第七章微生物遗传变异本科.ppt
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1、第七章 微生物的遗传变异 Microbial Inheritance and Variation,本章目录,第一节 微生物的突变 第二节 细菌的基因重组 第三节 真核微生物的基因重组 第四节 微生物遗传变异知识的应用 第五节 菌种的衰退、复壮和保藏,Inheritance 遗传:亲代与子代性状相似的现象,variation变异:亲代与子代、子代间不同个体不完全相同,遗传(inheritance)和变异(variation)是生命的最本质特性之一,遗传保证了物种的存在和延续,而变异推动了物种的进化和发展,微生物是遗传学研究中的好材料:,微生物细胞结构简单,营养体一般为单倍体, 方便建立纯系。 繁
2、殖速度快,能在短时间内获得较多的代数和众多 的子代。 易于人工培养。 对环境因素的作用敏感,易于获得各类突变株, 操作性强。,第一节 微生物的突变,一 突变体主要类型 二 基因突变的特点 三 基因突变的机制 四 紫外线对DNA的损伤及其修复,一个基因内部遗传结构或DNA序列的任何改变、可遗传、自发或诱变产生 Mutation:是指遗传物质发生数量或结构变化的现象。,Gene Mutation基因突变,狭义:点突变 广义:基因突变和染色体畸变,野生型(原始性状):未发生突变的原来的菌株。,基因突变,突变型(新性状):发生了突变的菌株,一 突变体主要类型,基因突变的类型极为多样。人们可从不同的角度
3、进行分类,并给以不同的名称。按突变体表型特征,可把突变分成以下几种类型: (一)形态突变型 指突变引起细胞形态变化或引起菌落形态改变。 如细菌的鞭毛、芽孢或荚膜的有无,菌落的大小、外形的光滑(S型)、粗糙(R型)和颜色等的变异;放线菌或真菌产孢子的多少、外形或颜色的变异等。 (二)生化突变型 指一类发生代谢途径变异但形态没有明显变化的突变型。该突变型可进一步细分为营养缺陷型、抗性突变型和抗原突变型3种类型。,营养缺陷型 auxotroph 指由于基因突变引起代谢过程中失去合成某种酶的能力,而无法合成某种必须的生长物质的突变型,只有加入相应的生长物质才能正常生长的变异菌株。 抗性突变型 是一类能
4、抵抗有害理化因素的突变型。据其抵抗的对象可分抗药性、抗紫外线或抗噬菌体等突变类型。它在遗传学基本理论的研究中十分有用,常作为选择性标记菌种。 发酵突变型 指从能够利用到不能够利用某种营养物质的突变型。 4 毒力突变型 指突变后致病力增强或减弱的突变型。 5 产量突变型 指产生某种代谢产物的能力增强或减弱的突变型。,(三)条件致死突变型-某菌株或病毒经基因突变后,在某种条件下可正常生长、繁殖并实现其表型,而在另一条件下却无法生长、繁殖的突变类型。温度敏感突变株(temperature-sensitive mutant, Ts突变株)是一类典型的条件致死突变株。例如,E.coli的某些菌株可在37
5、下正常生长,却不能在42下生长等。某些T4噬菌体突变株在25下有感染力, 而在37下则失去感染力等。产生Ts突变的原因是突变引起了某些重要蛋白质的结构和功能改变,以致在某特定的温度下能发挥其功能,而在另一温度(一般为较高温度)下则该功能丧失。 (四)致死突变型-由于基因突变而导致个体死亡的突变型。,1、随机性 randomness 自发性和不对应性 2、稀有性 突变率很低,很低稳定,一般在10-610-9之间。 3、独立性 independence 即在某一群体中既可能发生抗青霉素的突变型,也可能发生抗链霉素的突变型而且还可以发生不属抗药性的突变型。 4、可逆性 reversibility 任
6、何性状的突变型都具可逆性,都可恢复为原来的野生型,回复突变率同样很低。,二 基因突变的特点,5、稳定性 stability 突变后产生的变异性是稳定的,可遗传的。 6 可诱变性 自发突变的频率可因诱变剂的影响而大大提高。,基因突变随机性的实验证明,三个经典实验 变量实验 涂布实验 影印实验,证明突变是自发产生的,并且突变的性状与引起突变的原因间无直接对应关系。,野生型 (原始性状),突变型(适应环境的新性状),变量实验(fluctuation analysis) Salvador Luria and Max Delbruck(1943),Salvador Luria,Max Delbruck,
