动植物检验检疫论文.doc
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1、河北北方学院学士论文学号:20071040109河北北方学院毕业论文复方中药“康西克”对新城疫的治疗试验研究The study of compound chinese medicine kangXiKefor Newcastle Disease treatment experimental学 生:张 宁指导老师:冯雪健院 系:动物科技学院动物医学系专 业:动植物检疫班 级:2007级论文提交日期:2011年6月 9日目录引言3材料与方法61.1中药制剂的制备61.2试验器材61.3病毒61.4实验动物及分组61.5药效判定标准7结果72.1临床观察及剖检结果:72.2攻毒组剖检见到以下病理变化
2、:7讨论113.1中药制剂的作用特点113.2 筛选的中草药的特点分析及方解113.3中药制剂对鸡新城疫的防治效果11结论11参考文献12致谢14 复方中药“康西克”对新城疫的治疗试验研究张宁 (动物科技学院2007级动植物检疫专业本科班) 指导老师:冯雪健摘要:目的为了进行中药复方制剂防治新城疫的试验。方法 将1日龄80只SPF鸡随机分成4组,每组20只,统一饲喂全价料。分别按以下方法分组并处理:(1)感染对照组:在15日龄用新城疫I系苗滴鼻攻毒,攻毒剂量为94.5EID50200L/只。鸡只感染不给药物。(2)中药预防组:在15日龄用新城疫I系苗滴鼻攻毒,攻毒剂量同感染组,在攻毒前4d开始
3、给药,每只鸡饲料拌药12g/d。(3)中药治疗组:在15日龄用新城疫I系苗滴鼻攻毒,攻毒剂量同感染组。在攻毒后观察出现发病的鸡只即开始给药,每只鸡饲料拌药12g/d,连用10 d。(4)正常对照组:不做任何处理。攻毒前、后观察鸡的临床症状,记录每组鸡只发病情况及死亡数。试验观察15d。关键词:中药复方制剂;鸡新城疫;防治The study of compound chinese medicine kangXiKefor Newcastle Disease treatment experimentalzhangning(Animal science and technology college
4、Animal and Plant Quarantine profession )Guide Teacher:Feng XuejianAbstract :objective For prevention and treatment Newcastle disease in traditional Chinese medicine test MethodA total number of 80 healthy cocks that vaccinated ND vaccine were selected in the test. Randomly divided into 4 groups, 20
5、in each group, Reunification materialfeeding the full price. Which were grouped by the following methods and handle.(1) The infection control group:On the 15 days of age the cocks used the Newcastle disease virus attack I system intranasal vaccine, volume of attacking poison 94.5EID50200L. Any chick
6、ens infected and do not give medication. (2)The medicine prevention group: On the 15 days of age the cocks used the Newcastle disease virus attack I system intranasal vaccine, poison attacking the same amount of the infecte control group,before 4days began administered. Each chicken feed mix drugs 2
