oAAA3m地下管线电子标识系统设计施工.ppt
《oAAA3m地下管线电子标识系统设计施工.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《oAAA3m地下管线电子标识系统设计施工.ppt(95页珍藏版)》请在三一文库上搜索。
1、3M 地下燃气管线电子信息标识系统(EMS) 电子标识系统设计施工说明,实现地下燃气管线设施 精确定位及信息识别管理,每年为全球近10万公里的地下管线设施 提供EMS电子标识定位及信息管理系统,降低开挖事故率,提高燃气管道抢险施工效率,有效保护地下燃气管线设施,降低燃气管线设施运维成本,提高施工安全性,我们提供: 地下燃气管线设施安全管理方案,3M 地下管线电子标识系统设计原则,非金属燃气管线必须使用电子标识器。 地下直线燃气管线标识器间距最大不超过50米。 地下燃气管线事件点必须使用电子信息标识器,用于标识相对应的地下设施: 所有非人井内的转弯处起始至终止位置; 所有与其他地下设施的交越处;
2、 燃气管道横过道路、河流、建筑物等公共设施两端,可以是燃气管道保护管道的两端; 管线的深度变化幅度大于0.5米时,位置最高和最低处; 非开挖技术敷设的地下管线的两端; 各类地下阀门; 地面以下不可见的人井盖; 预埋预放的燃气管道端头;,3M 地下管线电子标识系统设计原则,维修过的地下燃气或接头必须在覆土前安装电子信息标识,记录维修信息。 其他市政管线开挖工程,如遇燃气管线,必须安装电子标识。 设计图纸应标注应该安装电子标识器的位置并给信息标识器预留条形码标签粘贴位置。 相应人员应根据安装电子信息标识的地下燃气管线位置建立对应的后台管理信息库。,3M 地下管线电子标识系统设计原则,ID,M,电子
3、标识器标注图示符号举例:,普通电子标识器,电子信息标识器,设计图纸标注电子标识器,施工图预留电子标识器标签位置,设计图纸实例 (一),设计图纸实例(二),对设计图上已经完成安装的电子标识器进行标记,以防止遗漏,管线设施信息代码举例,管线设施信息代码举例,标识器标签条形码:000012345 标签 描述 说明 Company GHRQ 港华燃气 App T 三通 Depth 1 1米相对深度 UtlXing Water 与水管交越 PSI 1 1公斤压力,信息模板举例,也可在标识器内只记录被标识物在整体系统或GIS系统数据库中的识别代码,如:,标识器标签条形码:000054321 标签 描述 说
4、明 Company GHRQ 港华燃气 Record# 32576 第32576号记录,信息模板下载至定位仪,计算机连接,全中文软件界面,标识器标识牌,标识器识别标签(用户自制),告知属性并保护标识器不受无意破坏损毁,管线开挖,管线敷设,编辑信息并写入标识器,标识器安装放置,记录标识器编码、地形描述及深度,人工回填,探测验收,3M 电子标识系统施工步骤,按设计选择标识器,机械回填,信息整理归档,3M 施工步骤标识器信息输入,按设计图纸,在办公室预先写入标识器信息,并在标识器外作明显区分标记,现场编辑并写入标识器信息,或,只记录信息标识器的ID代码,并描述其属性,3M 施工步骤标识器信息输入,不
5、对标识器写信息,简化工作,最大埋深:1.5 m (使用3M探测仪),不建议按最大埋深安装。 为增加标识器信息读取的可靠性及有效探测区域,建议标识球放置深度为额定深度的一半,约0.8米。 如果地面在完成后预计会填高,标识器一般埋深0.5 米(视回填量多少而定) 如果地面在完成后预计会削低,标识器一般埋深1.2 米 如考虑标识器在覆土填埋后还要写入信息,则标识球埋深不应超过0.3 米。 标识器安装于被标识物的正上方,距被标识物至少10 厘米。,3M 施工步骤安装位置及深度,3M 施工步骤标识器固定,电子标识与电子信息标识建议使用扎带或扎线等相同功能的联结工具进行固定。如果现场条件限制,无法进行联结
6、固定,在确保其位置准确的前提下可采用直接敷设或其它方式安装。,3M 施工步骤标识器固定,香港电力的标识器固定附件,上海电力的扎带捆扎,随警示带直接敷设,将电子标识 条形码贴在图纸上,3M 施工步骤现场信息记录,对比设计图纸,记录标识器序列号及其他描述信息; 对于普通标识器,在图纸上标注大致位置,并记录位置描述信息,施工人员将标识器条形码贴于记录单上,3M 施工步骤现场信息记录,3M 施工步骤信息记录表,工作人员对标识器描述信息列表,仅用标识器序列号,易于信息更新。,3M 施工步骤信息记录表,标识器内数据信息列表,记录管线属性。,3M 施工步骤人工回填,建议在机械回填之前先人工回填细土至标识器上
