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1、八角表型多样性及种质资源的A F L P 研究 摘要 本研究采用线路踏查、设立样地观测形态特征的方法调查分析了八角 品种( 类型) 的表型多样性,利用荧光A F L P 分子标记技术对来自3 个地 方的4 7 个八角品种( 类型) 和7 个八角科植物种类进行遗传多样性研究, 并对分子标记所选八角品种或类型的4 7 株样株进行形态学标记,结果表明: 1 八角表型多样性丰富,花、果、叶、分枝习性差异显著。经方差分 析,叶片长度、宽度、叶柄长、厚度、长宽比、重量等7 个性状均达到极 显著差异水平,变异系数从d , N 大依次为:叶厚 F o o l = 1 7 1 ,P = 7 9 2 E - 5
2、5 F o 0 l = 1 7 1 ,P - - 3 9 9 E 4 8 F o o l = 1 7 1 ,P = I 6 9 E 2 5 F o o l = 1 7 1 ,P = 5 2 1 E 3 2 F 0 0 1 = 1 7 1 ,P - = 2 7 3 E 5 9 F o - o l = 1 7 1 ,P = 3 5 6 E 5 4 F o 0 1 = 1 7 1 ,P = 5 2 6 E 5 0 0 0 1 ) ,样地不同样株间叶长宽比差异极显著。 通过方差分析,得出叶长、叶宽、叶柄长、叶厚、叶面积、叶重、叶长宽比的差异 均极显著,八角表型多样性丰富。叶面积在上述表型特征中叶面积差
3、异最显著,叶面积 与叶片长、宽、形状多因素有关,更能体现八角的变异程度。计算7 个数量性状的变异 系数,其幅度从1 1 6 3 2 8 3 5 ,变异系数最大的是叶面积,最小的是叶厚。各性状 的变异系数从小到大依次为:叶厚 叶柄长 叶宽 长宽比 叶长 叶重 叶面积。可 见,叶面积与叶重的变异系数最大,均在2 5 0 以上,说明这2 项的表型性状差异较大。 表3 - 3 不同性状变异系数表 T a b 3 3T h ev a r i a t i o nc o e 塌c i e n to fd i f f e r e n tt r a i t s 1 6 广西大掌硕士掌位论文 ,角表型多样性及种质
4、资源的A F L P 研究 3 1 2 分枝习性差异分析 3 1 2 1 八角分枝差异分析 分枝角度受遗传特性的影响,不同八角品种分枝角度不尽相同。在调查中发现有的 八角分枝角度达4 5o ,有的八角分枝角度不足1 5o ,差异性较大。枝形比例是反映八角 树形和分枝习性的一个重要指标。经调查八角分枝习性有明显的差异性,有硬枝类型、 柔枝类型、普通类型,分别为5 5 6 、2 7 8 、1 6 7 ,分枝类型以硬枝类型为主。 表3 - 4 不同样地八角枝型比例 T a b 3 - 4T h ep r o p r o t i o no fb r a n c h t y p ea td i f f
5、e r e n tp l o t 3 1 2 2 八角新梢差异分析 表3 - 5 不同样地八角新梢数据分析 T a b 3 - 5A n a l y s i so fy o u n gs p r o u td a t ei nd i f f e r e n tp l o t 样株号1 年等嫩枝长新梢芋部直径样株号1 年等嫩枝长新梢芋部直径 c m,C mc mc m 1 16 90 4 1 04 43 50 4 7 2 1 23 10 3 1 05 13 80 3 5 4 1 33 90 3 6 25 - 23 60 4 0 6 1 42 30 2 4 05 330 3 6 8 l - 53
6、10 3 3 25 42 60 3 7 8 1 石3 90 4 1 6 6 一l2 7 0 3 3 0 2 13 40 3 2 66 - 23 30 2 8 4 2 - 2 。4 2 0 3 6 66 - 33 60 3 2 4 2 3 3 8 0 3 6 4 6 4 6 10 2 4 6 2 - 44 60 3 8 86 - 53 2O 3 1 2 2 5 3 1 0 3 4 66 石4 8 0 3 9 2 2 - 6 4 2 0 4 2 4 6 7 4 20 3 9 6 3 1 2 4 0 2 8 46 88 4 O 3 1 4 3 2 2 7 0 2 9 86 96 4 0 3 5 6
