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1、NCAF,张桂香 全国畜牧兽医总站畜草中心,2005.11.15,我国地方猪种 遗传距离测定分析,NCAF,主 要 内 容, 项目简介 项目立项背景 技术方案与实施 项目主要研究成果,NCAF,项 目 简 介,NCAF,简 介,农业部农牧渔业种质资源保存利用项目 样品采集涉及全国21个省(市、自治区)80多个乡、镇的保种场和保护区,参加品种资料收集、调查工作的单位达25个,参加人员近200人,NCAF,立 项 背 景,NCAF,立 项 背 景,生物多样性的保护和利用是当今人类环境与发展领域的中心议题,而遗传多样性又是生物多样性中与人类关系最密切的组成部分 我国拥有丰富的地方猪种遗传资源,但与发
2、达国家相比对地方猪种的遗传特性研究得不够深入,而且近年来地方猪种遗传多样性呈现出日益贫乏的不良迹象 我国地方猪品种间普遍存在着同种异名、同名异种等问题,造成保种效率低,保种进程缓慢,NCAF,立 项 目 的,保种工作的发展,主要依靠对品种遗传特性的深入研究。没有研究,就不能发掘潜在的宝贵遗传特性,保种工作就是消极的,没有意义的 借助现代分子生物学技术,研究地方猪品种的遗传特性和彼此间的亲缘关系,从保护遗传多样性的角度来保护和利用地方品种,为国家制订有效的种质资源保护利用策略提供科学依据,NCAF,技术方案与实施,NCAF,技 术 方 案,遗传距离 用基因频率的函数表示的群体间遗传差异 分析群体
3、之间的遗传结构、确定品种(群体)间亲缘关系远近 所用基因座位通常都是不受自然和人工选择压力的座位(May, 1990) 为畜禽品种资源的保存利用提供了客观标准,NCAF,技 术 方 案,研究群体 以中国猪品种志(1986)中收录的地方猪种作为研究的主要对象,这些品种具备中国猪种的典型特征,可较全面地包含中国地方猪种的遗传特性,NCAF,技 术 方 案,品种选择 依据中国猪品种志所列品种,部分名称已经合并的品种按照合并前的名称采集,同时收集3个外源品种作为对照 采样原则 随机抽样与典型群抽样相结合,每品种数量60头,公猪不少于10%,NCAF,全国21个省(市、自治区、直辖市)样品采集地点分布示
4、意图,表示地方猪种的采样地点 表示外源猪种的采样地点,NCAF,技 术 方 案,微卫星和血液蛋白多态性研究在探讨品种遗传变异及亲缘关系等方面具有重要的应用价值 微卫星标记研究,采用FAO-ISAG推荐的27对微卫星DNA引物,使研究结果具有全球通用性和可比性 选用多态性较为丰富的8个血液蛋白基因座位,作为微卫星DNA多态性研究的补充,NCAF,技 术 方 案,微卫星简介 也叫做简单重复序列 呈共显性遗传 由核心序列和侧翼序列构成 FAO-ISAG将其推荐为评估畜禽遗传多样性的首选分子标记,NCAF,技 术 方 案,微卫星等位基因分型 片段A: GAGAT (AC)n TCTAG 片段B: GA
5、GAT (AC)m TCTAG 片段C: GAGAT (AC)k TCTAG . .,NCAF,27个猪微卫星座位名称(FAO-ISAG) 及所在染色体位置,NCAF,蛋白质多态性检测座位,NCAF,数据统计分析 等位基因频率 (GenePop,Version3.1) 遗传杂合度、多态信息含量 遗传距离(Dispan, 1993, DA和DS) 聚类分析(UPGMA和NJ法),技 术 方 案,NCAF,主要研究成果,NCAF,主要研究成果,完成26个微卫星和8个血液蛋白基因座位的多态性研究,建立了一套完善的分子标记检测技术 通过对品种内和品种间遗传变异的分析,初步建立了60个猪品种的微卫星DN
6、A标记和血液蛋白多态性的资料数据库,NCAF,主要研究成果,血清蛋白多态性的遗传变异 中国地方猪种的 8个血清蛋白座位均具有多态性,分别受27个等位基因调控,并且具有一定的品种特征,NCAF,部分血液蛋白基因座的电泳模拟图,NCAF,主要研究成果,微卫星多态性的遗传变异 地方猪种的等位基因数量非常丰富 3个引进猪种与地方猪种的遗传距离很大 海南猪和五指山猪有着最小的遗传距离。最大的遗传距离出现于滨湖猪与小梅山猪之间。江苏的7个猪种之间和湖南的5个猪种之间的遗传距离较小,NCAF,部分微卫星座位的电泳分型图谱,IGF1 玉山黑猪,NCAF,金华猪,部分微卫星座位的电泳分型图谱,NCAF,部分微卫
7、星座位的电泳分型图谱,NCAF,部分微卫星座位的电泳分型图谱,NCAF,部分微卫星座位的电泳分型图谱,NCAF,微卫星标记的DA/NJ聚类图,NCAF,主要研究成果,57个地方猪种在所研究的微卫星座位上具有61个特有等位基因和258个优势等位基因以及一部分血液蛋白座位的优势等位基因,根据这些等位基因及其组合,结合生物统计学方法可以开展地方猪种的种质鉴别工作,NCAF,主要研究成果,具有特有等位基因和/或优势等位基因的典型品种是(括号里的数字分别是等位基因及频率): 民猪的SW24(91:0.08)、SW240(110:0.81)、SW72(100:0.54) 东山猪的S0228(276:0.0
8、6)、SW951(125:0.97)、S0002(198:0.50) 莱芜猪的S0227(272:0.14)、Hpx3(0.5508) 河套大耳猪的SW632(187:0.06)、Hpx1(0.8113)、 Hpx4(0.1038) 阳新猪的Hpx2(0.9677) 马身猪的Hpx1F(0.6949)、Hpx2(0.2373) 金华猪的Hpx2F(0.0648)等品种,NCAF,主要研究成果,本研究结果与其他研究结果的相同点: 中梅山猪、小梅山猪之间,米猪与二花脸猪、沙乌头猪之间的亲缘关系很近,这与历史记载相吻合 江西省的地方猪种间差别很大,本研究支持2001年江西畜禽品种志的观点,认为东乡猪
9、与乐平猪的亲缘关系较远,NCAF,主要研究成果,本研究结果与其他研究结果的相同点 通城猪、清平猪之间的亲缘关系较近,同为江海型的阳新猪和二花脸猪相距甚远,这与樊彬等(1999)的结论基本一致 在猪品种志中,云南的富源大河猪和贵州的柯乐猪被划为一个品种乌金猪,在本研究中,二者的亲缘关系也非常近 湖南省的5个猪品种之间的亲缘关系较近,这与陶钧(1992)等研究结果基本相同,NCAF,主 要 建 议,对比品种志的结论,本项目提出了存在同名异种、同种异名的品种,确定的依据是Bootstrap抽样检验的可靠程度以及品种表现特性的差异 这些猪品种是: 嘉兴黑猪应从太湖猪中划分出来 东乡猪与乐平猪是不同品种 鄂西黑猪与盆周山地猪是不同品种 东山猪从华中两头乌中分离出来 河套大耳猪、淮南猪、莱芜猪和马身猪合称为黄淮海黑猪不妥,它们是不同的品种 富源大河猪和柯乐猪可以合称为一个品种乌金猪 二花脸猪、中梅山猪、小梅山猪、米猪、沙乌头猪可以合称为太湖猪,NCAF,谢谢!,
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