生化基础知识简介(李丽媛).ppt
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1、生化基础知识简介,新成生物市场部,目录,朗伯比尔定律 仪器 试剂 试剂评价 校准品 量值溯源 交叉污染 ,朗伯比尔定律,当光线通过均匀而透明的溶液时,一部分被散射或反射,一部分被吸收,只有一部分被透射,透射光与入射光之比,称作透光度(T) 透光度的负对数称为吸光度(A) 朗伯比尔定律是描述溶液对光吸收的定律,表达式为: A=KLC 其中A为吸光度,L为溶液液层厚度或光径(以cm为单位),C为吸光物质的浓度(通常以g/L 或mg/L 为单位),K为吸光度系数。 当液层厚度L以cm为单位,浓度C以mol/L为单位,则吸光系数K常改用摩尔吸光系数表示,其单位为Lmol-1cm-1 在给定条件(入射光
2、波长、溶液的性质和温度等)下,摩尔吸光系数是物质的特征性常数,通过测定已知浓度的溶液的吸光度,可求得值,再通过测定另一部分同种物质的吸光度即可计算另一部分的浓度。,朗伯比尔定律,临床生化检验是一个比对科学,所有的样本均是与校准品比较后得出结果。,临床生化检验是一个完整的检测系统:由仪器、试剂、校准、质控品组成。,仪器的发展,581/721比色计 半自动生化仪 连续流动式生化分析仪:采用“气泡隔离连续分析”原理,由半自动生化分析仪发展而来 离心式生化分析仪:采用离心机的原理,来完成混合、反应、测定的工作 分离式生化分析仪:模仿手工操作,有单通道和多通道之分,也有大中小型仪器之分,是生化分析仪中应
3、用数量最大的一种机型。 模块式:能提供多种组件,有多种配置方式,从而满足不同的要求。此机型已不是一台仪器,而是一套小型的实验室自动化系统,仪器的发展,仪器的发展,速度(T/H):指每小时能报告多少个检测结果。 从每小时100T/H到几千T/H,到模块组合无限扩展,常见生化仪器提供商,进口:日立、罗氏、贝克曼、欧林巴斯、东芝、西门子(拜耳)、雅培、希森美康 国产:迈瑞、迪瑞、科华、丰汇等,全自动生化仪器厂家及型号-国际,HITACHI:7600系列/7180/7170/7100/7080/7060/7020 ;Labspect003/008 ROCHE:MODULAR D/P、COBAS Int
4、egra800/400/311 贝克曼:DXC800/DXC600/LX20/CX9/7/5/4/3 (封闭、开放通道) OLYMPUS:AU5400/2700/680/640/600/400(目前其生化已被贝克曼收购) TOSHIBA:TBA-200/120/40FR Simen-Bayer:ADVIA 2400/1650/1200 ABBOTT:Aeroset C8000/2000 SYSMEX:Chemix 800/180 SHIMADZU:CL-8000/7300/7200 DADE-Behtingcp:Dimension AR/RxL VITALAB:selectra-XL/E 欧宝
5、力霸蓝宝石XL-300600;魅力18002000;SABA18;Bio-systems:A25/A15,全自动生化仪器厂家及型号-国内,深圳迈瑞:BS-1600/800/400/300/200/120 长春迪瑞:CS-1600/800/600/400/300/240 沈阳东软:NSA-270/400/800 赛诺迈德:SUNOAB-3024/1020 科华卓越:350/400 北京松上:A6/A7/A8 南京英诺华:D280/360 优利特:URIT-8000 南京劳拉:FAITH-3000 上海丰汇:FH400 珠海森龙:Senlo 8030/8020/8010/8008,生化分析仪基本结