7、1 7 、角表型多样性及种质资源的A F L P 研究 续表3 - 5 样株号1 年等嫩枝长新梢季部直径 样株号1 年等嫩枝长新梢葶部直径 c mc mc mc m 3 3 3 90 4 0 26 1 040 3 2 8 3 - 4 3 60 3 5 6 X i 平均值 3 9 20 3 5 6 3 53 60 4 0 2最大值8 40 4 7 4 4 13 80 3 0 2 最小值 2 30 2 4 0 4 24 50 4 7 4 相对极差 1 5 60 6 6 4 33 O0 4 0 8 不同样株间新梢长度相对极差为1 5 5 6 ,不同样株间新梢基部粗度相对极差为6 6 。根据( 变异系
8、数= 标准差平均值) ,得出1 年生嫩枝长变异系数为3 2 9 8 ,新梢基 部直径变异系数为1 5 5 8 ,新梢长度差异要大于基部直径。此外,在调查中发现新梢 颜色具有差异性,有红色、淡红色、嫩绿色,说明不同八角树新梢颜色具有差异性。 3 1 3 八角花色差异分析 据调查八角花各组成部分均发育正常,未发现有如花败育等异常现象。花色主要有 红花、淡红花、米黄色花、白花4 种。其中淡红花的花色又有局部花瓣淡红至全花瓣淡 红色的变化差异且颜色深浅变化大,变异较大。4 种花色所占比例依次为4 8 7 、5 0 3 、 0 3 、0 7 ,以红花和淡红花为主。 3 1 4 八角果实差异分析 3 1
9、4 1 八角果瓣数差异分析 表3 - 6 不同果实果瓣数分析 T a b 3 - 6A n a l y s i st h en u m b e ro ff r u i ta n g l e 由表中可以看出不同果实果瓣数有所变化,有7 、8 、9 、1 0 、1 1 、1 2 、1 3 等7 种瓣数, 但以8 瓣为主,占7 2 9 。 3 1 。4 2 八角果形差异性分析 八角果形先端喙圆钝至钝形,在调查中我们发现不同八角品种果实常具有不同果 形。果实形状按果瓣数来区分可以分为8 枚、多枚( 多于8 枚) ;按果尖形状区分可以 分为渐尖向内勾曲( 弯曲) 形似鹰嘴,无果尖;按果实整体形状区分可以
10、分为肥大正形、 1 8 广西大肖昀页士掌位论文 角表型多样性及种质资源的A F L P 研究 瘦小不匀、肥大不匀、瘦小正形;按果瓣排列形状区分可以分为规则排列、堆积状着生 在果柄基上、规则星状排列。 1 9 、角表型多样性及种质资源的A F L P 研究 3 2A F L P 分子标记结果与分析 八角科植物在表型( 树形、枝、干、叶、花、花粉、果实) 方面也存在很大的相同 性、相似性,本科植物在分类上存在相当大的困难。本次研究亦试图尝试使用分子标记 的方法进行八角科的种类鉴别,因此从中国林科院华南植物园采取了8 份八角科植物样 品,从广西南宁市武鸣县采集1 份样品,与4 7 份八角样品一并进行
11、A F L P 分子标记研 究,分析该技术能否为八角科的分类鉴别研究提供依据。7 个八角科植物种类分别为: 红花八角I l l i c i u md u n n i a m o nT u t c h ( 华2 1 、华2 2 ) 、宽叶八角I l l i c i u md u n n i a n u mT u t c h v a r 1 a t i f o l i u mQ L i n ( 华3 ) 、莽草I l l i c i u ml a n c e o l a t u mA C S m i t h ( 华4 、华7 ) 、小 花八角( 华5 ) 、增城八角I l l i c i u mt
12、 s a n g i iA C S m i t h ( 华6 ) 、披针叶八角I l l i c i u m l a n c e o l a t u mA C S m i t h ( 华披) 、地枫皮I l l i c i u md i f e n g p iK I B & K I M e XB N C h a n g ( 地1 ) 。 3 2 1 样品来源及编号 本研究采集八角品种或类型样品4 7 份,其中高峰林场1 5 份样品,派阳山林场1 5 份样品,六万林场1 7 份样品;另外从中国林科院华南植物园采取了8 份八角科植物样 品,从广西南宁市武鸣县采集1 份样品,共7 种八角科树种。来源
