病原体核酸质控物的使用及注意事项.ppt
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1、病原体核酸质控物的使用 及注意事项,张 瑞 卫生部临床检验中心,病原体核酸质控物,HBV DNA液体质控物 (单位:IU/ml),该质控品为液体血清,每支500l,使用时室温放置15分钟使其充分复融,颠倒或漩涡振荡并瞬时离心后使用。,HCV RNA冻干质控物 (单位:IU/ml),病原体核酸质控物,该质控品为冻干血清,每支300l,使用时用DEPC水复溶,室温放置5分钟,漩涡振荡使之充分溶解并混匀,瞬时离心后使用。,病原体核酸质控物,关于定量单位IU/ml和拷贝数/ml的换算请根据不同试剂的检测结果与该质控品的定值进行比对得出,不同试剂的换算系数会有所不同。,IU/ml,拷贝数/ml,WHO,
2、各不同试剂厂家,病毒个数,“检出单位”(detectable unit),假设:PCR反应体系内含有1 拷贝的待测分子即可检出,拷贝数/ml的确定:,DNA/RNA 参考品(质粒等),测量OD260的值得到mg/ml,通过与分子量的计算,得到拷贝数/ml,不同实验室得到的结果差别很大。,HCV国际单位与拷贝数换算,NGI SuperQuant: 1 IU/mL = 3.4 copies/ml (NGI Product License Application to FDA ) Roche Amplicor Monitor v2.0 1 IU/mL = 0.9 copies/ml (Roche M
3、olecular Systems) Cobas Amplicor Monitor HCV v2.0 1 IU/mL = 2.7 copies/ml (Roche Molecular Systems) LCx HCV RNA Quantitative Assay 1 IU/mL = 3.8 copies/ml (Abbott Diagnostics) Bayer bDNA 3.0: 1 IU/mL = 5.2 copies/ml (Bayer Development Group),未知HCV RNA 样本,甲实验室 5000拷贝/ml,乙实验室 10000拷贝/ml,丙实验室 50000拷贝/m
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