HBV基因型与前CC启动子变异及抗病毒疗效的关系.pdf
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1、中华实验和 临床病毒学 杂志 2 0 0 6 年 3 月第 2 0 卷第 t 期C h in e s e J E x n CG. V ir . I , M a r c h 2 0 0 6 , V o 1 2 0 . N o . I . 论 著 . H B V基因型与前 C / C启动子变异及 抗病毒疗效的关系 袁静周伯平龚作炯徐 六妹蒋小玲满上稚 史 【 摘要 目的了解深圳市乙型肝炎病毒 ( H B V) 基因分型情况, 探讨H B V基因型与前C /C启动 子变异、 乙肝的病程进展及抗病毒疗效的关系。方法用单克隆抗体E L I S A法 ( . A b s E L I S A) 对深圳 市1
2、 6 5例H B V感染者进行H B V基因分型; 随机抽取2 4 例慢性乙型肝炎 ( C H B ) 患者, 用基因芯片技术 检测H B V前C / C启动子变异; 回顾性分析 H B V基因型与干扰素、 贺普丁抗 H B V疗效的关系。结果 101 6 5例患者中, 以 B型 1 0 6 例 ( 6 4 . 2 %) 和C型4 8 例 ( 2 9 . 1 %) 为主。慢性无症状乙肝病毒携带者 ( A S C ) 组 B型占9 5 . 4 %, 肝硬化 ( L C ) 组 C型占6 4 . 7 % ( P 0 . 0 5 ) ( 2, 2 4 例 C H B患者中, 1 6 例 ( 1 0
3、例 B型, 6 例 C型) 发生 H B V前 CC启动子变异: 前C区变异 ( n t 1 8 9 6 , 1 8 6 2 ) 者 1 0例 ( B型 9 例, C型 I 例) , 基本 C区启动子变异 B C P ) 变异( m 1 7 6 2 , 1 7 6 4 ) 者6例 ( B 型 1 例, C型5 例) 。用干扰素治疗的 2 7 例 H B e A g ( + ) C H B患者, 达到完全应答者 B型 1 1 例 ( 6 2 . 5 %) 较 C型 1例 ( 9 . 1 %) 多见 ( P 0 .0 5 ) 用贺普治疗的2 9例 H B e A g( +) C H B患者, 持续
4、应答者 B型 1 5 例 ( 7 8 . 9 %) 较 C型3例 ( 3 0 . 0 %) 多见 ( P 0 .0 5 ) 。结论深圳市H B V基因分型以 B型为主, C型次之。7, C型较 B型易 发生 R C P变异, 发生肝硬化机会较高, 且对十扰素及贺普丁疗效较差 I 主题词j 肝炎病毒, 乙型: 基因分型; 前C / C区突变: 抗病毒治疗 R e l a ti o n s h i p b e tw e e n S h e n z h e n HB V g e m,勺p e a n d p r e c o r e / c o r e p r o mo te r mu t a t i
5、 o n a n d a n ti v ir a l e f f e c ts Y 6 A N J i n g , Z H O L 1 B o- p i n g , G O N G Z u o- j io ry ; , X U L iu - 二 , J IA N C X o - li n g , S f iz o k a m i b fA S A S H I S h e n z h e n F . - t I n k . H o sp a a l , S h e n z h .e n 5 1 8 0 2 0 , C h in u ( A b s t r a c t O b j e c ti v
6、 e T o s tu d y t h e re la tio n s h i p b e t w e e n h e p a t it is B r i m s g e a o t y-p in g 5 h e n z h e a is o la te s a n d H B V p re c o r e / c o r e p ro m o t e r m u ta t i o n a n d a n t iv i r a l e ff e c ts . Me th o d T h e H B V g e n o t y p in g o f 1 6 5 p a t ie n t s w
7、it h H B V w a s c a r r ie d o u t w i th m A lr s E L I S A . H B V p r c c o r e / c o re p rom o te r m u ta t io n w a s d e t e c te d w i th g e n e c h i p te c h n o lo g y in 2 4 p a ti e n ts w it h C HB . T h e r e la t i o n sh i p b e tw e e n H B V g o n o ty p i n g a n d in te rf c
8、ro n , l a m i v u d in e e ff e c ts w a s a n a l y z e d . R e s u lt ( D O u t o f 1 6 5 c n s e s , 1 0 6( “ 2 % ) o f t y p e B b u t 4 9 ( 2 9 . 1 % ) o f ty p e C w e r e f o u n d . T y p e B a c c o u n t e d fo r 9 5 . 4 % in g ro u p A S C , a n d ty p e C f o r M7 % in gr o u p忧 ( P 0 .
