G第七章、酶的抑制作用及抑制.ppt
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1、第七章、酶的抑制作用及抑制动力学,失活作用: 通过变性作用引起酶活力下降或丧失 抑制作用: 改变必需基团性质,引起酶活力下降,丧失 第一节抑制作用的类型: 一、分类: (一)不可逆抑制作用: 抑制剂以很牢固的共价键与酶结合,不能用物理方法除去,抑制后酶活力不能恢复 专一性的不可逆抑制剂: 非专一性的不可逆抑制剂: (二)可逆抑制作用: 抑制剂以非共价键与酶结合阻遏酶的活性,可以用物理方法除去抑制剂后,酶活力能恢复,二、区别方法 (一)物理方法: (二)动力学方法: 1.酶预先用抑制剂处理后 测定酶活力变化情况: 2.在测活系统中加入抑制剂, 然后加入不同酶量, 测定酶 活力变化情况:,第二节不
2、可逆抑制作用 一. 非专一性的不可逆抑制作用: 1.概念: 2. 非专一性的不可逆抑制剂 酰化试剂:(酸酐,乙酰咪唑,硫代三氟乙酸乙酯,O-甲基异脲) -NH2 NHCO-R R-CO-X + E- -OH E- O CO-R + HX -C6H5-OH C6H5-OCO-R -SH SCO-R,烷化试剂:(2.4-二硝基苯氟,碘代乙酸,碘代乙酰胺等) -NH3 -NH-R -SH -S-R R-X + E -COOH E-COOR + HX - S-CH3 -S (CH3)-R 咪唑基NH -咪唑基N-R,含有活泼双键试剂:(N-乙基顺丁烯二酸抱亚胺(NEMI)、丙烯腈等 亲电试剂:(四硝基
3、甲烷(TNM) 氧化剂: H2O2, NBS等 作用-SH、Trp、吲哚基等 还原剂: ME, DTT等, 作用-S-S-、,二、专一性不可逆抑制剂: (一)Ks型不可逆抑制剂: 1.概念 2.抑制机理 E + I EI EIn 判断Ks型抑制剂作用是否发生在活性部位方法: 化学定量法. 底物、竞争性抑制剂保护方法 酶先可逆失活,再研究KS型抑制情况,(二)Kcat型不可逆抑制动力学 概念:自杀性底物 例如中E.coli中-羟基葵酰硫酯脱水酶 CH3-(CH2)6-CH2-CH(OH)-CO-S-R R = -CH2-CH2-NH-CO-CH3 CH3-(CH2)6-CH=CH-CO-S-R
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- 第七 抑制 作用
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