探究性实验一 微生物的培养与应用.ppt
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1、探究性实验一 微生物的培养与应用,课题1、 微生物实验室培养,1培养基概念、培养基的分类、特点和用途,2. 培养基的配制原则和营养构成,3配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤及注意事项,4纯化大肠杆菌的操作过程及注意事项,5对位训练,课题1、 微生物实验室培养 1培养基概念:,人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。,目的要明确:根据微生物的种类、培养目的选择不同的原料配制 培养基 营养要协调:配制培养基时要注意各营养物质的浓度和比例、PH 要适宜,2.培养基的配制原则和营养构成,(1)培养基的配制原则,(2)培养基的营养构成,各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、碳
2、源、氮源 和无机盐。 不同培养基还要满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。,3配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤及注意事项,计算称量溶化灭菌倒平板,倒平板的温度一般在50左右适宜,温度过高会烫手,过低培养基又会凝固。 平板需倒置,这样既可使培养基表面的水分更好地挥发,又可防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。,4纯化大肠杆菌的操作过程及注意事项,在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。,平板划线法、稀释涂布平板法,稀释涂布平板法:,.系列稀释操作(图1):,a将分别盛有9 mL水的6支试管灭菌,并按101106的顺序编号。 b用移液管
3、吸取1 mL培养的菌液,注入101倍稀释的试管中。用手指轻压移液管上的橡皮头,吹吸3次,使菌液与水充分混匀。,c从101倍稀释的试管中吸取1 mL稀释液,注入102倍稀释的试管中,重复b步混匀操作。 以此类推,直到完成最后1支试管的稀释。,.涂布平板操作如图2所示:,对位训练 1有关稀释涂布平板法的叙述中,错误的是( ) A首先将菌液进行一系列的梯度稀释 B然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面 C适宜条件下培养 D结果都可在培养基表面形成单个的菌落,2分析下面培养基的配方:KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、尿素、琼脂。请完成下列问题。 (1)在该培养基的
4、配方中,为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是_和_。 (2)想一想这种培养基对微生物是否具有选择作用?如果具有,又是如何进行选择的?_。,D,答案 (1)葡萄糖 尿素 (2)有选择作用。因为此配方中尿素是唯一氮源,因此,只有能够利用尿素的微生物才能够生长,课题2、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数,1筛选菌株的原理,2统计菌落数目的方法,3细菌分离与计数的实验流程,4该实验中的注意事项,5对位训练,课题2、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数,1筛选菌株的原理,微生物的选择培养:在选择培养基的配方中,把尿素作为培养基中的唯一氮源,原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长。,2统计菌落数目的方法,原理
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