6、构,样品系统 试剂系统 条形码识读系统 反应系统 清洗系统 比色系统 程序控制系统,生化分析仪基本操作,参数的设置 试剂、校准品的装载 试剂的校准 常规样品的设定 反应曲线的观察 质控的设置,生化试剂的发展,化学试剂自配试剂 手工半自动试剂 干粉试剂 液体单试剂 液体双试剂,生化试剂的发展,液体试剂与干粉试剂比较,生化试剂的发展,双试剂优点: 扣除样本空白的影响(R1多为缓冲液,R2多为启动试剂) 去除内源性干扰物质(R1含与内源性干扰物质反应的物质,R2为启动试剂) 单试剂优点: 单一剂型,使用简便 节约试剂位,节省检测时间 试剂稳定,避免浪费(由于仪器的死腔体积,造成双试剂使用量上的差异,
7、造成不必要的浪费),常见生化试剂提供商,欧美:罗氏(宝灵曼)、贝克曼、西门子(拜耳)、雅培、英国朗道、德国豪迈 日本:希斯美康、欧林巴斯、日本第一化学、日本协和、日本和光(日立配套) 中国:北京中生、上海科华、复星长征、利德曼、北京九强、科美东雅、深圳迈瑞、宁波美康、宁波瑞源、四川迈克、浙江夸克、四川新成等,生化项目常见分类按化学性质分,酶类:ALT、AST、GGT 、LDH、CK、ALP、-GT、AMY、LAP(亮氨酸氨基肽酶)、CHE(胆碱酯酶)、CK-MB、LD-1(乳酸脱氢酶同工酶) 脂类:TC、F-CHO(游离胆固醇)、TG、HDL-C、PL(人胰脂肪酶)、NEFA(游离脂肪酸)、-
8、脂蛋白、LP(a)、BA(胆汁酸)、apoA1、apoB 代谢物类:Urea、UA、Crea、cRT(血清肌酐) 蛋白类:TP、ALB、TTT(麝香草酚浊度)、ZTT(硫酸锌混浊) 胆红素类:TBIL、DBIL 糖代谢类:GLU、SA(唾液酸) 电解质:Ca、IP、Mg、Na、K、Cl 微量元素:Fe、UIBC(未饱和铁结合力) 微量蛋白:-TP、-ALB 免疫蛋白质:CRP、RF、ASO、2-MG、IgG、IgA、IgM、C3、C4、Tf(铁传递蛋白) 其它: AT-(抗凝血酶因子)、FDP(人纤维蛋白原降解产物)、DD(D2-聚体),生化项目分类按临床性质分,肝功能试剂:TBIL、DBIL
9、、TP、ALB、ALT、AST、ALP、GGT、CHE、TBA、ADA、5-NT、PA、AFU、MAO 肾功能试剂:UREA、CREA、UA、CO2、B2-MG、MALB、CYS-C、尿TP 糖类产品:GLU、FMN(GSP)、HBA1C 心肌类产品:LDH、HBDH、CK、CK-MB、HS-CRP 脂类产品:TC、TG、HDL、LDL、APOA1、APOB、LP(a)、HCY 离子类产品:Ca、Mg、P、NA、K、CL、阴离子隙(AG)、Cu、Zn、铅 胰腺类产品:AMY、AMM 其他产品:CSF、CTn、乳酸、丙酮酸、C3/4、IGG/A/M、FER、ASO、RF、CRP、ACP(酸性磷酸
10、酶)、LPS(脂肪酶)、NAG、血浆氨,临床生化检验,临床生化检验是检验医学的重要组成部分,它对疾病的诊断、治疗、预后判断和健康评价等有着十分重要的意义。 随着检验仪器和计算机科学的飞速发展,以及基础医学研究的重大突破,出现了许多新理论、新项目、新技术、新方法,它将临床生化检验推向一个新的高度。,为诊断提供及时的依据 为治疗提供可靠的数据 为病人提供有效的信息 为临床提供完善的服务,临床生化的任务,一个好的医学试验条件,这个试验结果能回答一个医学疑问 根据这个结果能制定一个治疗方案 这个结果的连续报告能观察病情变化 Infus Ther Transfus Med 2001,常见生化项目的临床解