7、方5厘米以固定标识器,确保其位置在机械回填时不受外力影响而变动,另外防止受到剧烈外力的挤压和碰撞如石块等。,3M 施工步骤普通标识器安装回填,普通电子标识器用于直线管线的标记,不需要进行存储信息的验收,其埋设安装也可在机械回填时进行投入式安装,提高工作效率,降低人员成本。但其位置必须在图纸上标注清楚。,3M 施工步骤探测验收,对安装埋设的电子标识器进行探测验收。 普通电子标识器:验证其可探测性和位置与图纸标注是否统一。 电子信息标识器:除上述普通电子标识器的验收外,还要进行数据可读性验证及准确性比对,现场读取序列号及存储信息并确认与安装时记录信息一致。,接近 ,锁定 ,获得存储数据和深度信息,
8、电子标识器定位和读取信息的过程,3M 施工步骤探测验收,3M 施工步骤探测验收,3M 信息整理归档,将标有电子标识器位置及序列号的竣工图纸整理归档,3M 信息整理归档,将所有电子信息标识器数据信息收集整理,并进行相关处理以便于后期的管理及查询。,电子标识器定位,CAD/GIS 数据库 (电子地图),数据上传到GIS系统,GPS现场 位置信息,3M GIS应用,3M GIS应用,电子标识器与GIS的结合应用是地下管线管理的革命性飞跃。,谢谢!,5-Aza-CdR对人食管癌细胞株生物学行为及TFPI-2 mRNA表达的影响,5-Aza-CdR对人食管癌细胞株生物学行为及TFPI-2 mRNA表达的
9、影响 作者:杜雅冰,邵应举,樊青霞,孙桢,王琳,赵培荣 作者单位:(郑州大学第一附属医院肿瘤内科,河南郑州 450002) 【摘要】目的探讨5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-2-deoxycytidine,5-Aza-CdR)干预对食管鳞癌细胞株Eca9706生长增殖及其组织因子途径抑制物2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)基因表达的影响。方法选取食管鳞癌细胞株Eca9706,并用不同浓度的5-Aza-CdR处理该细胞株。MTT法检测干预前后细胞增长率的变化,FCM法检测干预前后细胞凋亡率的变化,RT-PCR技术检测干预前后Eca9706细胞
10、TFPI-2基因mRNA的表达,免疫组化检测干预前后Eca9706细胞TFPI-2蛋白的表达。结果 食管鳞癌细胞株Eca9706存在TFPI-2基因超甲基化状态,经5-Aza-CdR处理后,超甲基化状态解除,细胞增殖受到抑制,细胞凋亡率明显提高(P0.05);细胞中TFPI-2蛋白表达明显增强,同时mRNA的表达水平也较处理前明显提高(P0.05)。结论 食管癌细胞系TFPI-2基因超甲基化可抑制其mRNA表达,当其超甲基化解除后,细胞增殖受到抑制,同时细胞凋亡率相应提高。,【关键词】 食管癌;组织因子途径抑制物-2;5-氮杂-2-脱氧胞苷;甲基化;免疫组化;逆转录聚合酶链反应;凋亡 ABST
11、RACT: Objective To explore the effects of 5-Aza-2-deoxycytidine (5-Aza-CdR) intervention on the growth and proliferation of Eca9706 cell line and protein expression of tissue factor pathway inhibitor-2 (TFPI-2). Methods Eca9706 cell line was treated by 5-azaCdR of different concentrations; MTT, flow
12、 cytometry, immunohistochemistry and RT-PCR were used to determine the cell growth, apoptosis, and the expression of TFPI-2 gene and its protein. Results Eca9706 cell line had hypermethylation of TFPI-2. After demethylation by 5-Aza-CdR treatment, the proliferation of Eca9706 was inhibited, the apop
