基因工程专题.ppt
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1、优秀精品课件文档资料,2.基因表达载体的构建 什么叫载体?表达载体?,表达载体(Expression vectors):就是在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件(如启动子、终止子等),不仅使目的基因稳定存在、复制,从而可以遗传给下一代,也是目的基因进行转录,进而翻译出该插入基因编码的蛋白产物的载体。如表达载体pKK223-3是一个具有典型表达结构的大肠杆菌表达载体。其基本骨架为来自pBR322和pUC的质粒复制起点和氨苄青霉素抗性基因。,克隆载体(Cloning Vector):通常采用从病毒、质粒或高等生物细胞中获取的DNA作为克隆载体,在载体上插入合适大小的外源DNA片段,并注意不能破坏
2、载体的自我复制性质。将重组后的载体引入到宿主细胞中,并在宿主细胞中大量繁殖。,3.将目的基因导入受体细胞,得到转基因生物,根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)是一种能诱发植物产生肿瘤的细菌,根癌农杆菌中诱导植物产生肿瘤的质粒(Tumor inducing plasmid),简称为Ti质粒。野生型农杆菌的Ti质粒,含有两个与致瘤有关的区域:一个是TDNA区(transferred DNA region),含致瘤基因;另一个是毒性区(Virulence region),在TDNA的切割、转移与整合过程中起作用。用于植物基因转化的农杆菌Ti质粒载体系统的构建,是将野生Ti质粒中的致瘤基因删除,并在TDNA区域内插入适当的选择标记和多克隆位点。,(1)转基因植物培育过程?,乳汁中含人的凝血因子,运载体是什么?怎样导入受体细胞?,(2)转基因动物培育:,将目的基因导入动物细胞,(3)将目的基因导入微生物细胞,完,
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