11、释,肾功测定 肝功测定 心肌测定 血脂测定 血糖测定 胰腺测定 自身免疫测定 离子类测定 ,检验项目,Urea 尿素 Crea 肌酐 UA 尿酸 UTP 尿总蛋白 MALB 尿微量白蛋白 2-MG 2-微球蛋白 Cys-C 胱抑素C,肾功组合,肾功能试验,尿素(Urea) 参考范围:2.90-8.20mmol/L。 在正常饮食条件下,血液尿素浓度是肾功能的一项敏感指标。在肌酐浓度发生明显变化前,血液尿素浓度通常已升高,因此监测血液尿素对肾病病程的随访非常有用。 注意:随着人民生活水平的提高,每天摄入的蛋白饮食越来越多,血液正常值上限也应加宽。,肾功能试验,肌酐(Crea) 参考范围: 血清/血
12、浆:104mol/L(男性) 84mol/L(女性) 血液肌酐经肾小球过滤后不被肾小管重吸收,通过肾小管排泄。 在肾病初期血液肌酐通常不升高,直至肾脏实质性损害时血液肌酐才升高。在正常肾血流条件下,肌酐值如升高至176353 umol/L,提示为中度或重度肾损害。所以,血液肌酐对于中晚期肾病临床意义较大。 血液Crea的浓度与肾功能的衰竭程度相关,所以Crea是肾病疗效监控的重要指标。,肾功能试验,尿酸(UA) 参考范围; 男性:208428mol/L 女性:155357mol/L 血尿酸75%由肾排除,25%由消化道排除。肾主要靠远曲小管分泌排除,所以肾小管分泌功能下降时(如有机物中毒)血尿
13、酸升高。各种慢性肾病、肾功能不全、心功能不全(肾血流减少)时血液尿酸增高。另外核酸代谢增加时,如白血病,多发性骨髓瘤,血液尿酸增高。,肾功能试验,尿总蛋白(UTP) 参考范围: 尿液140.0mg/L 脑脊液500.0mg/L 测定尿液中的总蛋白成分,对评价肾脏疾病,如肾炎、糖尿病性肾病等。 医学决定水平 500mg/24h:高于此水平的持续性蛋白尿是肾病的明显证据,在排除良性病因后,建议作肾脏活组织检查,以求确诊。 3000mg/24h:等于或高于此水平,并有浮肿和低蛋白血症者,多可考虑作肾病综合症诊断,若孕妇又合并高血压,则可诊断为子痫前期,之后应密切注意胎儿情况,母体的凝血功能及有否痉挛
14、。 8000mg/24h:达到或高于此值,说明有大量的白蛋白丧失,在肾活检的基础上,应考虑激素治疗,在紧急情况下,静脉输注白蛋白有利于缓解症状。,肾功能试验,尿微量白蛋白(MALB) 参考范围:30mg/24h或20mg/L 在早期肾损害时,微量白蛋白可通过损害的肾小球滤出而排出尿中。 糖尿病人尿中如有微量白蛋白排出,则很大可能性已经是糖尿病性肾病。 对于确诊的肾脏疾病患者来说,大量白蛋白尿(300mg/天)是肾脏转归不良的较强预测因子。,肾功能试验,2-微球蛋白(2-MG) 参考范围: 血清 0.80-2.80mg/L;尿液 0-300g/L, 血2-微球蛋白升高而尿2-微球蛋白正常,主要由
