液相色谱检测器的介绍-实验室.ppt
《液相色谱检测器的介绍-实验室.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《液相色谱检测器的介绍-实验室.ppt(32页珍藏版)》请在三一文库上搜索。
1、1/32,液相色谱检测器的介绍,2/32,检测器,是高效液相色谱仪的核心部件,他负责把色谱柱分离出来的各组分快速、准确的检测出来,实行定量、定性分析。,3/32,检测器的分类,1.紫外检测器(UV) 2.光电二极管阵列检测器(PDA) 3.荧光检测器(FD) 4.示差检测器(RI) 5.蒸发光散射检测器(ELSD) 6.纳克级激光计数检测器(NQAD),4/32,用于HPLC的检测器,没有任何一种单独的检测器可以适应所有的液相色谱分离! HPLC检测器可以分为: 溶质性质检测器(选择型) 对溶质的物理或化学性质响应,一般不反应流动相的变化(选择型) 整体性质检测器(通用型) 不管是否有溶质,对
2、流动相任何物理性质的变化作出响应(通用型),5/32,理想的HPLC检测器,高灵敏度;可忽略的基线噪音 宽的线性范围 独立于流动相及操作参数的响应 对压力、温度及流速等变化不敏感 长时间操作的稳定性 低死体积 非破坏性 选择性,6/32,灵敏度:信噪比,灵敏度是信号与噪音的比值;即峰高与基线噪音的比值(S/N) 检测限(LOD):S/N = 3 定量限(LOQ):S/N = 10 好的信噪比有利于: 更好的色谱峰确认 更好的定量 更好地完成色谱峰纯度/均一性,6:1,N,S,7/32,选择液相色谱的检测器,要考虑的因素: 你要分离的化合物/样品的化学特性 化学结构、分子量及紫外光谱等等 流动相
3、的影响(溶剂、缓冲盐改性剂等) 梯度还是等度 灵敏度需求 是否有双检测的需求,8/32,紫外可见吸收检测器,紫外可见吸收检测器是HPLC分析中最常见的检测器,几乎所有的液相仪器都配有这种检测器,属于选择性检测器,9/32,紫外检测原理,原理:基于被分析组分对特定波长紫外光的选择性吸收 优点:1)对温度和流速不敏感 2)可用于梯度洗脱 3)灵敏度较高,ng级检测 4)费用相对低廉 5)易于操作,可靠性强 缺点:选择性检测器,仅适用于测定有紫外吸收的物质,10/32,紫外检测的应用,大多数有机化合物有一定程度的吸光度,可以测定大多数的化合物,是目前实验室中使用最多的检测器 -多数公司售出的检测器中
4、75%以上是吸光度检测器(其中50%以上是紫外/可见检测器,25%是PDA),11/32,光电二极管阵列检测器 (Photo Diode Array),Photo Diode Array 简称:PDA或DAD,12/32,原理:检测器的接收是由一组光电二极管(数量由35-1024个不等)接收,并转换为电信号。光电二极管的排列(数字分辨)和狭缝宽度(光学分析)决定了检测器的全波长分析能力。,光电二极管阵列检测器原理,13/32,光电二极管阵列检测器特点,一种三维水平的吸光度检测器-采集三维谱图 兼顾紫外检测器及可见分光光度计的信息 在收集色谱图的同时,得到光谱图 提供许多有用的功能 -色谱峰的纯
5、度鉴定,色谱峰的确认 -可以发现单波长检测时未测到的峰 -任意波长的色谱再处理 -光谱信息-光谱库的建立检索和拟合,14/32,优点:灵敏度比紫外检测器高,噪音低,线性范围宽,对流速和温度的波动不灵敏,适用于梯度洗脱及制备色谱 局限:对紫外吸收差的化合物灵敏度很低,紫外吸收大的溶剂不能做流动相,15/32,新增PDA检测器,16/32,灵敏度更高!,17/32,通信 相关,网线连接:设置相对应IP地址 35900E: PDA信号通过35900E传送给电脑,操作软件:Ezchrom for Shiseido OpenLAB EE PDA,18/32,荧光(Fluorescence)检测原理,原理
6、:发荧光的化合物吸收光(UV或VIS)使其分子达到激发态,当其返回到基态时发射光的现象即荧光 优点: 1)荧光检测器灵敏度高, pg级检测 2)受流速温度变化影响较小 缺点:1)不是所有化合物都有荧光,必要时需要衍生 2)线性范围窄 3)衍生方法复杂,19/32,荧光检测器的应用,环境中的污染物 多环芳烃(PAH),多酚,氨基甲酸酯等 食品、饮料 食品中的毒素;例如:黄曲霉毒素 染料 维生素及衍生氨基酸 生物技术及制药,氨基甲酸酯类杀虫剂,黄曲霉毒素,多环芳烃(PAH),维生素,20/32,示差折光(Refractive Index)检测,示差折光检测器(RI)是第一个商品化的液相色谱检测器(
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 色谱 检测器 介绍 实验室
链接地址:https://www.31doc.com/p-3447366.html