7、g / d.(3)The Chinese medicine treatment group: On the 15 days of age the cocks used the Newcastle disease virus attack I system intranasal vaccine, poison attacking the same amount of the infecte control group,It is occurre the incidenced chicken until began feed the Chinese medicine. Each chicken f
8、eed mix drugs 2g / d. We feed 10 days.(4) The normal control group: Not given any treatment. We observed Chickens clinical symptoms everyday, recorded the incidence of each chicken and the number of chicken deaths. Observating the experiment 15 days.Key words :Chinese herbal compound; Avian Infectio
9、us Bronchitis; Control引言鸡新城疫病毒(NDV)属于副粘病毒科, 副粘病毒属,核酸为单链RNA。成熟的病毒粒子呈球形,直径为120-300nm1。由螺旋形对称盘绕的核衣壳和囊膜组成。囊膜表面有放射状排列的纤突,含有刺激宿主产生血凝抑制和病毒中和抗体的抗原成分。NDV血凝素可凝集人、鸡、豚鼠和小白鼠的红细胞2-3。溶血素可溶解鸡、绵羊及O型人红细胞。病毒感染一般要经过吸附、穿入、脱衣壳、生物合成、装配及释出等六个阶段。在感染发生时,病毒吸附和穿入细胞是关键的两个阶段4。鸡是NDV最适合的实验动物和自然宿主。 病毒存在于病鸡的所有组织器官、体液、分泌物和排泄物中,其中以脑、脾
10、、肺含毒量最高,以骨髓保毒时间最长。不同毒株对热的稳定性有较大的差异,NDV在室温条件下可存活一周左右,在56存活3090min,4可存活一年,-20可存活十年以上5-8。本病毒对消毒剂、日光及高温抵抗力不强,一般消毒剂的常用浓度即可很快将其杀灭,很多种因素都能影响消毒剂的效果,如病毒的数量、毒株的种类、温度、湿度、阳光照射、贮存条件及是否存在有机物等,尤其是以有机物的存在和低温的影响作用最大9。准确诊断和及时用药是防治ND的关键,目前可通过临床症状,剖检变化,流行病学,病理变化,病毒分离和血清学检查进行综合判定。流行病学NDV可感染50个鸟目中27个目240种以上的禽类,但主要是发生在鸡和火
11、鸡。雉鸡及野鸡也有易感性。鸽、鹌鹑、鹦鹉、麻雀、乌鸦、喜鹊、孔雀、天鹅以及人也可感染。水禽对本病有抵抗力10。本病主要传染源是病鸡和带毒鸡的粪便及口腔粘液。被病毒污染的饲料、饮水和尘土经消化道、呼吸道或结膜传染易感鸡是主要的传播方式。空气和饮水传播,人、器械、车辆、饲料、垫料(稻壳等)、种蛋、幼雏、昆虫、鼠类的机械携带,以及带毒的鸽、麻雀的传播对本病都具有重要的流行病学意义11-13。本病一年四季均可发生,以冬春寒冷季节较易流行。不同年龄、品种和性别的鸡均能感染,但幼雏的发病率和死亡率明显高于大龄鸡。纯种鸡比杂交鸡易感,死亡率也高。某些土种鸡和观赏鸟(如虎皮鹦鹉)对本病有相当抵抗力,常呈隐性或
12、慢性感染,成为重要的病毒携带者和散播者14。临床症状本病的潜伏期为215d,平均56d。 发病的早晚及症状表现依病毒的毒力、宿主年龄、免疫状态、感染途径及剂量、并发感染、环境及应激情况而有所不同。速发嗜内脏型新城疫,可致所有年龄的鸡发生最急性或急性、致死性疾病。通常见有消化道出血性病变。速发嗜肺脑型新城疫,可致所有年龄发生急性,通常是致15-16死性疾病,以出现呼吸道和神经症状为特征。中发型新城疫,呼吸系统或神经系统疾病的低致病性形式。死亡仅见于幼雏。缓发型新城疫(LND;Hitchner 和Johnson,1948),轻度或不显性的呼吸道疾病。无症状型或缓发嗜肠型新城疫 (LEND;Lanc