7、The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1969,变量实验(fluctuation analysis),Newcombe的涂布实验(1949),影印实验(replica plating ) Joshua Lederberg and Esther Lederberg(1952),Joshua Lederberg,J. Lederberg is awarded the Noble Prize in Medicine and Physiology in 1958,三 基因突变的机制 mechanism of gene mutation,碱基置换可由互变异构
8、和化学诱变引起。,(一)Base substitution 碱基置换,1 互变异构,通常以氨基式出现的腺嘌呤(A)与胸腺嘧啶(T)配对,当DNA复制到这一位置瞬间时转变为稀有的亚氨基式(A)(互变异构现象,tautoomerism),就会与胞嘧啶(C)碱基配对,这意味着一个胞嘧啶(C)插入DNA,代替了胸腺密啶(T)。假如在下一次复制周期前不被修复A-T碱基对将变为C-G碱基对。,碱基置换引起的突变,2 化学诱变剂引起的碱基对置换,碱基类似物(base analogs) 如5-溴尿嘧啶和2-氨基嘌呤。的结构与相似,当被掺入DNA分子本身对细菌无影响,但5-BU有酮式和烯醇式的互变且出现烯醇式的
9、的机会多,当5-BU为烯醇式时,与G配对而不与A配对。这时增加了转换为的频率。,指分子中添加或缺失少数几个碱基对,而造成其后面全部遗传密码发生转录和翻译错误的基因突变。 密码子全部移动,导致合成不正常蛋白质,引起性状改变。,GGG AAA UUU AAA CCC 甘 赖 苯丙 赖 脯 AGG GAA AUU UAA ACC C 精 谷 异亮 终止,(二)移码突变,由于某些理化因素的作用造成分子的大损伤所引起的突变。包括染色体的缺失、重复、插入、易位、倒位。,(三)染色体畸变,嘧啶,嘧啶二聚体,UV,嘧啶二聚体,嘧啶,光解酶,四、紫外线对DNA的损伤及其修复 1、光复活作用,2、切除修复,第二节
10、 细菌的基因重组,一 转化 二 转导 三 接合 四 原生质体融合,基因重组是两个不同性状的个体细胞,其中一个细胞内的基因转移到另一个细胞内并通过基因重新组合使之发生遗传变异的过程。,供体菌,受体菌,DNA片段,1928年,Griffith发现肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)的转化现象,目前已知有二十多个种的细菌具有自然转化的能力进行自然转化。,Transformation转化是受体菌直接吸收来自供体菌的DNA片段,通过变换将其整合到自己的基因组中, 从而获得供体菌部分遗传性状的现象。,一 Transformation 转化,转化需要二方面必要的条件 1、建立了感受
11、态的受体细胞 感受态细胞:具有摄取外源DNA能力的细胞 自然感受态的出现是细胞一定生长阶段的生理特性,受细菌 自身的基因控制; 人工感受态则是通过人为诱导的方法,使细胞具有摄取DNA的 能力,或人为地将DNA导入细胞内 2、外源游离DNA分子(转化因子),转化过程(革兰氏阳性菌的转化模型),a)对核酸酶敏感; b)不需要活的DNA供体细胞; c)转化是否成功及转化效率的高低主要取决于转化供体菌株和转化受体菌株之间的亲源关系; d)通常情况下质粒的自然转化效率要低得多,转化过程的特点:,由噬菌体介导的细菌细胞间进行遗传交换的一种方式 一个细胞的DNA通过病毒载体的感染转移到另一个细胞中,细菌转导
12、的类型:,普遍转导,局限转导,完全普遍转导 流产普遍转导,低频转导 高频转导,局限转导与普遍转导的主要区别,溶源转变,二 转导(transduction),噬菌体可以转导供体菌染色体的任何部分到受体细胞中的转导过程,普遍性转导的三种后果:,外源DNA被降解,转导失败。,进入受体的外源DNA通过与细胞染色体的重组交换 而形成稳定的转导子,流产转导,普遍转导(generalized transduction),完全普遍转导,转导DNA不能进行整合、重组和复制,但其携带的基因可经过转录而得到表达。 因此群体中仅一个细胞含有DNA,而其它细胞只能得到其基因产物,在选择培养基平板上形成微小菌落,流产普遍
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