G试验与GM试验.ppt
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1、G试验与GM试验,微生物室 范会,侵袭性真菌病(invasive fungal disease, IFD),概念:又称侵袭性真菌感染,是指真菌侵入人体组织、血液,并在其中生长繁殖导致组织损害、器官功能障碍和炎症反应的病理改变及病理生理过程。,侵袭性真菌感染因素增加,真菌感染的诊断,诊断标准由危险因素、临床特征、微生物学检查和组织病理学检查4部分组成。 根据真菌感染的可能性将诊断结果分为三个级别: 确诊、拟诊和疑似。,真菌感染的诊断,临床特征-特异性? 影像学-特异性? 真菌涂片、培养-特异性?敏感性?时间 病理-特异性!敏感性? 早期、快速、特异、敏感、采样方便 G试验与GM试验,G试验,G试
2、验,(1-3)-D葡聚糖 占真菌细胞壁成分50%以上 与鲎试剂中的G因子发生级联凝固反应,G试验检测范围,检测底物:(1-3)-D葡聚糖 诊断:侵袭性真菌感染(IFD) 检测频率:每周一至周五 真菌细胞壁成分:念珠菌、曲霉、镰刀霉、毛孢子菌、卡氏肺孢子菌、支顶孢、组织胞浆菌等 不能检测:结合菌(毛霉、根霉)、隐球菌,G试验原理-反应特异性,G试验-国产检测方法,国产:MB-80(金山川) . 动态浊度法 . cut-off:阴性10ug/ml,中介10-20ug/ml,阳性20ug/ml,儿童阳性50ug/ml 国产:湛江安度斯生物有限公司 . 动态比色法 . cut-off:阴性100.5p
3、g/ml,中介100.5-151.5pg/ml,阳性151.5pg/ml 标本:血浆,G试验-试剂盒,鲎试剂来源:东方鲎、美洲鲎 检测方法:动态比浊法、动态比色法 试剂反应性不同,检测结果不同,cut-off值不同,30名AML、MDS念珠菌血症患者 连续2次G试验阳性,可提高特异性、PPV(阳性预测值) 确诊或拟诊IFD,平均比临床症状出现早10d,G试验-影响因素,假阳性: . 抗肿瘤准备:蘑菇多糖、裂褶菌多糖 . 免疫准备:白蛋白、球蛋白 . 血透使用纤维素膜 . 手术中使用棉纱垫、棉拭子等 . 脂肪乳等 假阴性: . 棘白菌素类:抑制BDG合成,G试验-小结,无热源采血管、清洁的检测环
4、境 高NPV,连续2次G试验阳性,可提高特异性和PPV IFD早期诊断 . 比出现临床症状体征早约10天 . 比HRCT改变早约9天 敏感性与感染程度(真菌负荷量)相关 念珠菌定植不引起G试验升高 动态反应感染程度和抗真菌治疗疗效 儿童BDG水平高于成人,GM试验,GM试验,诊断:侵袭性曲霉菌感染(IA) 检测底物:半乳甘露聚糖 . 曲霉细胞壁成分 . 菌丝在组织中生长时释放 . 热稳定 . 可溶性:serum、BALF、CSF 检测频率:一周两次,GM试验-方法及原理,伯乐试剂 . 原理:双抗体夹心法,采用小鼠单克隆抗体EBA-2,检测人血清中的曲霉菌半乳甘露聚糖。 天津贻诺琦 .,GM试验
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