13、及编号见下表3 7 。 表3 7 试验材料及来源 T a b 3 - 7E x p e r i m e n tm a t e r i a l sa n dt h e i ro r i g i n 编号名称来源地 编号名称来源地编号名称来源地 N o N a m e O r i g i n N o N a m e O r i g i n N o N a m e o r i g i n C 1高l广西南宁 C 2 0 六A 2广西玉林 C 3 9 派B l广西崇左 C 2 高2广西南宁 C 2 1 六A 3广西玉林 C 4 0 派B 6广西崇左 C 3高3广西南宁 C 2 2 六A 5广西玉林 C
14、 4 1 派B 7广西崇左 C 4 高4广西南宁 C 2 3 六A 6广西玉林 C 4 2 派B 9广西崇左 C 5 高5广西南宁 C 2 4六A 7 广西玉林 C 4 3派B 1 0 广西崇左 C 6高6 广西南宁 C 2 5 六A 8广西玉林 C 4 4 派B 1 1广西崇左 C 7 高7广西南宁 C 2 6六B l 广西玉林 C 4 5 派特1广西崇左 C 8高8广西南宁 C 2 7 六B 2广西玉林C 4 6 派2广西崇左 C 9 高9广西南宁 C 2 8 六B 4 一广西玉林 C 4 7派7 8 一 广西崇左 C 1 0 高1 0广西南宁 C 2 9 六B 5广西玉林 C 4 8 华
15、2 1广东广州 C 1 1 高1 1广西南宁 C 3 0 六B 6 广西玉林 C 4 9 华2 2广东广州 C 1 2 高1 2广西南宁 C 3 1 六B 7广西玉林 C 5 0 华3广东广州 C 1 3高1 3广西南宁 C 3 2 六B 8广西玉林C 5 1华4广东广州 2 0 广西大掌硕士学位论文,角表型多样性及种质资源的A F L P 研究 续表3 7 编号名称来源地编号名称来源地编号名称来源地 N o N a m e O r i g i n N o N a m e O r i g i n N o N a m e o r i g i n C 1 4高1 4广西南宁 C 3 3 派A 1广
16、西崇左 C 5 2 华5广东广州 C 1 5 高1 5广西南宁 C 3 4 派A 2广西崇左 C 5 3 华6广东广州 C 1 6六l广西玉林C 3 5派A 5广西崇左 C 5 4 华7广东广州 C 1 7 六2广西玉林 C 3 6 派A 7广西崇左 C 5 5 华披广东广州 C 1 8 六3广西玉林 C 3 7 派A 8广西崇左 C 5 6 地l广西武鸣 C 1 9六A 1广西玉林C 3 8派A 1 0广西崇左 3 2 2A F L P 体系优化 通过C T A B 法成功提取出5 6 份八角样品D N A ,按照预先的设计方案,对A F L P 体系的 条件进行筛选,最终得到优化了的A F
17、 L P 反应体系。 表3 8 酶切连接、预扩增和选择性扩增的优化体系 T a b 3 8T h es u i t a b l es y s t e m so f r e s t r i c t i o n 、p r e a m p l i f i c a t i o na n ds e l e c t i v ea m p l i f i c a t i o n 2 1 i , 。鞭 麓。 荔 _ z 一 雌 一 t, 4 二i4 !j :。?l : i 鬈 。g一 t 鱼载巍盘一点。施型红幺。丝_ 勉;奠盔4 出菱互照 孱垡热垒。女 垒= l 盛坐塾逸,二瑟藏。星世! ,。二。垒,丝篓。簇
18、。塾、i 塞。差。竺墨。生。笙兰坐出三兰三_ 羔丝丝:丝 I “* 十 p , F 广西大掌硕士掌位论文角表型多样性及种质资溺E 的A F L P 研究 所筛选的6 对引物共扩增得到9 8 9 条带,其中多态性带为9 8 8 条,多态性比率达到 了9 9 9 0 ,平均每对引物产生1 6 4 8 3 条带( 见表3 2 1 ) 。其中:引物P G T G M C A A 扩增效率最高,共产生1 9 4 条带。引物P G A G M C A A 、P G A G M C A G 、P G T C M C T A 、 P G T G M C A A 、P G T G M C A A 多态性比率均为
