非发酵菌.ppt
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1、非发酵菌,及检验,非发酵菌及检验,非发酵菌(nonfermenters)是指一群不能利用或仅以氧化形式利用糖类, 生化特性十分相近的革兰阴性无芽胞杆菌。 括多个菌属,主要有:假单胞菌属 不动杆菌属 产碱杆菌属 莫拉菌属 黄杆菌属,分群依据: 1. 氧化酶试验阳性(不动杆菌及个别假单胞菌为阴性) 2. 葡萄糖氧化/发酵(O/F):应开管产酸,闭管不变。 3. 动力:大多为专性需氧菌,半固体上动力不明显(动力观察应在30或室温1224小时培养物悬滴法为准或以鞭毛染色鉴别) 4. 麦康凯培养基上生长:可分群 见表,菌 属 氧化酶 葡萄糖 O/F 悬滴动力 触媒 硝酸盐还原 麦康凯上生长,假单胞菌属
2、+ O / - + + + / - + 不动杆菌属 - O / - - + - + 产碱杆菌属 + - + + + / - + 莫拉菌属 + - - + + / - + 黄杆菌属 + O / F - + - + / -,非发酵菌主要菌属的生化反应,广泛存在于自然界的空气、水和土壤中。种类多达200余种,大多数为条件致病菌。 革兰阴性,直或微弯曲,大多有鞭毛(单鞭毛或单端丛毛),无芽胞,专性需氧。,第二节 假单胞菌属 (Pseudomonas),为假单胞菌的代表,为条件致病菌,也是医院感染的常见病菌之一。 (一)生物性状 1、形态染色性:革兰阴性菌杆,呈球杆状或长丝状,长短不一,单个或短链排列。
3、无芽胞,无荚膜,单端有鞭毛13根,运动活泼。,铜绿假单胞菌 (P.aeruginosa),培养特性: 专性需氧,4不长,42可生长。 血平板:常见透明溶血环 普通平板:可产多种色素,主要有:绿脓素(兰绿色,可溶于水)和荧光素(只溶于水)。从临床标本中分离的菌株大多产生此色素,麦康凯上可形成5种不同形态的菌落: 典型型:灰绿色,大小不一,扁平湿润,边缘不齐,表面可见金属光泽。 大肠菌群型:圆形凸起,灰白色半透明。 粗糙型:菌落中央凸起,边缘扁平,表面粗糙。 侏儒型:细小无光泽,半透明菌落 粘液型:光滑凸起呈粘液状,生化反应: 氧化酶,O/F上能氧化分解葡萄糖、木糖产酸、精氨酸双水解酶,枸橼酸盐,
4、硝酸盐。 抵抗力:较强,临床分离株对多种抗生素耐药,(二)致病性: 可产生多种致病物质:内毒素、外毒 素、菌毛、荚膜、胞外酶和溶血物质 除自然界外,也存在于人体皮肤上及与外界相通的腔道中。 多为继发感染,如烧伤后的创面感染,也可引起肺炎、脑膜炎、尿道感染,严重时可引起败血症,死亡率甚高。,(三)微生物学检验 1、标本采集:血液、脑脊液、胸腹水、尿液、痰液、脓汁等。医院环境监控:可采空气、水、物体表面等。 2、检验程序 3、检验方法: (1)直接镜检: (2)分离培养:血液和体液可先增菌,再转种血平板和麦康凯平板分离;脓汁、分泌物、尿可直接种于上述培养基分离培养。,(3)鉴定:根据菌落特征、色素
5、、生姜气味、菌体形态、氧化酶试验等作出鉴定。对无色素的菌株应与其他假单胞菌鉴别。,脑脊液、胸腹水、脓汁、痰、尿液,分 离 培 养血、麦康凯,直接涂片染色,血液体液,粪 便,分 离 培 养SS、麦康凯,初步鉴定,菌落特征,色 素菌体形态、氧化酶,最后鉴定,生化反应,血清学噬菌体,分型:,增 菌 营养肉汤,铜绿假单胞菌的检验程序:,铜绿假单胞菌的鉴定要点及与其他假单胞菌的区别,试 验,铜绿假单胞菌,荧光假单胞菌,恶臭假单胞菌,斯氏假单胞菌,嗜麦芽假单胞,鼻疽假单胞菌,类鼻疽假单胞,氧化酶 / 荧光素 / / 青脓素 / / / 动力 葡糖氧化 乳糖氧化 蔗糖氧化 木糖氧化 赖氨酸脱羧酶 精氨酸水解
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