13、tosis rate was also increased significantly in the concentration-dependent manner. RT-PCR detected that mRNA expression of TFPI-2 gene in Eca9706 cell line recovered significantly (P0.05). Conclusion 5-Aza-CdR can slow the growth of Eca9706 cell, increase the apoptosis rate, reactivate the TFPI-2 ge
14、ne transcription and protein expression by demethylation. KEY WORDS: esophageal carcinoma; tissue factor pathway inhibitor-2; 5-Aza-CdR; methylation; immunohistochemistry; RT-PCR; apoptosis,组织因子途径移植物2(tissue factor pathway inhibitor, TFPI-2)是丝氨酸蛋白酶抑制物,在调控肿瘤细胞浸润转移方面起着重要作用。目前,关于TFPI-2在食管癌中的基因表达情况的分析研究
15、尚少。本研究旨在探讨TFPI-2基因的失活机制,并寻找食管癌治疗的新靶点。 1 材料与方法 1.1 材料 RPMI-1640培养基购自北京索莱宝生物科技有限公司;标准胎牛血清购自天津市灏洋生物制品科技有限公司;Trizol试剂购自MBI公司;RT-PCR试剂盒购自MBI公司;5-Aza-CdR购自Sigma公司;人食管癌细胞株Eca9706由郑州大学肿瘤生物学研究室惠赠。 1.2 细胞培养和药物处理 人食管癌细胞Eca9706以含10 mL/L胎牛血清的RPMI-1640培养基,37 、50 mL/L CO2培养箱培养,每23 d消化传代1次。 1.3 MTT法检测干预前后细胞增长率的变化 取
16、对数生长期细胞,调整密度至5104/mL接种于96孔板,按5-Aza-CdR浓度分为6组:0、0.4、1.6、6.4、25.6、102.4 mol/L,每组复设5个孔。待细胞贴壁后,分别于24、48、72 h后加入MTT液,4 h后弃去上清液,每孔加DMSO 150 L,在490 nm波长测定各孔吸光度值(absorbance,A)。细胞增殖抑制率(cellular proliferation inhibition rate, CPIR)按公式计算:CPIR=(1-实验组A均值/对照组A均值)100%。,1.4 流式细胞仪(FCM)检测干预前后细胞凋亡率的变化 取对数生长期细胞,按5105/m
17、L的密度接种于6孔板内,待细胞贴壁后加药,分组如下:对照组(0 mol/L),1.6 mol/L 5-Aza-CdR组,25.6 mol/L 5-Aza-CdR组,102.4 mol/L 5-Aza-CdR组。每组均于5-Aza-CdR作用48 h后消化收集细胞,700 mL/L冰乙醇固定,流式细胞仪进行细胞凋亡测定。 1.5 RT-PCR技术检测TFPI-2基因mRNA的表达 分组同FCM,每组细胞均5-Aza-CdR作用48 h。TFPI-2的上、下游引物分别为5-GTCGATTCTGCTGTTTTCC-3和5-ATGGAATTTTC TTTGGTGCG-3,合成产物为440 bp;-ac
18、tin作为内参照,上下游引物分别为5-AGGCATTGTGATGGACTCCG-3和5-AGTGATGACCTGGCCGTCAG-3,合成产物为301 bp。按照试剂盒说明书,用Trizol试剂提取细胞总RNA,经紫外分光光度计分析后,按Sigma公司RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit说明书操作。先逆转录制备单链cDNA,再以逆转录产物为模板,用上、下游产物进行PCR反应扩增目的基因。反应条件为:94 预变性3 min,然后94 变性30 s,51 退火30 s,72 延伸30 s,循环30次,最后72 延伸5 min,4 保温。扩增片段经20
