复件微生物检测第5章1.ppt
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1、第五章 病原菌的检验,主要的食物导致的疾病,肠道杆菌,正常菌群,致病菌,埃希菌属(EC),变形杆菌属,克雷伯菌属,肠杆菌属,沙雷菌属,枸橼酸菌属,肠外感染,肠外感染,食物中毒,医院感染,致病性大肠埃希菌属(EC),EPEC、ETEC,EIEC、EHEC,EAggEC,肠内感染,食物中毒,志贺菌属,A群痢疾志贺菌,B群福氏志贺菌,C群鲍氏志贺菌,D群宋内志贺菌,急性菌痢,慢性菌痢,中毒性菌痢,沙门菌属,肠道沙门菌,邦戈沙门菌,伤寒沙门菌,甲型副伤寒沙门菌,乙型副伤寒沙门菌,丙型副伤寒沙门菌,肠热症,鼠伤寒沙门菌,猪霍乱沙门菌,肠炎沙门菌,食物中毒,败血症,耶尔森菌属,小肠结肠炎耶尔森菌,鼠疫耶尔
2、森菌,食物中毒,鼠疫,大肠埃希菌是肠杆菌科细菌中,从各种温血动物的肠道中检出率最高的菌种。 最早是由埃希( Escherich)1895年在粪便中发现而命名,又称大肠杆菌(coli),在鱼类、两栖类、昆虫的肠道中也存在。 从新生儿开始就终生存在,与人体是共栖关系,人体供给它生长条件,而这类菌的代谢产物能抑制肠道内其它分解蛋白质的细菌的生长,减少蛋白质分解产物对人体的危害,并能合成VB,VK,供人体吸收利用。,第一节 大肠埃希菌(Escherichia coli),是一种条件致病菌。当机体免疫力降低时,或侵入肠外组织,可引起肠道外感染,如肾炎、胆囊炎、胆结石、膀胱炎、肺炎、败血症等。 有些菌株致
3、病性强,能直接导致肠道感染。 药品、食品中有无大肠埃希菌及数量多少,可判断药品、食品是否被粪便污染及污染的程度。如果检出该菌,表明被粪便污染,且有可能污染伤寒、痢疾或其他肠道致病菌,1.形态与染色 是两端钝圆的革兰氏阴性短小杆菌,有时近球形 (1.1-1.5)m (2.0-6.0)m 无芽孢,以周身边毛运动或不运动,某些菌株具有荚膜。,一、大肠埃希菌的生物学特性,2.培养特性,最适温度37 ,可在15-46 生长. 最适pH7.4-7.6。 需氧或兼性厌氧。 在EMB平板上,典型菌落呈紫黑色,有金属光泽; 在药品中分离到的菌株也有菌落呈粉色,无金属光泽,中心紫色,扁平,低度突起,光滑湿润。 致
4、病菌的菌落无色,透明或半透明。但由于药物的影响,有可能改变,应挑取多种菌落进行鉴定。,3.生化特性,能迅速分解葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇等多种糖类,产酸产气。产生的丙酮酸可分解为乳酸、乙酸、甲酸。甲酸又被分解为二氧化碳和氢气。 不分解尿素 IMViC 反应+-,4.抗原结构,菌体抗原(O抗原):是细胞壁成分。耐热、121 不破坏,有171种血清型。 表面抗原(K抗原):是存在于荚膜、被膜体表部分的抗原。不能被O血清所凝集,具有O不凝集性。 鞭毛抗原(H抗原):由不耐热的蛋白质组成,60 被破坏。共有56个血清型。 抗原式为:O111K58H12,5.抵抗力 对热的抵抗力较强 在自然界中可存活
5、数周至数月 对磺胺类、四环类等抗生素敏感 对煌绿染料比沙门氏菌敏感 耐胆盐 对漂白粉、酚、醛等敏感,6.致病力 侵袭力:K抗原、菌毛 内毒素:类脂A 肠毒素:肠产毒型大肠杆菌类似于霍乱弧菌。产生两类肠毒素。均在质粒中编码。,致病性大肠埃希菌主要分为五类:,肠产毒型(enterotoxigenic E.coli ,ETEC) 肠致病型 (enteropathogenic E.coli ,EPEC) 肠侵袭型 (enteroivasive E.coli ,EIEC) 肠出血型 (enterohemorrhagic E.coli ,EHEC):又称Vero毒素大肠埃希菌(Verotoxigenic
6、E.coli ,VTEC ),O157:H 肠粘附型(enteroadherent, E.coli ,EAEC):肠聚集型,引起腹泻的大肠埃希菌种类及主要特征,大肠杆菌O157,1982年在美国的一次汉堡包食物中毒事件中首次被发现。 96年在日本流行。 寄生在牛、羊等动物的肠道内以及土壤和污水中,中毒者往往都伴有剧烈的腹痛、高烧和血痢,病情严重者会危及生命。 美国威斯康星大学绘制出其完整基因组图谱。发现了1387个特有的新基因。 具有一些被称为“DNA岛”的特殊片断,像岛屿一样分散在整个基因组中。其中一些“DNA岛”里包含有与致病过程有关的基因,能够控制产生毒素,或帮助O157更牢固地附着在肠
7、胃中。,大肠杆菌O26,英2年死83人, 可导致血液感染及尿道感染,年纪较大或患有其他严重疾病的感染人士很可能出现其他并发症。 导致血液感染的大肠杆菌个案,在过去10年来已上升1倍; 抗药性的个案从2001年的2%上升至2004年的6%。,二、大肠埃希菌检查法,供试品,供试液,胆盐乳糖增菌,MacC EMB,纯培养,乳糖发酵,IMViC,报告,革兰氏阴性无芽孢杆菌 乳糖产酸产气或产酸不产气 IMViC试验为+-或-+- 判为检出大肠埃希菌,IMViC,靛基质试验(indol test): 取培养物接种于胨水培养基,培养24-48h,沿管壁加入柯凡克试剂数滴,液面呈玫瑰红色为阳性. 原理: 含有
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