糖尿病实验室检查.ppt
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1、糖尿病实验室检查,湖南省人民医院内分泌科 张 弛,主要内容,反映血糖水平的检查 胰岛细胞功能检查 并发症检查 病因学分类的检查,反映血糖水平的检查 血糖测定 尿糖测定 口服葡萄糖耐量试验(OGTT) 静脉葡萄糖耐量试验(IVGTT),糖化血红蛋白(HbA1c) 果糖胺(FA),胰岛细胞功能检查 血浆胰岛素浓度测定 血C肽测定 胰岛素释放试验 C肽释放试验,胰岛细胞功能检查 胰高血糖素-胰岛素-C肽兴奋试验 精氨酸刺激试验 甲苯磺丁脲(D860)试验 稳态模型(HOMA) 细胞功能指数,葡萄糖钳夹技术 正常血糖胰岛素钳夹技术:评价胰岛素敏感性 高血糖钳夹技术:评价细胞功能,并发症检查 急性并发症
2、:血酮、尿酮、电解质、血气分析、血乳酸测定 慢性并发症:肝功能、肾功能、血脂、心、肝、肾、脑、眼科、神经系统各项检查,病因学分类检查 胰岛自身抗体:、IA-2、 型糖尿病易感基因 型糖尿病易感基因,2011年ADA糖尿病的诊断标准: 1、 Hb A1C6.5%。(实验室应采用经NGSP认 可并符合DCCT检测标准的方法进行检测) * 或 2、空腹血糖(FPG)7.0 mmol/L(126 mg/dl)。 (空腹的定义是指至少 8小时未摄入热卡) * 或,3、 OGTT试验2h血糖11.1 mmol/L(200 mg/dl) (试验应按照世界卫生组织(WHO)推荐的方法执行,将75 g无水葡萄糖
3、溶于水中作为糖负荷)* 或 4、有高血糖的症状或高血糖危象,且随机血糖11.1 mmol/L(200 mg/dl)。 *如无高血糖症状,标准中的第13项应进行复查。,一、HbA1c的结构和形成机制,HbA1c的形成原理,GHb是葡萄糖分子和血红蛋白A 某些特殊部位分子经缓慢而不可逆非酶促反应而形成的产物。 在红细胞中,葡萄糖的摄取无需胰岛素介导, 其细胞内葡萄糖浓度随血糖的升高而升高, 很快与血浆葡萄糖水平达到平衡。 葡萄糖最初与HbA的链-N端的缬氨酸残基发生氨基反应,迅速以共价健形成醛亚胺化物,其性质不稳定,可逆,但逆反应速度较正反应慢。 醛亚胺经脱水,分子重新排列,通过酮氨基和葡萄糖连接
4、, 成为氨基酮化合物,其性质稳定,此反应不可逆,。 红细胞内糖化血红蛋白水平随红细胞暴露于高血糖的时间和高血糖的程度有关。,血红蛋白的糖基化,Glucose enters red blood cells where it reacts with the hemoglobin,成人糖化和非糖化的血红蛋白,Adult Hb,Fetal Hb,Non- glycated,Glycated,HbA1c 形成的动力学,寿命:120 days. 50% 的HbA1c值与过去30天内的平均血糖水平相关 40%的HbA1c值与过去31 90 天平均血糖水平相关. 只有10% HbA1c 与 过去91 120天
5、平均血糖水平相关.,平均血糖水 平,(mg/dl),糖化血红蛋白水平,(%),糖化血红蛋白每变化1% 所对应的平均血糖的变化为30mg/dl.,记住餐前和餐后血糖对HbA1c的相对影响,若HbA1c 10.2% (参考DCCT) 70% HbA1c 源于空腹血糖 30% HbA1c 源于餐后血糖 若HbA1c 7.3% (参考DCCT) 70% HbA1c 源于餐后血糖 30% HbA1c 源于空腹血糖 若HbA1c 7.3-8.4% (参考DCCT) 空腹和餐后血糖各占50%,二、HbA1c的测定方法和影响因素,检测方法,阳离子交换树脂微柱层析法 HPLC 电泳法 亲和色谱微柱法 放免法 免
6、疫比浊法 免疫竞争抑制法,微柱内的阳离子交换树脂是目前国内应用较为广泛的方法。在PH近7时树脂解离后带阴电荷,而Hb解离后带阳电荷,二者可形成离子键。由于GHb的阳电荷比HbA少,与树脂的结合力相对低,容易被洗脱。用分光光度计分别测定洗脱液中GHb和溶血物中总Hb的吸光率(A),可计算出GHb占总Hb的百分比()。,HPLC方法,目前HPLC法测定HbA1c使其准确性和重复性得到很大的提高。美国 临床化学协(AACC)糖化血红蛋白标准化分会和IFCC HbA1C标准化工作组建议,HPLC方法可作为检测糖化血红蛋白的金标准,希望以此使大多数的实验方法能够参照“指定的方法”实现标准化。 糖化血红蛋
7、白自动分析仪采用离子交换HPLC法测定HbA1c,利用能交换离子的材料为固定相来分离离子型化合物的方法。 该法直接测定全血HbA1c,其批内和批间变异系数CV均可以小于1%(CV 1%),结果比较精确, 检测结果不受存在的变异型血红蛋白及其衍生物的影响,特别适合于糖尿病人的监控。,影响因素,血红蛋白分子病、地中海贫血、溶血性贫血、怀孕等红细胞寿命缩短,从而糖化血红蛋白的量降低; 肾功能不全、慢性酒精中毒等减慢HB的代谢,使其寿命延长,从而使糖化血红蛋白的量增加。,三、 HbA1c与糖尿病慢性并发症,Stratton IM et al. BMJ 2000; 321:405412.,HbA1c 升
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