POD和PPO酶活性或分装后转至-20或-80保存。,2、POD测定:取POD反应混合液(10 mmol/L愈创木酚,5 mmol/L H2O2,用PBS溶解)2.90 ml,25 水浴5 min,加入酶液100 ml(空白调零用提取液取代),立即记时,摇匀,读出反应30 s和3 min时的A470。用计算POD活性。 3、PPO测定:取PPO反应混合液( 20 mmol/L邻苯二酚,用PBS溶解)2.8 ml, 25 水浴5 min,加入酶液0.2 ml(空白调零用提取液取代),立即记时,摇匀,读出反应 30 s和2 min时的A410。以每分钟A值变化0.01所需要的酶液的量为一个活力单位(U),则:,4、计算,5、思考题 5.1 简述植物POD和PPO的生理意义。 5.2在论述呼吸代谢多途径及其生理意义。,
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 实验 植物 氧化酶 活性 测定
链接地址:https://www.31doc.com/p-2989425.html