实验八 鸡红细胞融合.ppt
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1、实验八 鸡红细胞融合实验,一、实 验 目 的 1. 通过PEG介导的鸡血细胞融合实验, 理解体细胞融合原理 2. 掌握利用PEG介导动物细胞融合的实验技术,并观察细胞融合过程。,二、实验原理,细胞融合(cell fusion)或细胞杂交(cell hybridization) 是指真核细胞通过介导和培养,两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程。 目前, 诱导细胞融合的方法有三种:病毒(Okada, 1958)、聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG) (Pontecorvo, 1975)和电激(Zimermann, 1980)。 PEG能改变各类细胞的膜结构,使两细胞
2、相互接触部位的膜脂双层中磷脂分子发生疏散、进而使其结构发生重排,再加上膜脂双层的相互亲合以及彼此间表面张力的作用,引起两个细胞邻接位置的重排质膜在修复时相互合并在一起, 使两细胞的胞质沟通, 从而造成相互接触的细胞之间发生融合。,三、实验用品,1 器材: 离心机,水浴锅,普通光学显微镜;量筒,滴管,刻度离心管,等。 2 材料 :新鲜鸡血,3 试剂,Alsever液,葡萄糖2.05g,拧棱酸纳0.8g,氯化纳0.42g。加重蒸水至100mL 。 0.85%生理盐水 , GKN液:氯化钠8g,氯化钾0.4g,磷酸氢二钠1.77g,磷酸二氢钠0.69g,葡萄糖2g,酚红0.0lg,溶于1000mL重
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