13、aster,1981),主要是肠道感染17-19。病理变化剖检可见以各处粘膜和浆膜出血,特别是腺胃乳头和贲门部出血。心包、气管、喉头、肠和肠系膜充血或出血。直肠和泄殖腔粘膜出血。卵巢坏死,卵泡破裂性腹膜炎等。消化道淋巴滤泡的肿大出血和溃疡是ND的一个突出特征20。 消化道出血病变主要分布于:腺胃前部食道移行部;腺胃后部肌胃移行部;12指肠起始部;12指肠后段向前23cm处;小肠游离部前半部第一段下1/3处;小肠游离部前半部第二段上1/3处;梅尼厄氏憩室(卵黄蒂)附近处;小肠游离部后半部第一段中间部分;回肠中部(两盲肠夹合部);盲肠扁桃体,在左右回盲口各一处,枣核样隆起,出血,坏死。非典型新城疫
14、剖检见气管轻度充血,有少量粘液21-22。鼻腔有卡他性渗出物。气囊混浊。少见腺胃乳头出血等典型病变。病毒分离1.病料预处理:取病死鸡脑、肝、肺、气管样品混合研碎,用灭菌生理盐水按15稀释,按10000单位/mL加入先锋霉素,冻融3次,4下2000r/min离心15min。 2.病毒分离:将预处理好的样品按0.2mL/胚接种于10枚10日龄SPF鸡胚,收获2472h死亡鸡胚的尿囊液(F1),在SPF鸡胚再传一代(20枚),收获毒液(F2)作为分离株23。ND的防治新城疫的预防工作是一项综合性工程。饲养管理,防疫,消毒,免疫及监测五个环节缺一不可。不能单纯依赖疫苗来控制疾病。加强饲养管理和兽医卫生
15、,注意饲料营养,减少应激,提高鸡群的整体健康水平;特别要强调全进全出和封闭式饲养制,提倡育雏、育成、成年鸡分场饲养方式25-26。严格防疫消毒制度,杜绝强毒污染和入侵。建立科学的适合于本场实际的免疫程序,充分考虑母源抗体水平,疫苗种类及毒力,最佳剂量和接种途径,鸡种和年龄。坚持定期的免疫监测,随时调整免疫计划,使鸡群始终保持有效的抗体水平。一旦发生非典型ND,应立即隔离和淘汰早期病鸡,全群紧急接种3倍剂量的系活毒疫苗,必要时也可考虑注射系活毒疫苗。如果把3倍量系活苗与ND油乳剂灭活苗同时应用,效果更好27-28。对发病鸡群投服多维和适当抗生素,可增加抵抗力,控制细菌感染。中草药对病毒的直接抑杀
16、作用现代药理研究表明,一些中草药有抑制或杀灭病毒的作用29。侯世宽用人参叶的水提取液在细胞和细胞上分别进行了抗伪狂犬病毒和抗狐狸脑炎病毒试验,结果水提液和醇提液对狐狸脑炎病毒在细胞上的50%抑制浓度(50)分别为1565.5和11037.4。罗军等采用大黄提取液进行体外抗单纯疱疹病毒()的研究,以免疫荧光法检测细胞内病毒抗原作为考核药物的抗病毒作用。结果表明,该药对侵入细胞有阻断作用,并且对病毒有直接杀伤作用30。其它单味中草药如黄连、金银花、连翘、丹皮、大青叶、桂枝、柴胡、茵陈、石韦、桑寄生、苍术、何首乌、板蓝根、淫羊荷、贯众、水飞蓟等,其中大多数对流感病毒有抑制作用,有的还对孤儿病毒、肝炎
17、病毒、肠道病毒、疱疹病毒、脊髓灰质病毒、乙脑病毒、鼻病毒等有抑制作用31。现代复方药理研究证明,麻杏石甘汤(出自伤寒论)具有抗甲型流感病毒的作用;麻黄汤(出自伤寒论)具有抗呼吸道病毒的作用。小柴胡汤(出自伤寒论)有抗菌抗病毒、增强机体抗病力的作用;玉屏风散(出自简易方)有抑制流感病毒、调节免疫功能的作用;正柴胡饮(出自景岳全书)有解热、抗病毒、抗炎、镇痛、增强免疫力的作用。中兽医对鸡新城疫病的认识近年来,新城疫发生了新的变化,典型的新城疫已不多见。以发病率占10%30%,临床症状不明显,病理变化不典型,死亡率15%45%之间,产蛋鸡主要是产蛋率下降,伴有呼吸症状为特征的非典型新城疫则屡见不鲜。
18、虽然没有高致病性禽流感的危害大,但同样严重影响着养鸡业的健康发展和广大养鸡户的经济效益32-34。鸡新城疫历代中兽医书中无有此病,更未有相应的治疗措施。但对于传染性极强的致病因素,中兽医称为“疫疬”或“瘟疫”。其特点是具有发病急骤,病情重笃,症状相似,传染性强,易于流行。这种病的防治主要是通过提高机体抗病力,抗御“疫疬”的入侵,同时还要求适时“避其毒气”曾经做过实验,三个月内用纯中药为25家养殖户做肉鸡全程中药预防收到了良好的疗效,由于正值春季,新城疫、温和型流感发生很多,但全程中药预防的鸡群基本没有发生。由于是农户养殖,管理不当,鸡群偶有发病,但很快得到控制35。中药预防性投药成本较西药要高
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