微生物指标及微生物检验.ppt
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1、生活饮用水卫生标准GB5749-2006 生活饮用水标准检验方法GB5750-2006 微生物指标及微生物检验的介绍 广东省CDC微生物检验所 严纪文,我国旧的饮用水水质标准是1985年颁布实施的GB5749-85,标准检验方法为GB5750-85。该标准与国外的饮用水标准相比,主要差别在于微生物指标项目少,缺少有机物和消毒副产物指标。微生物指标只有细菌总数和总大肠菌群2项,不能确切的评价水质的卫生状况。 修订后的标准,微生物学指标增加为6项:菌落总数、总大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希氏菌、贾第鞭毛虫和隐孢子虫。 同时在资料性附件中增加了肠球菌和产气荚膜梭状芽胞杆菌。,水质常规指标及限值,水
2、质非常规指标及限值,小型集中式供水和分散式供水部分水质指标及限值,生活饮用水水质参考指标及限值,一、菌落总数,二、总大肠菌群(埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属、肠杆菌属) 除多管发酵法、滤膜法外,增加了酶底物检测方法 多管发酵法,滤膜法,酶底物法 酶底物法定义:总大肠菌群酶底物法是指在选择性培养基上能产生-半乳糖苷酶的细菌群组,该细菌群组能分解色原底物释放出色原体使培养基呈现颜色变化,以此技术来检测水中总大肠菌群的方法。 培养基:MMO-MUG培养基(Minimal Medium ONPG-MUG)。 本方法可分为定性和定量。 定量法:10管法、51孔定量法 培养条件: 361 24h
3、能产生-半乳糖苷酶的细菌群组分解ONPG使培养基呈黄色 酶底物法的主要特点: 优点: 可同时判断水样中大肠菌群和大肠埃希氏菌 检测时间较短,只需18-24h,最长需要28h 无需确证试验 操作简单,对试验条件和人员要求低 缺点: 检测成本高,总大肠菌群三种方法的比较,三、耐热大肠菌群(埃希氏菌属、耐热克雷伯氏菌) 检测方法:多管发酵法、滤膜法,四、大肠埃希氏菌 检测方法:多管发酵法、滤膜法、酶底物法 大肠埃希氏菌多管发酵法定义:大肠埃希氏菌是指多管发酵法总大肠菌群阳性,在含有荧光底物的培养基上44.5培养24h产生-葡萄糖酫酸酶,分解荧光底物释放出荧光产物,使培养基在紫外光下产生特征性荧光的细
4、菌,以此来检测水中大肠埃希氏菌的方法。 培养基:EC-MUG(4-甲基伞形酮-D-葡萄糖酫酸苷)。 培养条件:44.50.5 培养242h。紫外灯:波长366nm,功率6W 大肠杆菌能产生-葡萄糖酫酸酶分解MUG,菌落在366nm紫外光下产生蓝色荧光 滤膜法定义:用滤膜法检测水样后,将总大肠菌群阳性的滤膜 在含有荧光底物的培养基上培养,能产生-葡萄糖酫酸酶分解荧光底物释放出荧光产物,使菌落能够在紫外光下产生特征性荧光,以此来检测水中大肠埃希氏菌的方法。 培养基:NA-MUG 培养条件:361 培养4h 紫外灯:波长366nm,功率6W,酶底物法定义:在选择培养基上能产生-半乳糖苷酶分解色原底物
5、释放出色原体使培养基呈现颜色变化,并能产生-葡萄糖酫酸酶分解荧光底物释放出荧光产物,使菌落能够在紫外光下产生特征性荧光,以此技术来检测大肠埃希氏菌的方法为大肠埃希氏菌酶底物法。 培养基:ONPG-MUG 结果判定:水样变黄色同时在366nm的紫外光下产生蓝色荧光为阳性。水样未变黄色而有蓝色荧光产生不能判定为阳性。,五、贾第鞭毛虫子和隐孢子虫 贾第鞭毛虫和隐孢子虫是一类寄生于人和动物体内的肠道原虫,可致人兽共患病。患此病的人和动物从粪便中排出大量的卵(孢)囊污染环境,在地面水和防护差的地下水及处理不良的自来水中都可检出卵(孢)囊。随着社会发展,优质供水势在必行。对一些潜在的危险因素加以限制很有必
6、要。在此基础上,新标准中增加了贾第鞭毛虫和隐孢子虫的检测方法。,Cryptosporidium 隐孢子虫 特点:单一细胞原生动物,约3-7m 。有微小隐孢子虫、 鼠隐孢子虫和贝氏隐孢子虫三种,寄生于人、牛等体内的主要为微小隐孢子虫(Cparvum)。 宿主:人类、鸟类、鼠类、爬行类、鱼类 感染源:隐孢子虫主要寄生在被感染的动物体肠道内,卵囊通过粪便排出体外污染环境。 易感人群:免疫缺陷者(如爱滋患者)、儿童、老人、医务人员等 传播方式:以粪-口,手-口途径为主,污染的水源和空气均可传播。,Cryptosporidium 隐孢子虫生活周期,子孢子,滋养体,型裂殖体,裂殖子,型裂殖体,雌、雄配子体
7、,合子,成熟卵囊,裂殖子,Cryptosporidium 隐孢子虫(染色后荧光显微镜下),特点:单一细胞原生动物,大小约10-15m,含4对鞭毛和双核。人、动物共染。寄生人体内为蓝氏贾第鞭毛虫 Giardia lamblia。在不同温度和纬度地区均能发现该病;发达国家感染率为2-5%;发展中国家感染率可高达到20-30%。 可引起急慢性腹泻、肠吸收紊乱及延缓儿童的生长发育。 传染源:被孢囊污染的水和食物;往往一人带孢囊全家感染; 传播:通过被污染的水和食物经口传播;接触(往往一人带孢囊全家感染);娱乐用水;旅游。 易感人群:3岁以内婴儿;免疫功能受损害者;旅游者。,Giardia 贾第鞭毛虫,
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