气相色谱仪和液相色谱仪的使用.ppt
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1、气相色谱仪和液相色谱仪的使用,毕业实习系列教学内容之八,第一节 色谱法概述,一、 色谱法的特点、分类和作用 1.概述 2.分类 3.特点 二、气相色谱分离过程 1.气相色谱分离过程 2.分配系数 K,一、 色谱法的特点、分类和作用,1.概述 俄国植物学家茨维特在1906年使用的装置: 色谱原型装置,如图。 色谱法是一种分离技术, 试样混合物的分离过程也就是试样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行着的分配过程。 其中的一相固定不动,称为固定相; 另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体(气体或液体),称为流动相。,(动画),色谱法,当流动相中携带的混合物流经固定相时,其与固定相发生相互作
2、用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异,与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同,随着流动相的移动,混合物在两相间经过反复多次的分配平衡,使得各组分被固定相保留的时间不同,从而按一定次序由固定相中流出。与适当的柱后检测方法结合,实现混合物中各组分的分离与检测。 两相及两相的相对运动构成了色谱法的基础,(动画),2.色谱法分类,气相色谱:流动相为气体(称为载气)。 按分离柱不同可分为:填充柱色谱和毛细管柱色谱; 按固定相的不同又分为:气固色谱和气液色谱,液相色谱,液相色谱:流动相为液体(也称为淋洗液)。 按固定相的不同分为:液固色谱和液液色谱。 离子色谱:液相色谱的一种,以特制的离子交换树脂
3、为固定相,不同pH值的水溶液为流动相。,其他色谱方法,薄层色谱和纸色谱: 比较简单的色谱方法,凝胶色谱法: 超临界色谱: 高效毛细管电泳: 九十年代快速发展、特别适合生物试样分析分离的高效分析仪器。,3.气相色谱法的特点,(1)分离效率高: 复杂混合物,有机同系物、异构体。手性异构体。 (2) 灵敏度高: 可以检测出g.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物质量. (3) 分析速度快: 一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。 (4) 应用范围广: 适用于沸点低于400的各种有机或无机试样的分析。 不足之处: 不适用于高沸点、难挥发、热不稳定物质的分析。 被分离组分的定
4、性较为困难。,二、气相色谱分离过程,气相色谱分离过程是在色谱柱内完成的。 填充柱色谱: 气固色谱和气液色谱,两者的分离机理不同。 气固色谱的固定相: 多孔性的固体吸附剂颗粒。 固体吸附剂对试样中各组分的吸附能力的不同。 气液色谱的固定相: 由 担体和固定液所组成。 固定液对试样中各组分的溶解能力的不同。 气固色谱的分离机理: 吸附与脱附的不断重复过程; 气液色谱的分离机理: 气液两相间的反复多次分配过程。,气相色谱分离过程,当试样由载气携带进入色谱柱与固定相接触时,被固定相溶解或吸附。 随着载气的不断通入,被溶解或吸附的组分又从固定相中挥发或脱附, 挥发或脱附下的组分随着载气向前移动时又再次被
5、固定相溶解或吸附。 随着载气的流动,溶解、挥发,或吸附、脱附的过程反复地进行。,分配系数 K,组分在固定相和流动相间发生的吸附、脱附,或溶解、挥发的过程叫做分配过程。在一定温度下,组分在两相间分配达到平衡时的浓度(单位:g / mL)比,称为分配系数,用K 表示,即:,分配系数 K的讨论,一定温度下,组分的分配系数K越大,出峰越慢; 试样一定时,K主要取决于固定相性质; 每个组份在各种固定相上的分配系数K不同; 选择适宜的固定相可改善分离效果; 试样中的各组分具有不同的K值是分离的基础; 某组分的K = 0时,即不被固定相保留,最先流出。,液相色谱仪(1),液相色谱仪(2),液相色谱仪(3),
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