15、于肾小球滤过功能下降,常见于急、慢性肾炎,肾功能衰竭等。 血2-微球蛋白正常而尿2-微球蛋白升高主要由于肾小管重吸收功能明显受损,见于先天性近曲小管功能缺陷,范科尼综合征,慢性镉中毒,Wilson病,肾移植排斥反应等。 血、尿2-微球蛋白均升高主要由于体内某些部位产生过多或肾小球和肾小管都受到损伤,常见于恶性肿瘤(如原发性肝癌、肺癌、骨髓瘤等),自身免疫性疾病(如系统性红斑狼疮、溶血性贫血),慢性肝炎,糖尿病肾病等。老年人也可见血、尿2-微球蛋白升高。此外,使用卡那霉素、庆大霉素、多粘菌素等药也可增高。 糖尿病中应用:血B2-MG能准确反映肾功能情况,有助于早期发现糖尿病肾病。 血液系统疾病中
16、的应用:多种血液疾病如慢性淋巴性白血病,淋巴瘤、多发性骨髓瘤均可见到B2-MG升高。 肿瘤疾病中应用:恶性增生性疾病有B2一MG增高,播散性病变较局限性明显。肿瘤病人B2-MG增高与疾病分期、疗效、病程和预后明显相关,故对疗效估价和预后判断有重要意义。,肾功能试验,胱抑素C(Cys-C) 参考范围:0.51-1.09mg/L Cys-C是反映肾小球滤过功能的理想指标,可广泛应用于所有与肾功能受损相关的疾病GFR的评价与监测: 用于评价GFR的功能 用于肾移植术的监测 用于糖尿病肾病的监测 用于高血压肾病的监测 用于心血管病肾功能监测 用于儿童肾病的判断 用于癌症化疗肾功能监测 用于急性心衰肾功
17、能监测 用于肝硬化的肾功能监测,ALT 丙氨酸氨基转移酶/谷丙转氨酶 AST 天门冬氨酸氨基转移酶/谷草转氨酶 ALP 碱性磷酸酶 GGT -谷氨酸氨基转移酶 TBIL 总胆红素 DBIL 直接胆红素 TP 总蛋白 ALB 白蛋白 PA 前白蛋白 TBA 总胆汁酸 AFU -岩藻糖苷酶 ADA 腺苷脱氨酶,肝功组合,丙氨酸氨基转移酶/谷丙转氨酶(ALT) 参考范围: 男性:540U/L 女性:535U/L ALT非特异性:ALT在心、肝、肾、肌肉中的比例是7.1:44:19:4.8。 在肝损害时,血中ALT增高明显,故是肝损害的一个敏感指标。 急性肝损害诊断建议,认为ALT参考上限10倍可诊断
18、急性肝损害。在ALT300U/L时诊断为急性肝损害的敏感性96%,特异性94%。 另外,在肝胆疾病、传染性肝炎、肝癌、中毒性肝炎、脂肪肝和胆管炎时血清中ALT活性增高。,肝功能试验,天门冬氨酸氨基转移酶/谷草转氨酶(AST) 参考范围:8-40U/L AST和ALT一样广泛存在于心(156),肝(142),肾(99),肌肉(91)中,在人体肝脏中81%AST是线粒体酶,故此酶的释放,表明有组织损害。 急性肝病AST升高不如ALT明显。 慢性肝病AST升高比ALT明显。 中毒性肝炎AST升高更为显著。,肝功能试验,肝功能试验,碱性磷酸酶(ALP) ALP升高是阻塞性肝病的一个敏感指标。在急性肝损
19、伤时很少超过3倍的参考值。所以急性肝损伤是ALT10倍参考值上限,同时ALP3倍参考值上限。肝胆疾病、阻塞性黄疸、急性或慢性黄疸性肝炎、肝癌时血清ALP活性增高。但因为骨病时ALP活性也升高,是非特异性的指标。 参考范围: 女性:112岁 500U/L 15岁以上 40150U/L 男性:112岁 500U/L 1215岁 750U/L 25岁以上 40150U/L,肝功能试验,-谷氨酰氨基转移酶(GGT) 参考范围: 男性:1150U/L 女性:732U/L 在各肝胆疾病时,如原发性肝癌,胰腺癌等GGT显著升高。恶性肿瘤肝转移和肝癌手术后复发时,阳性率可达90%。 嗜酒,安替比林,苯巴比妥,