9、 0 5 ) .O P r e c o r e / c o ro p ro m o te r mu t a t io n w a s fo u n d i n 1 6 c a se s ( 1 0 o f ty p e . B , a n d 6 o f t y p e C ) o u t o f 2 4 c a se s . O u t o f 1 6 c a s e s , p re c o n e / c or e p ro m o te r m u ta t io n ( m1 8 9 6 , 1 8 6 2 ) w a s fo u n d i n 1 0 c a s e s ( 9
10、 c a s e s o f ty p e B a n d 1 c a s e o f t y p e C , w h i le b a sa l c o r e, p r o m o te r m u t a t io n ( R C P m u ta t io n , n 1 17 6 2 , 1 7 6 4 ) w a s f o u n d in 6 o a s e s ( 1 c a 、 e o f ty p e B。 耐5 o f t y p e C 遥 ) A m o n g 2 7 p a ti e n t s w i th C H B H B A g(+)tr e a te
11、d w it h i n te rf e ro n , l l c a s es o f ty p e B b u t c .a . o f ty p e C w e r e t e s t e d t o b e f u ll y r e s p o n s i v e to i n t e r fe ro n . A m o n g 2 9 p a t ie n t , w i th C H B H B A g( +) t re a te d w it h la m iv u d in e , 1 5 c as e s o f ty p e B b u t 3 c a s e s o f
12、ty p e C w e r e t e s t e d t o b e c o n tin u o u s ly r e sp o n s i v e to l a m i-d i n e 一 C o n c l u s io n H B V g e n o ty p e p o p u l a r it y i n S h e -h e n a r e a w a s c l a s s i fi e d、t y p e B t h e f ir s t a n d ty p e C th e s e c o n d . OT y p , C s e e m s m o re a p t
13、to d e v e lo p B C P rou t a fl o n a n d c in b o s is , a n d to b e l e s s res p o n si v e t o i n t e r fe ro n o r l u m i v u d i n e . K e y w o r d s H e p a t it is B v , o L。 , G e n o ty p l n g ; P re c o r e / c o r e m u ta ti o n ; A n ti - v i r u s t h e r a p y 目前对 H B V基因型影响乙肝的
14、病程进展及抗 病毒疗效 的原因仍不清楚。我们用单 克隆抗体 E L I S A法 ( - A b s E L I S A ) 对深M 市 1 6 5例 H B V感染 作者单 位 : 5 1 8 0 2 0 广东省深训 市 东湖 医院 袁静 ( 现为武 汉大 学医学 院在读 博士牛 ) 、周 伯平 、 徐 六妹 、 蒋 小玲 ) ; 武 汉 大学 医学院 ( 龚作 炯) 日本名古屋 大学医 学研究生 院 ( 溜 上雅史 ) 者进行 H B V基因分型, 用基因芯片技术检测 H B V 前C / C 启动子变异, 选择H B e A g ( + ) C H B( 中度) 患 者进行干扰素及贺普丁
15、的临床疗效研究, 探讨 H B V 基因型与前C / C 启动子变异、 乙肝的病程进展及抗 病毒疗效的相关性 。 1 1 期 C h i n e s e J E x p C h . V iro l . M e m h 2 0 0 6 , V o l 2 0 中华 实验和临床 病毒学 杂志 2 0 0 6 年 3 月第 2 0 卷 第 材料和方法 1 . 1 病例选择与分组2 0 0 2年至2 0 0 5 年 6 月在深 圳市东湖医院住院及门诊患者共 1 6 5例, 其中男 1 3 1 例, 女3 4例, 年龄3 一7 5 岁。诊断符合2 0 0 0 年第十 次全国传染病与寄生虫病学会和肝病学会
16、联合制定 的 病毒性肝炎防 治方案1 “ 、 1 6 5 例患者中慢性无症 状乙肝病毒携带( A S C ) 2 1 例、 急性乙肝( A H B ) 4例 ( 急重肝2 例) 、 慢性乙肝( C H B ) 1 0 6例、 肝硬化( 1 .C ) 1 7 例、 肝癌( H C C ) 1 0例、 慢重肝 7 例。 1 . 2 试剂来源基因分型m A b s E L I S A试剂由口本 名古屋大学医学研究生院提供。基因芯片检测试剂 由深圳易生堂公司提供。 1 . 3方法 1 . 3 . 1 - A b s E L IS A 基因分型 2 1 按m N b s E L I S A 基 因分型试
17、剂盒的操作步骤进行。微量反应板各孔壁 用H B s A g 的公共决定簇 。 的单克隆抗体 包被; 加 稀 释液2 5 川及血清1 0 川 ; 塑料薄膜封好, 室温置十 混 匀器上摇动3 0 m in , 血清巾的H B s A g 与m A b 结合固 定; 冲洗各孔6次, 加人 4 种抗原决定簇 ( m, k , s , u ) 的酶 标单抗各5 0 J A , 与相应的抗原特异结合, 塑料 薄膜封好, 室温置于混匀器上摇动2 h , 再冲洗各孔 6次; 最后加人基质酵素液经酶催化而显色并终止 反应, 上机在4 5 0 n m处读取各光的光吸收度同时 设阴性和阳性对照各4孔 1 . 3 .
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