19、1 0 0 ,P G T C M C T G 多态性比率为 9 9 3 4 。 表3 96 对引物扩增结果 T a b 3 - 9A m p l i f i e dr e s u l tw i t h9p r i m e rp a i m 6 对引物共扩增得至U 9 8 9 条带,其中特征带( 某品种独有) 就有2 0 9 条( 表3 9 、3 1 0 ) ,占 扩增总带数的2 1 1 3 ,特征带大小一般在7 0 5 0 0b p 之间。5 6 个样品中有4 5 个找到了 特征性条带,C 2 1 最多为2 4 条,其次是C 6 为1 6 条,C 2 、C 3 3 、C 5 2 为1 2 条,
20、C 2 3 、C 2 4 、 C 3 2 、C 4 3 、C 4 4 、C 4 6 、C 4 7 也较多。这些特征性条带在八角种或品种( 类型) 鉴别中 具有重要意义,本试验中有1 1 个样品未找到特征带( 其中八角科植物3 个,八角品种或 类型8 个) ,相信随着筛选引物的增多,所有样品都可以找到特征条带。 广西大学硕士学位论文角表型多样性及种质资源的A F L P 研究 表3 1 0 不同种或品种多态性条带 T a b 3 1 0T h ep o l y m o r p h i cb a n d so f p o l y m o r p h i cb a n d so f d i f e
21、r e n ts p e c i e so rc u l t i v a r s 郎P o 瓣l y m o r p h i 数e 鼋P e 薹r c e n t a g eo ;f 琴U n i q u e “P o 攀l y m o r p h i 数c 茎橥霎 b 矗d s 厩 b a n d s C 12 8 62 8 9 22C 3 01 8 21 8 4 00 C 21 8 01 8 2 01 2C 3 12 2 02 2 2 4 3 C 31 7 7 1 7 9 02C 3 22 0 l2 0 3 2 7 C 4 2 4 8 2 5 0 85 C 3 32 5 32 5 5 81
22、 2 C 52 5 62 5 8 82C 3 41 9 31 9 5 1 2 C 61 8 01 8 2 01 6C 3 52 2 02 2 2 41 C 71 8 41 8 6 0lC 3 61 6 51 6 6 8l C 82 1 02 1 2 35C 3 72 2 22 2 4 5 3 C 91 6 l1 6 2 83C 3 82 7 52 7 8 l2 C 1 01 4 01 4 1 63C 3 92 4 02 4 2 7l C ll 1 4 5 1 4 6 6lC 4 01 9 92 0 1 2O C 1 2 1 4 31 4 5 0 2 C 4 1 2 5 0 2 5 2 83 C
23、 1 31 4 1 1 4 2 60 C 4 22 3 32 3 5 62 C 1 41 7 21 7 3 90C 4 33 3 83 4 1 88 C 1 51 6 81 6 9 90 C 4 42 2 2 2 2 4 57 C 1 6 2 4 1 2 4 3 76 C 4 51 7 51 7 6 9 l C 1 72 4 52 4 7 72C 4 63 3 03 3 3 87 C 1 82 4 02 4 2 71C 4 73 0 53 0 8 41 0 C 1 92 0 32 0 5 34C 4 89 49 5 00 C 2 01 8 51 8 7 l3C 4 91 1 61 1 7 30
24、 C 2 12 6 62 6 9 02 4C 5 0l l ll1 2 20 C 2 21 7 91 8 1 00C 5 11 0 41 0 5 22 C 2 32 5 52 5 7 89C 5 21 2 81 2 9 43 C 2 42 6 52 6 7 98C 5 31 8 l1 8 3 01 2 C 2 52 2 32 2 5 51C 5 48 68 7 02 C 2 6 2 3 6 2 3 8 6lC 5 51 4 11 4 2 62 C 2 7 1 7 31 7 4 9 lC 5 61 8 21 8 4 04 C 2 8 1 7 81 8 0 0 0 合计 1 1 2 7 42 0
