张玉梅《医学微生物学》本科实验一.ppt
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病原生物学实验,病原生物学教研室,张莹,实验一,一、革兰染色 二、细菌特殊结构(示教),一、革兰氏染色,1、原理,G:肽聚糖层薄且缺五肽交联桥,交联度低,外膜层含较多脂质,用乙醇等有机溶剂脱色时,外膜中类脂质融解,增加了细胞的通透性,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫和碘复合物溶出,菌体呈现复染后的红色。 G:细胞壁厚肽聚糖网层多且交联致密,用脱色剂处理时,肽聚糖层孔径缩小,且不含类脂,通透性降低,结晶紫和碘复合物牢固结合在细胞壁上,菌体呈现初染时的紫色。,初染-媒染-脱色-复染,2、步骤 (1)涂片,(2)干燥 (3)固定,初染:结晶紫1分钟,水冲甩干; 媒染:卢戈氏碘液1分钟,水冲甩干; 脱色:95%酒精30秒钟,水冲甩干; 复染:稀释复红1分钟,水冲甩干;,(5)滤纸吸干,油镜观察,(4)染色,3、结果,柠檬色葡萄球菌:蓝紫色,G+,变 形 杆 菌: 红色,G,4、意义,注意事项,革兰氏染色成败与否与许多因素有关 1、菌龄 2、涂片厚薄 3、脱色时间(最为关键),二、细菌的特殊结构,鞭毛 芽胞 荚膜,变形杆菌鞭毛 鞭毛染色 X1000,炭疽杆菌芽胞,革兰染色 X1000,炭疽杆菌荚膜,革兰染色 X1000,绘 图,1、变形杆菌鞭毛 2、炭疽杆菌芽胞 3、炭疽杆菌荚膜,
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