20、避孕药会使GGT轻度升高。 但是,GGT作为肝癌标志物特异性较差。急性肝炎、慢性肝炎活动期、阻塞性黄疸、胆道感染、胆石症、急性胰腺炎时都可以升高。,胆红素(TBIL&DBIL) 参考范围: TBIL:5.128.0mol/L DBIL:0.010.0mol/L 均被广泛应用于肝功能的筛选检查中,对鉴别黄疸有很大的作用。,肝功能试验,总蛋白(TP) 参考范围:60.085.0g/L 浓度增高,见于血清中水分减少,(呕吐、腹泻、高热、休克,慢性肾上腺皮质功能减退);或血清蛋白合成增加(骨髓瘤); 浓度降低,血浆中水分增加,血浆被稀释,营养不良,消耗增加,合成障碍(肝功受损),体内蛋白丢失(烫伤,肾
21、病综合征等),肝功能试验,白蛋白(ALB) 参考范围:35.055.0g/L 单纯ALB增高少见(严重失水,血浆浓缩)。 ALB降低原因与TP相同, 急性浓度降低主要是急性大量出血或严重烫伤时血浆大量丢失。 慢性由于肝脏合成障碍,腹水形成时血浆丢失,肾病时尿液丢失。,肝功能试验,肝功能试验,前白蛋白(PA) 参考范围:200400mg/L 由肝细胞合成,生理功能是作为组织修补材料和运载蛋白,还具有运载维生素A的作用。 临床意义: 作为营养不良的指标 作为肝功能不全的指标,具有较高的敏感性。 在急性炎症,恶性肿瘤,创伤等任何急需合成蛋白的情况下,血清PA迅速下降,PA是负性急性时相反应蛋白。,总
22、胆汁酸(TBA) 参考范围:0.010.0mol/L 一旦肝细胞发生病变,血中胆汁酸浓度极易升高。一般认为胆汁酸的测定对肝胆疾病的灵敏度和专一性都较高。血清胆汁酸升高常见于急性肝炎、慢性活动性肝炎、肝硬化、肝癌、胆汁淤积酒精肝和中毒性肝胆疾病。 急性黄疸性肝炎:TBA、ALT、AST异常率100%; 慢性重型肝炎:TBA、AST异常率100%; 肝硬化:TBA、ALT、AST分别为100%、40%、94%; 慢性乙型肝炎:TBA异常率重度中度轻度。,肝功能试验,肝功能试验,-岩藻糖苷酶(AFU) 参考范围:40U/L 新生儿遗传性AFU缺乏的鉴别诊断 AFU诊断原发性肝癌特异性90%,阳性率6
23、4%-84% AFU的升高幅度与肿瘤大小无明显关系,病灶3cm病组血清AFU升高的阳性率70-80%,明显高于AFP 肝硬化和急性肝炎病人血清AFU也可升高,但升高的幅度较低, 可用ALT的活性鉴别AFU升高的原因,肝功能试验,腺苷脱氨酶(ADA) 参考范围:25U/L ADA活性是反映肝损伤的敏感指标,可作为肝功能常规检查项目之一,与ALT或GGT等组成肝酶谱能较全面地反映肝脏病的酶学改变。 活性升高,常见于肝炎、肝硬化、血色素沉着症、肿瘤。 阿米巴肝脓肿(ALA),ADA活性明显减少,心肌疾病检测,急性心肌梗塞(AMI)在西方社会是最为常见的一种疾病,在发展中国家也正以惊人的速度增长着。对
24、患者进行成功的治疗、尽量减少心肌细胞损伤的前提是早期的精确诊断,尤其是溶栓治疗发展以后。一直以来,患者的心肌损伤的诊断和评价都依赖于实验室的检验结果。 根据何大一教授的报告,2004年心血管疾病疾病死亡占我国中老年人死亡的33.29%。急早检测有利于AMI的诊断。,WHO制定的AMI诊断标准,二十年前,世界卫生组织(WHO)制定了AMI的诊断标准,下列三组情况必须同时存在两组才能诊断为AMI: 1.有剧烈而持久的胸痛史: 2.明确的心电图改变,包括ST段抬高和异常的Q波出现: 3.系列酶的水平的改变,早期浓度升高,随后恢复正常浓度。 起初选用肌酸激酶(CK)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、和乳
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