25、9 C 2 9 2 2 82 3 0 5 0 平均 2 0 1 2 0 3 23 7 3 2 4 相关性分析 根据相关系数分析,5 6 份样品间的遗传相似性系数在O 1 7 - - 一0 7 1 之间( 附表A ) , 平均相似性系数为O 4 7 。C 3 与C 5 2 之间的相似性系数最小,为O 1 7 ,表明其亲缘关系 最远;C 3 5 与C 4 0 之间的相似性系数最大,为O 7 1 ,表明其亲缘关系最近,可能是同一 母树繁育的后代,但是在表型性状方面有所不一,在嫩叶颜色、花色、角数上都有出入。 - ,角表型多样性及种质资源的A F L P 研究 3 2 5 聚类分析 根据遗传相似性系数
26、矩阵按U P G M A 法对5 6 份样品进行聚类分析,结果如图3 7 所 示:在相似系数O 3 3 处,八角明显区分于红花八角、宽叶八角、莽草、小花八角、增城 八角、披针叶八角和地枫皮,9 份八角科树种与八角品种或类型首先被区分开,分为I 类( 4 7 份八角茴香品种或类型) 、I I 类( 9 份八角科树种样品) 。在相似系数0 5 2 处,I 类4 7 个八角茴香品种或类型被聚为A 、B 、C 、D 四组。A 组只有C 6 ( 高6 ) 一个品种或类 型,B 组只有C 2 1 ( 7 “ q A 3 ) 一个品种或类型,C 组只包含C 2 3 ( 六A 6 ) 一个品种或类型, 上述三
27、组明显区别于其它八角,尤其是高峰林场6 号。而D 组包含4 4 个品种或类型,又具 体分为D 1 、D 2 、D 3 三个亚组。D l 亚组包括6 个品种或类型,C 2 ( 高2 ) 、C 7 ( 高7 ) 、C 1 2 ( 高1 2 ) 、C 1 0 ( 高1 0 ) 、C 9 ( 高9 ) 、C 1 1 ( 高“) ;D 2 亚组包括1 9 个品种或类型, C 2 9 ( 六B 5 ) 、C 3 0 ( 六B 6 ) 、C 3 4 ( 派A 2 ) 、C 3 1 ( 六B 7 ) 、C 3 2 ( 六B 8 ) 、C 3 7 ( 派 A 8 ) 、C 4 4 ( 派B 1 1 ) 、C 3
28、 5 ( 派A 5 ) 、C 4 0 ( 派B 6 ) 、C 3 8 ( 派A 1 0 ) 、C 3 9 ( 派B 1 ) 、 C 4 1 ( 派8 7 ) 、C 4 2 ( 派B 9 ) 、C 4 5 ( 派特1 ) 、C 3 6 ( 派A 7 ) 、C 3 3 ( 派A 1 ) 、C 4 3 ( 派B 1 0 ) 、 C 4 7 ( 派7 8 ) 、C 4 6 ( 派2 ) ;D 3 q F _ 组包括1 9 个品种或类型,C 1 ( 高1 ) 、C 5 ( 高5 ) 、C 4 ( 高 4 ) 、C 1 6 ( 六1 ) 、C 1 8 ( 六3 ) 、C 2 5 ( 六A ) 、C 2 8
29、 ( 六B 4 ) 、C 1 7 ( 六2 ) 、C 2 4 ( 六A 7 ) 、 C 1 9 ( 六A 1 ) 、C 2 6 ( 六B 1 ) 、C 2 7 ( 六B 2 ) 、C 2 2 ( 六A S ) 、C 2 0 ( 六A 2 ) 、C 8 ( 高8 ) 、 C 1 3 ( 高1 3 ) 、C 1 4 ( 高1 4 ) 、C 1 5 ( 高1 5 ) 、C 3 ( 高3 ) 。I I 类中甲组披针叶八角、红 花八角( 红花八角、宽叶八角) 、地枫皮聚为一类,与林祁的八角分类系统【1 0 】相符,对 应于该系统的大八角群,乙组中C 5 1 与C 5 4 为莽草,C 5 2 为小花八角,
30、C 5 3 为增城八角, 有所出入。 在I 类D 2 亚组中,派阳山林场八角基因库的1 5 个八角品种或类型全部聚于该亚组。 这1 5 个样品是在八角基因库按照一定要求随机选取,能够在一定层面上说明八角基因库 的八角亲缘关系较近,作为八角基因库,可能不能达到种质资源保存的目的,还需从各 地引种新资源以充实基因资源。 2 7 广西大学硕士掌位论文 、角表型多样性及种质资源的朋:L P 研究 瞄鹏蚴O 越O ,l 图3 - 75 6 份样品的A F L P 分子聚类图 F i g 3 - 7T h ed e n d r o g r a mo f5 6I l l i c i a c e a es a