19、g/L琼脂糖凝胶电泳鉴定。,1.6 免疫组化方法检测TFPI-2蛋白的表达 取对数生长期细胞,按5104/mL的密度接种于经预处理的盖玻片上,待细胞贴壁后加药(分组同RT-PCR)。培养48 h后加入40 g/L多聚甲醛溶液固定30 min,30 mL/L H2O2封闭内源性过氧化物酶,室温下10 min,100 mL/L动物血清封闭,室温下10 min,滴加1100的稀释的TFPI-2抗体4 过夜,二抗室温下1 h,滴加辣根酶标记链霉卵白素,37 孵育30 min,DAB显色,苏木精复染,脱水透明封片。另取爬片滴加PBS 液代替一抗作为阴性对照。结果判定:TFPI-2蛋白阳性信号均呈棕黄色颗
20、粒样物质,位于细胞质内。光镜下随机选取10个视野(每个视野观察细胞数不少于100个),按阳性细胞所占百分比进行结果判定。阳性率=(阳性细胞数/1 000)100%。 1.7 统计学处理 应用SPSS16.0软件进行统计学处理。实验数据采用均数标准差(x-s)表示,采用单因素方差分析加LSD两两比较法进行分析。检验水准=0.05。 2 结 果 2.1 干预前后细胞增长率的变化 经MTT检测,结果显示,实验组细胞抑制率明显高于未加药组,且随着作用时间的延长和浓度的增加而增加(表1)。表1 不同浓度的5-aza-CdR对Eca9706细胞增殖的影响,2.2 干预前后细胞凋亡率的变化 流式细胞仪分析可
21、见,经不同浓度5-Aza-CdR诱导48 h后,Eca9706细胞各处理组凋亡率分别为(13.760.47)%、(26.970.39)%、(41.030.19)%,与5-Aza-CdR诱导浓度成正比。与对照组(1.390.27)%比较差异有统计学意义(P0.05),且各浓度组间比较差异亦有统计学意义(P0.05,图1)。以上实验重复5次。 2.3 干预前后Eca9706细胞mRNA的表达情况 扩增产物经琼脂糖凝胶电泳显示,Eca9706细胞中TFPI-2 mRNA表达在各用药组和未用药组之间有明显差异,TFPI-2 mRNA在未用药组细胞中未见表达。经1.6、25.6、102.4 mol/L
22、5-Aza-CdR处理后可见TFPI-2 mRNA表达,表明在一定范围内随5-Aza-CdR药物浓度的增加TFPI-2 mRNA表达逐渐增强(图2)。图1 各组流式细胞凋亡散点图A:对照组;B:1.6 mol/L 5-Aza-CdR组;C:25.6 mol/L 5-Aza-CdR组;D:102.4 mol/L 5-Aza-CdR组。图2 5-Aza-CdR处理前后Eca9706细胞TFPI-2 mRNA的表达 M:DNA marker;-actin:301 bp;TFPI-2:440 bp;1:对照组;2:102.4mol/L组;3:25.6 mol/L组;4:1.6 mol/L组;5:H2O
23、对照组。,2.4 干预前后TFPI-2蛋白的表达情况 免疫组化结果显示,经5-Aza-CdR作用Eca9706细胞48 h,,TFPI-2蛋白的阳性表达率增加,对照组、1.6 mol/L组、25.6 mol/L组、102.4 mol/L组TFPI-2蛋白的阳性表达率分别为(2.101.42)%、(9.312.70)%、(14.723.50)%、(68.203.20)%,不同浓度组之间以及用药组与对照组之间的差异均有统计学意义(P0.05,图3)。 图3 各组TFPI-2蛋白的表达情况 3 讨 论 人TFPI-2(hTFPI-2)基因定位于7q22区域,全长由8164个碱基组成,其cDNA全长为
24、1 222 kb。其mRNA的启动子具有典型的管家基因特征,没有典型的TATA盒或CAAT盒,在推定的转录起始位点区域GC含量超过80%1。TFPI-2可在体内多种组织广泛表达,在这些组织内一旦出现肿瘤,TFPI-2的表达水平也会随之显著下降2。有研究证实,在绒毛膜癌、乳腺癌、前列腺癌、神经胶质细胞瘤、纤维肉瘤和胸部恶性肿瘤组织中,与肿瘤产生相关的TFPI-2表达水平减少可能与其启动子的甲基化密切相关1,3-5。启动子区cpG岛高甲基化在肿瘤形成机制中的确切作用尚不清楚,然而众多证据表明,肿瘤抑癌基因CpG岛异常的甲基化导致基因失活和转录抑制是肿瘤发生的重要机制之一6-8。,目前,有体外实验表
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- oAAA3m 地下 管线 电子 标识 系统 设计 施工
链接地址:https://www.31doc.com/p-3098442.html