3酶类药物及其生产工艺.ppt
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1、常见的酶类药物及治疗作用,常见酶类药物,1、L-天门冬酰胺酶工艺路线,L-天门冬酰胺酶工艺说明 菌种培养 大肠杆菌37培养24h普通牛肉培养基; 种子培养 16玉米浆,接种量 1 1.5,37,通气搅拌培养 48h; 发酵罐培养 玉米浆培养基,接种量 8,37通气搅拌培养 6 8h,离心分离发酵液,得菌体,加2倍量丙酮搅拌,压滤,滤饼过筛,自然风干成菌体干粉;,提取、沉淀、热处理 每千克菌体干粉加入0.01 mol/LpH8的硼酸缓冲液10L37搅拌1.5h,308mol/L醋酸调节pH4.24.4,压滤,滤液加入2倍体积的丙酮,放置34h过滤,收集沉淀,自然风干,得干粗酶。 取粗制酶,加入0
2、3甘氨酸,调节pH8.8搅拌1.5h离心,上清液6030min热处理。上清液加 2倍体积的丙酮,析出沉淀,离心,收集酶沉淀,0.01mol/L,pH8磷酸缓冲液溶解,离心得上清酶溶液。,精制、冻干 调节pH8.8离心弃去沉淀,清液再调 pH7.7加入50聚乙二醇,浓度达到 16。2 5放置 4 5天,离心得沉淀。蒸馏水溶解加 4倍量的丙酮沉淀,同法反复 1次,pH6.4,0.05mol/L磷酸缓冲液溶解,50聚乙二醇处理 1次,即得无热原的 L一天门冬酸胺酶。溶于 0.8mol/L磷酸缓冲液,在无菌条件下用 6号垂熔漏斗过滤,分装,冷冻干燥制得注射用 L一天门冬酸胺酶成品,每I支 1万或 2万
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- 类药物 及其 生产工艺
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