溶血实验和有机磷中毒.ppt
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1、第八次实验,红细胞渗透性和化学性溶血实验 有机磷酸酯类中毒及其抢救,实验目的 实验原理 实验步骤 实验后处理 注意事项,溶血实验,红细胞渗透脆性: 红细胞在低渗溶液中可发生破裂、解体的特性。,红细胞渗透抵抗力: 红细胞耐受一定浓度的低渗溶液而不发生破裂、 解体的能力。,最小抵抗力(RBC渗透脆性) : 开始出现溶血的溶液浓度。,最大抵抗力:完全溶血的溶液浓度。,实验原理,红细胞的化学性溶血:,有机溶剂、酸、碱破坏红细胞膜的 疏水键和膜蛋白上的次级键,溶解膜脂 质,使膜蛋白质变性,造成红细胞溶解。,1.制备红细胞悬液,取抗凝动脉血2ml,混匀离心弃上清夜 (配平、对称放置、5min、1500r/
2、min) 加NS洗涤2次(离心弃上清夜) NS配成30%和3%红细胞悬液,实验步骤,2.渗透性溶血试验,标记1-10号试管 依次加入不同浓度的NaCl溶液 滴入30%混悬液1-2滴,轻轻混匀 静置30min后判断各试管溶血现象,3.化学性溶血试验,标记11-14号试管 依次加入不同试剂1ml 11-NS 12-氯仿 13-HCl 14-NaOH 滴入3%混悬液2ml,轻轻混匀 静置30min后判断各试管溶血现象,4.结果判断,不溶血:上层浅黄色或白色透明 下层红色不透明,部分溶血:上层红色透明 下层红色不透明,完全溶血:管内液体完全红色透明,不溶血,部分溶血,完全溶血,1.完成表610、11,
3、2.分析各处理因素对红细胞膜的影响及其 原理,写出实验报告。,实验后处理,1.红细胞渗透脆性实验为定量指标,氯化钠浓度的配制要求准确。 2.向试管中滴加红细胞混悬液时要靠近液面,轻轻滴入,以免冲击力太大使红细胞破损,造成溶血假象。 3.滴加红细胞混悬液后要轻轻摇匀,切勿剧烈震荡。静置一段时间后在光线明亮处观察。,注意事项,有机磷中毒,实验目的 实验原理 实验步骤 实验后处理 注意事项,中毒的原理和症状,中毒的原理:,外周作用(M、N样作用) 中枢作用(先兴奋后抑制),有机磷酸酯类为难逆性抗胆碱酯酶药,中毒的症状:,实验原理,解毒药作用原理,阿托品:,小剂量阻断M受体,大剂量阻断N1受体, 可兴
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