31、 m p l e sb yc l u s t e r i n ga n a l y s i sw i t hA F L Pf i n g e r p r i n t g - - 西大掌硕士掌位论文、角表型多样性及种质资源的A F L P 研究 3 3 八角形态标记结果与分析 3 3 1 样品基本信息 所选取的4 7 份八角品种或类型样品与A F L P 分子标记样品相同,样品的来源及编 号见表3 7 。4 7 株植株中柔枝八角1 2 株、硬枝八角2 4 株、普通八角1 1 株;叶形以长 椭圆居多,叶缘波浪状1 7 株、平展状3 0 株;叶长从7 4 1 4 5c m ,平均1 0 9c m ;
32、叶宽 2 2 一- 5 0c m ,平均3 7c m ;叶厚0 4 “ - - 0 6c m ,平均0 4 5c m ;叶柄长1 6 5 2c m ,平均 3 2c m ;花色有淡红色、红色、白色、米黄色4 种颜色,其中淡红色2 5 株、红色1 4 株、 白色5 株、米黄色3 株;嫩叶颜色有红色、绿色2 种颜色,其中红色1 7 株、绿色3 0 株, 详见附表B 。 3 3 2 编码结果 通过分析,选取有代表性、有分类价值的1 1 个表型性状进行编码( 表3 1 1 ) ,分别 是分枝类型、花色、叶长、叶宽、叶长宽比、叶厚、叶形、叶缘、果尖、果柄长、嫩叶 颜色。 表3 - 11 样品表型性状及编
33、码 T a b 3 11P h e n o t y p i et r a i t sa n dt h e i rc o d i n g 编码表型性状编码处理 C o d e P h e n o t y p i ct r a i t sC o d i n g 分枝类型 T r e ep o s t u r e 2 花色f l o w e rc o l o r 叶长l e a fl e n g t h 叶宽l e a f w i d t h 叶长宽比L W 叶厚l e a ft h i c k n e s s 叶形L e a fS h a p e 柔枝1 普通2 硬枝3 淡红l 红2 白3 米黄4
34、 根据测量记录 根据测量记录 _ 、+。 。 、 叶长叶宽+ 根据测量记录 叶顶宽于叶基1 等宽2 3 4 5 6 7 广西大掌硕士掌位论文、角表型多样性及种质资源的A F L P 研究 续表3 1 1 从附表B 中提取所需数据,并按表3 1 l 中所述分别赋值,得到样品编码表。 表3 1 2 样品编码表 n l b 3 1 2C o d e o f 4 7I l l i c i u ms a m p l e s 霉萎釜花色叶长叶宽管叶厚叶形叶缘果尖繁荔茗 c 1 l 3 8 63 22 6 90 5 4l211 61 c 2l21 2 73 23 9 70 512l4l e 3ll1 33
35、53 7 1O 4 21l24 52 c 4211 0 43 92 6 70 4 612l3 1l c 532l O 14 2 2 40 42 ll3 5l e 6221 24 12 9 3O 421l3 51 c 7321 0 84 82 2 50 4 41222 51 c 824l l3 72 9 70 4 2l113 32 e 9 1l1 0 13 62 8 1O 4l214 22 c 1 0228 63 12 7 7O 4 22222 21 c ll3l9 23 12 9 70 4 42l12 52 c 1 2141 1 43 13 6 80 5 42 2 24 22 c 1 32l1
36、 3 54 62 9 30 52213 11 c 1 42l1 23 23 7 50 412251 c 1 52l1 33 24 0 6 0 4 6 l 22 42 c 1 6 3l1 0 9 4 82 2 7O 52223 6 1 c 1 73 2 1 3 23 340 42213 51 c 1 8311 1 142 7 8O 522142 e 1 9 31l l4 6 2 3 9O 4 2 2 l12 2 l e 2 03 111 3 3 73 0 50 41213 l e 2 l311 3 53 93 4 60 4 42222 6l e 2 2 3 11 1 93 93 0 50 422
