2013年 球菌5月 ppt课件.ppt
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1、 教学要求: 掌握:葡萄球菌的形态、染色、培养、分类、抗原结构、 金黄色葡萄球菌的致病物质、所致疾病、微生物学检查; 链球菌的形态、染色、致病物质及所致疾病;肺炎球菌的 形态、染色、培养、致病性;脑膜炎球菌的形态、染色、 致病性。淋球菌的形态、染色、致病性。 熟悉:葡萄球菌的抵抗力、凝固酶阴性葡萄球菌的致病性 ;链球菌的培养及分类、微生物学检查;甲型链球菌与肺 炎球菌的鉴别;脑膜炎球菌的培养、抵抗力、特异性预防 ;淋球菌的培养、抵抗力、脑膜炎球菌与淋球菌的鉴别。 了解:葡萄球菌的带菌及耐药问题;肺炎球菌的抗原结构 与分型;脑膜炎球菌与淋球菌的微生物学检查;化脓性球 菌感染的防治原则。 重点 1
2、.葡萄球菌、链球菌、脑膜炎球菌的致病性。 2. SPA 3.致病性葡萄球菌的特点。 4.链球菌的分类。 5.脑膜炎球菌的微生物学检查法。 难点 1.SPA的主要性质及应用。 2.球菌的区别。 球菌(coccus) 又称化脓性球菌 根据革兰染色性分为 G+ 球菌 葡萄球菌、链球菌(A群链球菌、肺 炎链球菌)、肠球菌 G- 球菌 脑膜炎球菌、淋球菌 概述 1三种G+菌形态与染色 (一)生物学性状 典型呈葡萄串状 链球菌 肺炎(链) 双球菌 肺炎链球菌荚膜,4200 倍 链球菌,金属镀膜 ,12000倍 。 两种G+菌标本中的形态与染色 (一)生物学性状 葡萄球菌培养特性 v易培养:普通琼脂平板三种
3、菌落 v血琼脂平板:金黄色葡萄球菌为完全透明溶血环 。 v 液体培养基:呈混浊生长 金葡:透明 溶血环 2链球菌培养特性 营养要求较高,在血琼 脂平板上生长良好。 v 不同种类的链球菌有不同的溶血现象, 且菌落多细小。 v 在液体培养基中易形成长链,呈絮状 沉淀。 乙链:乙型溶血(透明 溶血)(溶血) 溶 血 链球菌 葡萄球菌(staphylococcus) 最常见的化脓性细菌 2生化反应 v 触酶阳性。 u 致病菌能分解甘露醇,产酸不产气。(+ ) (一)生物学性状 4抗原结构 葡萄球菌A蛋白(staphylococal protein A, SPA ) 细胞壁表面的一种表面抗原。 意义:与
4、人及哺乳动物的IgGFc非特异结合 协同凝集试验 抗吞噬 SPASPA IgGIgG Fc receptorFc receptor PHAGOCYTEPHAGOCYTE BACTERIUMBACTERIUM (一)生物学性状 5 分类(三种葡萄球菌的主要性状) 性状 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌 色素 金黄色 白色 白色或柠檬色 凝固酶 + - - 甘露醇 + - - 溶血素 + - - 耐热核酸酶 + - - SPA + - - 致病性 强 弱或无 无 根据有无凝固酶分类 凝固酶阳性菌(coagulase positive staphylococcus ,CPS) 凝固酶阴性菌
5、(coagulase negitive staphylococcus ,CNS) (一)生物学性状 6抵抗力 无芽孢菌中抵抗力最强。 耐热 耐盐性强 对青霉素耐药率高 对龙胆紫敏感 (二)致病性 (1)血浆凝固酶(coagulase) 结合凝固酶 游离凝固酶 是金黄色葡萄球菌最重要的一种致病物质。 1致病物质:毒力因子为毒素和酶 Free coagulase: principle Rabbit/Humen sera factor + Coagulase fibrinogen fibrin (二)致病性 (2)葡萄球菌溶素(staphylolysin) 溶血素 (3)杀白细胞素(leukocid
