第二章植物化学成分的研究程序gai.ppt
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1、第二章 植物化学成分的研究程序,有效成分化学结构的研究方法,文献调研、成分预实验、提取,Content,研究对象的确定 文献资料查阅和信息收集 植物化学成分的预实验 植物化学成分的提取、分离、纯化和结构鉴定 植物化学成分的结构改造和构效关系,第一节 研究对象的确定,依据: 古代医学典籍、民族医学资料或民间经验 当地植物样品随机抽取 植物化学分类学知识 植物化学成分信息 偶然的信息和意外的发现 检索工具(internet),第二节 文献资料查阅和信息收集,主要专著和教科书 主要工具书和检索工具 期刊杂志 网上查阅文献资料(文献查阅网站、专利) 其他有用信息,第三节 植物化学成分的预实验,在分离活
2、性成分前,先用几种不同极性的溶剂分别进行提取,进行生物活性筛选,确定哪一个溶剂提取部位有效后,再对该部位进行各类化学成分的预试验,从而缩小预实验的范围。,预试验的要求: 1. 预试验之前,了解植物的产地、生物学特性和分类学鉴定,以及借助外观、色、嗅、味等对植物样品所含成分作初步观察,以提供进一步检查的参考。 如:甜味 可能含糖类 苷类 味酸 可能含柠檬酸 苹果酸等羟基酸 味苦 可能含有生物碱 苷类 苦味质 2. 简便快捷且尽量正确 一般试管试验 也可用纸片法 纸色谱或薄层色谱,预试验主要分两类: 一、单向预试法 仅为了测定某一特定成分。主要用水提取液、醇提取液和石油醚提取液来进行某类成分的检验
3、。 二、系统预试法 对植物中的各类成分进行比较全面的定性检查。常用递增极性的方法,依次用石油醚、乙醚、乙醇和水等进行抽提。,植物的化学成分较复杂,有些成分是植物所共有的,如纤维素、蛋白质、油脂、淀粉、糖类、色素等。有些成分仅是某些植物所特有的,如生物碱类、甙类、挥发油、有机酸、鞣质等。,冬虫夏草,各类化学成分均具有一定的特性,一般可由植物的外观、色、嗅、味等作为初步检查判断的手段之一。 如植物样品折断后,断面不油点或挤压后有油迹者,多含油脂或挥发油; 有粉层的多含淀粉、糖类; 嗅之有特殊气味者,大多含有挥发油、香豆精、内酯; 有甜味者多含糖类;味苦者大多含生物碱、甙类、苦味质;味酸者含有有机酸
4、;味涩者多含有鞣质等等。,一、 预试溶液的制备 1、 水提取液糖、多糖、有机酸、皂苷、酚类、鞣质、氨基酸、多肽、蛋白质 2、 乙醇提取液酚类、鞣质、有机酸、香豆素、强心苷、黄酮、蒽醌、甾体 3、 5%HCl-乙醇提取液生物碱 4、 石油醚提取液甾体、萜类、脂肪油,灵芝,预试验的注意事项,1根据各种成分的不同性质,选用适宜的溶剂提取,以保证有效成分能被提取出来。 2试验提取液的浓度应足以达到各该反应的灵敏度。 3试验提取液的酸碱度(pH)值应不致影响鉴别反应中所需要的pH值。相差甚大时应事先调节。 4提取液较深时,容易影响观察鉴别反应的效果,此时可适当稀释,或进一步提纯。,5鉴别反应时应注意防止
5、多类成分的相互干扰,以免出现假阳性,或颜色不正等情况。最好在化学鉴别的同时,做空白试验和对照试验(用已知含某类成分的中草药或纯品做阳性对照)。 6在鉴别试验中,如果某一类成分的几个鉴别反应结果不一致时(即有的呈阳性反应,有的呈阴性)则应进行全面分析。首先应注意呈阳性反应的试验是否属于该类成分的专一反应,否则应检查其他类成分能否产生该反应,从多方面加以判断。但也应注意,某些反应只能对某一类成分中的某个化学基团呈性反应,如检查黄酮类的盐酸镁粉试验,它只对黄酮类中的羟基黄酮类(黄酮醇类)反应明显,其余类的黄酮类则不甚明显,但也不能轻易否定不是黄酮类,为了避免孤立和片面的下结论,一定要全面考虑综合分析
6、。,二、鉴别方法 1、 氨基酸、多肽、蛋白质,(1)加热沉淀试验:加热煮沸 混浊或沉淀 (蛋白质) +5%H2SO4(不加热)混浊或沉淀 (2)双缩脲反应:+40%NaOH,1%CuSO4 紫色、红色或紫红色(多肽、蛋白质) (3)茚三酮反应:+0.2%茚三酮试液 蓝或蓝紫色(氨基酸、多肽、蛋白质) (4)吲哚醌反应:+吲哚醌试液 各种颜色(氨基酸) (5)Millon反应:+Hg,H2NO2 红色(蛋白质分子中有酪氨酸组成) (6)Hopkins-Cole反应:+乙醛酸,浓硫酸 各色(蛋白质分子中有色氨酸组成) (7)氨基酸的薄层层析检查: 吸附剂硅胶 展开剂 n-BuOH,n-BuOH:H
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