37、l3 2l e 2 33 l1 1 24 22 6 70 4 6l 21 1 8l c 2 4311 3 2 3 8 3 4 7 0 4 2 2l2 4 2 3 0 广西大掌硕士掌位论文,、角表型多样性及种质资源的剐F L P 研究 续表3 1 2 霉萎董花色叶长叶宽管 叶厚叶形叶缘果尖 紫蕤 c 2 5321 1 54 22 7 40 42l222 c 2 6ll1 2 43 93 1 8O 4 421l 2 5l e 2 7 1 l1 2 53 63 4 70 4l225 12 c 2 8121 4 54 13 5 40 42ll2 6l c 2 932l l3 72 9 70 42122
38、 4 1 e 3 02l1 2 7 3 93 2 60 4 622l2 72 c 3 l32 1 352 60 52l22 7l e 3 2321 2 94 13 1 5O 42ll32 c 3 3339 43 22 9 40 422l3 5l c 3 4121 0 63 23 3 1 0 52215 2l c 3 534 9 73 52 7 70 52l23l c 3 62l9 83 32 9 70 52222 32 c 3 72l9 93 330 62l22 72 c 3 8337 43 52 1 10 4222 2 5l e 3 92 l7 53 32 2 70 42ll3 71 e 4
39、 03l1 03 42 9 40 52224 52 , c 4 ll29 333 10 42223 42 e 4 23l9 33 62 5 80 42l24 51 c 4 33l8 24 2 0 50 62222 82 e 4 4 33832 6 70 412l3 51 c 4 5l29 642 40 42222 4l c 4 6339 23 7 2 4 9 0 62 1l2 8l c 4 7ll 1 0 52 24 7 70 5l223 5l 将上表输入S P S S l 8 0 分析软件进行分析,算出标准差、平均数等数据,计算变异 系数( 变异系数= 标准差平均数) ,得到4 7 个八角样
40、品的1 1 个表型性状的基本情况统 计表( 表3 1 7 ) 。可以更直观的看出不同供试材料之间存在很大的差异,不同的性状在不 同的材料之间表现出了不同程度的多样性。1 1 个表型性状均存在不同程度的变异,平均 标准差为0 6 8 1 6 ,平均变异系数为2 3 8 9 。其中花色的变异系数最大,为5 3 2 8 ,其 次为分枝类型、嫩叶颜色、果尖形状,变异系数最小的是叶厚,为1 3 2 l 。 表3 1 3 八角表型多样性的基本统计数据表 T a b 3 - 1 3T h eb a s i cs t a t i s t i cd a t ao f 4 7I l l i c i u ms a
41、m p l e sb a s e do nm o r p h o l o g i c a lm a r k e r s 3 l 广西大掌硕士掌位论文、角表型多样性及种质资灞E 的朋3 L P 研究 续表3 1 3 3 3 3 表型性状编码处理结果 经检验,叶长、叶宽、叶长宽比、叶厚、叶柄长等性状基本符合正态分布,在此参 照刘孟军【9 2 】的概率分级方法进行分级,即用( X 1 2 8 1 8 S ) ,( X 一0 5 2 4 6 S ) ,( X + 0 5 2 4 6 S ) 和( X + 1 2 8 1 8 S ) 4 个分级点分为5 级,分别编码为1 、2 、3 、4 、5 。经计算
42、,叶长分级点 为8 6 6 、9 9 9 、l1 8 3 、1 3 1 5 ,叶宽分级点为2 9 8 、3 4 、3 9 8 、4 4 ,叶长宽比为2 0 7 、 2 2 8 、3 3 、3 7 2 ,叶厚分级点为0 3 7 、0 4 2 、0 4 8 、0 5 3 ,叶柄长分级点为2 0 8 、2 7 5 、 3 6 7 、4 3 3 ,换算后代入表3 1 2 中得到新的编码表,见表3 1 4 。 3 3 4 表型性状的相关性 对表3 1 4 进行相关分析得到附表C 。从表中可以看出,在1 1 个表型性状间的5 5 对组合中,呈显著相关的有1 0 对,其中3 对呈极显著相关、7 对呈显著相关
