课件动物细胞工程3.ppt
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1、二、动物细胞融合与单克隆抗体,细胞融合是正常的生命活动,两个细胞正在融合,受精作用,人工条件下,如何促成动物体细胞的融合?,(一)动物细胞融合,细胞融合诱导剂: 灭活的病毒、 (其它物理化学手段同植物体细胞杂交),应用: 主要用于制备单克隆抗体,灭活病毒诱导细胞融合的原理:,病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞互相凝聚,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。 灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但并不破坏这些病原体的抗原结构。,主要用于制备,单克隆抗体,获得杂种植株,主要用途,物理、化学方法,(同左),灭活的病毒,物理(离
2、心、振动、电刺激),化学(聚乙二醇),诱导方法,细胞膜的流动性,细胞融合的原理,动物细胞融合,植物体细胞杂交,比较项目,植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较,如果患者想知道自己是否得了乙型肝炎,一般是先检查血液里是否有病毒的蛋白质,也就是病毒的抗原等,2,血清中的抗体,有时患者体内无乙肝病毒,但是用血清抗体进行检验时,会出现相应的免疫反应(即假阳性)。,如何得到单一的抗体A或B?,人们获得抗体的传统方法是什么?,细胞融合、细胞重组、杂交瘤技术,细胞融合 将两个或多个细胞结合形成一个细胞(杂交细胞)。,细胞重组 把不同细胞的部件重新组装,包括核移植、叶绿体移植、核糖体重建及线粒体装配等。 杂交瘤技
3、术 通过细胞融合产生特异杂交瘤细胞,用于生产单克隆抗体。,单克隆抗体制备的原理及流程,(二)单克隆抗体,1)注射特定抗原,4)筛选杂交瘤细胞,3)杂交瘤细胞特点,1 制备过程:,5)细胞培养(克隆),6)提取单克隆抗体,2 单克隆抗体的优点:,特异性强、灵敏度高,2)效应B细胞+骨髓瘤细胞杂交瘤细胞,1)作为体外诊断试剂,3 应用,结合药物的单克隆抗体,2)运载药物 如制备生物导弹,鼠源性的,嵌合的,用于治疗是很受限制的。原因是:,人源性的,对鼠源化抗体进行改造-蛋白质工程,直接生产人源化抗体-基因工程,Monoclonal Antibodies,Khler 和 Milstein 75年建立的
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