6、n) (4)肠毒素(enterotoxin):食物中毒 某学校10名学生在学校附近小卖部购买香肠面包为早 餐,使用2小时后,先后出现低热、恶心、呕吐、腹 痛、腹泻、头晕、头疼等症状,呕吐较重。经抗感染 及补液和对症治疗后,病情迅速好转,所有患者于2 天痊愈,无死亡病例。采集剩余面包,应用ELISA技 术检测出经黄色葡萄球菌肠毒素。 思考题:1、引起本病的病因是什么?有什么依据? 2、通过此事件我们应吸取什么教训? (5)表皮剥脱毒素(exfoliative toxin, exfoliatin) :烫伤样皮肤综合症 (6)毒性休克综合征毒素1(toxic shock syndrome toxin
7、 TSST1): 毒性休克综合征 (7)其他酶类 (二)致病性 2.所致疾病 (1)侵袭性疾病 主要引起化脓性炎症。 皮肤软组织感染 多由金萄菌引起 内脏感染 主要由金黄色葡萄球菌引起。 全身感染 败血症、脓毒血症等。 主要由金黄色葡萄球菌引起。 (二)致病性 (2) 毒素性疾病 食物中毒 假膜性肠炎 即葡萄球菌性肠炎。 烫伤样综合症 由表皮剥脱毒素引起。 毒性休克综合征 主要由TSST1引起。 (三)免疫性 凝固酶阴性葡萄球菌( CNS ) 泌尿系感染 细菌性心内膜炎 败血症 防治原则 防 注意 消毒隔离 注意 个人卫生 防止 医源性感染 防止 耐药性产生 治 抗菌素 药敏试验 自身菌苗疗法
8、 链球菌属(streptococcus) 甲型溶血性链球菌和肺炎双球菌生化反应 甲型溶血性链球菌 肺炎链球菌(双球菌) 菊糖发酵实验 - +/- 胆汁溶菌实验 - + Bile-soluble Test(+) Bile-soluble Test(-) 荚膜 细胞壁 蛋白质 多糖 肽聚糖 细胞膜 细胞质 链球菌抗原结构 : (一) 生物学性状 5分类 (1)根据溶血现象分类 l甲型溶血性链球菌 l乙型溶血性链球菌 l丙型链球菌 分20个群, A群 致病菌 (溶血性链球菌或 化脓性链球菌) 根据蛋白抗原 进一步分类 M抗原与致病性有关 荚膜 细胞壁 蛋白质 多糖 肽聚糖 细胞膜 细胞质 (1)根据
9、抗原分类 : 根据抗原结构分类 A群主要为乙型溶血。 故致病性链球菌为A群乙型溶血性链球 菌,或溶血性链球菌,又称化浓性链球菌。 6抵抗力 较低,青霉素是首选药物。 (二) 致病性 1致病物质 : 1) 外毒素 (1)溶血毒素(streptolysin) SLO(streptolysin O): 链球菌溶血素O SLS(streptolysin S): 链球菌溶血素S SLO: 破坏白细胞 对心肌有急性毒性作用 抗原性强: SLO抗体(抗“O”抗体) (链球菌感染的患者多可查到 SLO抗体 ) (二) 致病性 (2)致热外毒素(pyrogenic exotoxin) 特点:致热作用 细胞毒作用
10、 增加动物对内毒素的敏感性 产生皮肤红疹 引起猩红热,曾称红疹毒素或猩红热毒素。 猩红热皮疹 (二) 致病性 2)侵袭性酶 (3)透明质酸酶 又名扩散因子。 (4)链激酶(streptokinase,SK) (5)链道酶(streptodornase,SD) 3)细胞壁成分: M蛋白: v 具有抗吞噬作用。 v 与心肌肌浆蛋白有共同抗原表位,故 与风湿性心肌炎有关。 LTA: 磷壁酸(teichoic acid) 革兰兰阳性菌的特殊组组分。 壁磷壁酸 磷壁酸 膜(脂)磷壁酸 磷壁酸是G+菌重要的菌体抗原,并 与细菌的粘附有关。 壁磷壁酸 膜磷壁 酸 (二) 致病性 2所致疾病 化脓性炎症 中毒