43、。叶长与叶 长宽比呈极显著正相关,叶长宽比与分枝类型、叶宽呈极显著负相关。分枝类型与叶宽、 叶长与叶宽、叶形与分枝类型、叶柄长与叶长宽比呈显著正相关,叶形与叶长宽比、叶 缘与叶形、花色与叶长呈显著负相关。 3 3 5 八角样品表型性状的聚类分析 对4 7 个材料进行聚类分析,获得基于表型性状的亲缘关系树状图( 见图3 8 ) 。在 遗传距离为2 2 时,4 7 个八角品种( 类型) 被分成4 组:第1 组有1 4 个品种( 类型) , 分成2 个亚群,1 个亚群包括C 3 3 ( 派A 1 ) 、C 4 4 ( 派B 1 1 ) 、C 3 8 ( 派A1 0 ) 、C 1 0 ( 高 1 0
44、) 、C 4 1 ( 派B 7 ) 、C 4 5 ( 派特1 ) 、C 3 6 ( 派A 7 ) 、C 3 7 ( 派A 8 ) 、C 1 1 ( 高1 1 ) 、C 4 3 ( 派B 1 0 ) ,另1 个亚群包括C 1 8 ( 六3 ) 、C 4 0 ( 派B 6 ) 、C 3 9 ( 派B 1 ) 、C 4 2 ( 派B 9 ) ; 第2 组有2 0 个品种( 类型) ,分成2 个亚群,1 个亚群包括C 1 9 ( 六A 1 ) 、C 3 1 ( 六B 7 ) 、 C 7 ( 高7 ) 、C 1 6 ( 六1 ) 、C 2 3 ( 六A 6 ) 、C 1 3 ( 高1 3 ) ,另1 个
45、亚群包括C 2 1 ( 六A 3 ) 、 C 2 4 ( 六A 7 ) 、C 1 7 ( 六2 ) 、C 2 5 ( 六A 8 ) 、C 2 9 ( 六B 6 ) 、C 2 6 ( 六B 1 ) 、C 3 0 ( 六B 6 ) 、 C 6 ( 高6 ) 、C 3 2 ( 六B 8 ) 、C 5 ( 高5 ) 、C 2 0 ( 六A 2 ) 、C 2 2 ( 六A 5 ) 、C 4 ( 高4 ) 、C 2 8 3 2 广西大掌硕士掌位论文,、角表型多样性及种质资源的A F L P 研究 ( 六B 4 ) ;第3 组有8 个品种( 类型) ,也分成两个亚群,1 个亚群包括C 1 4 ( 高1 4
46、) 、C 1 5 ( 高1 5 ) 、C 3 ( 高3 ) 、C 2 7 ( 六B 2 ) 、C 9 ( 高9 ) ,另1 个亚群包括C 2 ( 高2 ) 、C 3 4 ( 派 A 2 ) 、C 4 7 ( 派7 8 ) ;第四组有5 个品种( 类型) ,分成2 个亚群,1 个亚群包括C 3 5 ( 派 A 5 ) 、C 4 6 ( 派2 ) 、C 8 ( 高8 ) 、C 1 2 ( 高1 2 ) ,另1 个亚群仅有1 个品种( 类型) C 1 ( 高 1 ) 。 3 3 广西大学硕士掌位论文 A F L P 研究 角表型多样性及种质资溻【的 表3 1 4 换算后的样品编码表 T a b 3
47、1 4C o d eo f 4 7 l i c i u ms a m p l e sa f t e rc o n v e r s i o n 广西大掌硕士掌位论文、角表型多样性及种质资- :l t t c aA F L P 研究 使用- - F J 白联接( 组同) 的树状图 重新调整距离聚癸会并 图3 8 基于表型性状的八角品种( 类型) 聚类图 F i g 3 8D e n d r o g r a mb a s eo nP h e n o t y p i eT r a i t sf o r4 7l l l i c i u mc u l t i v a r s 3 5 广西大学硕士学位论文角表型多样性及种质资源的A F L P 研究 4 1 八角表型多样性 4 结论与讨论 叶片长度、叶片宽度、叶柄长、叶片厚度、长宽比、叶面积、重量等7 个性状均达 到极显著差异水平,在叶各项指标中以叶片面积F 值最大、P 值最小,一定程度说明八 角叶型面积差异性比较大。7 个数量性状的变异系数从小到大依次为:叶厚 叶柄长 叶宽 长宽比 叶长 叶重 叶面积。 八角分枝习性以硬枝类型为主,为5 5 6
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