11、性疾病 变态反应性疾病 (三) 免疫性 ASO Test (Ab Neutralization test)ASO Test (Ab Neutralization test) 1 2 3 4(Ag-c) 5(NS-c) N.S (ml) 0.9 0.5 0.5 0.5 0.75 Pt.serum 0.1 0.5 0.5 - - (1:20) 0.5(discard) Dilution 1:200 1:400 1:800 - - SLO 0.25 0.25 0.25 0.25 - 37 Incubation 15min 1%R. Rbc 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 37 In
12、cubation 45min Result - - + + - 2.ASO Test (Ab Neutralization test)2.ASO Test (Ab Neutralization test) Principle Patient serum (AGN: Acute Glomerulonephritis) Acute Rheumatic fever (ARF) 37 15 + SLO 37 45 + Rbc(1% Rabbit blood cells) Procedure Result and significance (五)防治原则 肺炎链球菌(S. pneumoniae) 俗称肺
13、炎球菌(Pneumococus) v可形成“脐窝状”菌落。 v自溶酶可被胆汁或胆盐活化。 (二)培养 (四)抗原构造 主 要 为 荚 膜 多 糖 抗 原。 (五)抵抗力 二 致病性 v主要的致病物质 荚膜 v所致疾病 主要引起细菌大叶性肺炎 、脑膜炎 三 免疫性 防治原则: 多价肺炎球菌荚膜多糖菌苗预防 治疗 抗生素 形态 排列 染色性 涂片染色镜检 挑取可疑菌落做相应实验 涂片染色 镜检 脓汁、痰、咽 拭子等标本 观察菌落特 点(色素、 溶血性等)血平板 分离培养 透明溶血:金葡或乙链 草绿色溶血:肺炎双球菌或甲链 不溶血:脑膜炎或淋病双球菌 【检验程序】 小猫试验 金葡菌(致病菌)微生物检
14、查法 标本 脓汁,血液,剩余食物,呕吐物等 分离培养 (血平板) 血浆凝固酶 发酵甘露醇 耐热核酸酶 直接涂片镜检 革兰阳性葡萄球菌 生长现象 金黄色色素 溶血 环 生化反应 和致病物 质检测 毒素检查 药敏试验 A群链球菌微生物学检查法 标本 直接涂片镜检 革兰阳性链球菌 分离培养 脓汁,血液,咽喉拭子 与金葡菌的鉴别 与肺炎链球菌的鉴 别 血清学试验 抗链球菌溶血素O试验, 辅助诊断风湿病。 菊糖分解试验 胆汁溶菌试验 Optochin敏感试验 肺炎微生物检查法 直接涂片镜检: G+有荚膜的双球菌 分离培养 : 与甲链鉴别 其他链球菌所致疾病 甲型溶血性链球菌 龋齿 亚急性细菌性心内膜炎
15、B群链球菌:新生儿肺炎、脑膜炎、败血症 D群链球菌:皮肤、肠道、上呼吸道、泌尿生殖道 的正常菌群 奈 瑟 菌 属 (一)脑膜炎奈瑟菌 俗称脑膜炎双球菌(meningococcus) , 为流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)的病原体。 (二)淋病奈瑟菌 俗称淋球菌(gonococcus) 1生物学性状 (1)形态与染色 脑膜炎奈瑟菌 淋病炎奈瑟菌(革兰染色) (2)培养特性 营养要求较高-巧克力培养基 专性需氧,初次培养需要5%-10%CO2) 血平板上不溶血 (3)生化反应 脑膜炎奈瑟菌 淋病奈瑟菌 麦芽糖分解实验 + - 脑膜炎奈瑟菌 抵抗力- “三怕” 怕冷: 极低 怕热: 怕干燥: 脑膜炎奈瑟
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